沙琨　楊誼　王敬真

(1.鄭州人民醫(yī)院 檢驗科　河南 鄭州　450003； 2.鄭州人民醫(yī)院 輸血科　河南 鄭州　450003)

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多發(fā)性骨髓瘤化療中網(wǎng)織紅細胞與網(wǎng)織血小板聯(lián)合檢測的臨床應(yīng)用分析

沙琨1楊誼1王敬真2

(1.鄭州人民醫(yī)院 檢驗科河南 鄭州450003； 2.鄭州人民醫(yī)院 輸血科河南 鄭州450003)

目的探討多發(fā)性骨髓瘤(MM)化療過程中聯(lián)合檢測網(wǎng)織紅細胞(RET)及網(wǎng)織血小板(RP)的臨床應(yīng)用價值。方法選取鄭州人民醫(yī)院血液內(nèi)科2012年5月至2014年12月收治的38例MM患者(MM組)，從體檢中心隨機選取20例健康體檢者作為健康組。檢測健康組和MM組(化療前和化療后第5、10、15、20天)WBC、PLT、RET相關(guān)參數(shù)。結(jié)果化療前，MM組WBC和PLT水平低于健康組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；MM組IRF高于健康組(P<0.05)；兩組RET、IPF差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。化療后，各檢測參數(shù)均開始下降，WBC、PLT、RET分別在化療后第20、15、15天回升。IRF和IPF分別在第10天開始回升。結(jié)論在MM化療過程中，IRF和IPF反應(yīng)骨髓功能的變化情況比WBC和PLT更早，是監(jiān)控骨髓造血功能的敏感指標。

多發(fā)性骨髓瘤；網(wǎng)織紅細胞；網(wǎng)織血小板

多發(fā)性骨髓瘤(multiple myeloma，MM)是B細胞起源的漿細胞克隆增生性惡性疾病，多發(fā)生于中老年人，化療是治療MM的基本和主要手段，化療過程產(chǎn)生的骨髓抑制是臨床最關(guān)注的問題之一[1]。反映骨髓造血功能的傳統(tǒng)指標有外周血白細胞(WBC)、血小板(PLT)等。隨著檢測技術(shù)的進步，網(wǎng)織紅細胞(reticulocyte，RET)、網(wǎng)織血小板(reticulated platelets，RP)在化療后預(yù)測骨髓造血功能恢復(fù)上也起著越來越重要的作用。本文動態(tài)觀察MM化療過程中WBC、PLT、RET及RP水平，探討其變化規(guī)律，為臨床診治提供參考依據(jù)。

1　資料與方法

1.1一般資料選取鄭州人民醫(yī)院血液內(nèi)科2012年5月至2014年12月收治的38例MM患者(MM組)，男28例，女10例，初治病例25例，復(fù)發(fā)病例13例，年齡49～79歲，平均年齡(62.0±12.8)歲，均符合《血液病診斷及療效標準》[2]，采用傳統(tǒng)聯(lián)合化療方案，包括VAD方案(長春新堿、阿霉素、地塞米松)和MP方案(美法侖、潑尼松)。從體檢中心隨機選取20例健康體檢者作為健康組。

1.2標本采集采用EDTA-K2真空抗凝采血管分別采集MM患者化療前和化療后第5、10、15、20天早晨分別抽取靜脈血1.5～2 ml。健康組采集清晨空腹血。所有標本采集后迅速混勻，應(yīng)用全自動血液分析儀(SYSMEX XE-2100)進行檢測，3 h內(nèi)完成測定。所有檢測均采用原廠配套試劑和質(zhì)控品。

1.3觀察指標記錄WBC、PLT、RET相關(guān)參數(shù)，RET參數(shù)包括網(wǎng)織紅細胞絕對數(shù)(RET#)、網(wǎng)織紅細胞比率(RET%)、高熒光強度網(wǎng)織紅細胞比率(HFR)、中熒光強度網(wǎng)織紅細胞比率(MFR)、低熒光強度網(wǎng)織紅細胞比率(LFR)、未成熟網(wǎng)織紅細胞指數(shù)(IRF =MFR+HFR)以及網(wǎng)織血小板比率(IPF)。

2　結(jié)果

2.1檢測結(jié)果化療前，MM組WBC和PLT水平低于健康組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；MM組IRF高于健康組(P<0.05)；兩組RET、IPF差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

2.2化療前后各監(jiān)測指標的變化情況化療開始后，第5天檢測WBC下降(P<0.05)，第20天開始回升；PLT第5、10、15天檢測結(jié)果低于化療前(P<0.05)，第15天較第10天輕微回升，但兩者差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，第20天顯著回升；RET在第5天開始下降(P<0.05)， 第15天回升， IRF在第5天下降(P<0.05)，在第10天開始回升，第15天顯著回升，第20天回升到化療前水平。RET%、IRF與WBC 和PLT比較，回升早，回升快。IPF在化療后第5天降低明顯，第10天明顯回升，第15天達到峰值。見表2。

2.3RET與RP的相關(guān)性在化療過程中，IRF與IPF呈正相關(guān)(r=0.591，P<0.05)。

3　討論

MM是一種漿細胞惡性增殖性疾病，是骨髓微環(huán)境中惡性漿細胞克隆性異常增生，導(dǎo)致正常的多克隆漿細胞增生和免疫球蛋白分泌受到抑制。據(jù)統(tǒng)計，其發(fā)病率約占血液系統(tǒng)惡性腫瘤的13%，占腫瘤性疾病的1%，近年來有逐漸增長的趨勢[3]。MM的主要治療手段是化療，骨髓抑制是化療過程中主要的副反應(yīng)之一，由于紅細胞在血液中所占比例較大，MM患者化療后骨髓抑制情況在紅細胞系統(tǒng)的表現(xiàn)不明顯，而在白細胞系統(tǒng)和巨核細胞系統(tǒng)表現(xiàn)突出。因此，臨床上常觀察WBC和PLT水平來了解骨髓抑制和恢復(fù)情況[4]。本文對MM患者化療前后RET和RP參數(shù)的變化情況進行觀察，并與WBC和PLT 做比較，探討其變化趨勢。

表1　兩組各項指標比較

注：與健康組比較，aP<0.05。

表2　化療前后各參數(shù)的變化情況

注：與化療前比較，bP<0.05。

RET是骨髓釋放的新生RBC，細胞質(zhì)含有殘存的嗜堿性核糖核酸(RNA)，經(jīng)過特殊染料染色呈網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)而得名。本檢測采用全自動血液分析儀的流式細胞分析原理，使用熒光染料(polymentine和oxazine)與RET內(nèi)RNA結(jié)合后，測定RET的熒光強度，RNA含量越多，熒光強度越強，RET也就越不成熟，反之亦然。根據(jù)熒光強度的大小，將RET分為HFR、MFR、LFR三部分，IRF是HFR與MFR之和。

RP是巨核細胞生成PLT過程中的未成熟PLT，巨核細胞活性增強，則PLT中RNA含量升高，即RP升高，體積較大。檢測時，RP經(jīng)熒光染色后，通過儀器的半導(dǎo)激光束形成前向散射光和熒光強度，前向散射光代表細胞大小，可區(qū)分RBC和PLT，熒光強度反映RNA水平，區(qū)分RP和成熟PLT。未成熟的RP占PLT總數(shù)的百分比即網(wǎng)織血小板比率(IPF)。IPF升高可反映PLT的更新加速。由于化療后PLT總數(shù)下降，RP絕對值勢必受到影響，因此，IPF應(yīng)用于監(jiān)測更能判斷巨核細胞活性，判斷PLT生成能力，是體現(xiàn)骨髓造血的敏感指標[5-6]。

本文結(jié)果顯示，MM患者WBC和PLT顯著下降(P<0.05)，IRF較健康組高(P<0.05)，RET和IPF與健康人差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。開始化療后，由于藥物的作用，各項觀察檢測指標(WBC、PLT、RET、IRF、IPF)迅速下降(P<0.05)，隨著患者造血功能的逐漸恢復(fù)，各項指標在不同時間逐步恢復(fù)，IRF和IPF首先在第10天回升，RET在第15天回升至化療前水平，WBC在第20天開始升高；PLT在第15天較第10天輕微升高，第20天恢復(fù)接近化療前水平?？傮w上看，RET、IRF、IPF與WBC和PLT相比，回升早，回升快，且IRF與IPF變化呈正相關(guān)，不受感染及輸入血小板的影響，更能監(jiān)測急性造血細胞停滯是否發(fā)生，對骨髓造血功能的監(jiān)控起到重要作用。

本文檢測MM患者外周血RET和RP參數(shù)，用血量少，無須骨髓穿刺，可以早期反應(yīng)MM骨髓功能的變化，提示臨床預(yù)防貧血和出血等并發(fā)癥，減少預(yù)防性血小板輸注，節(jié)約稀缺的血液資源，減輕患者的痛苦和經(jīng)濟負擔[7-8]，同時為制定后續(xù)的治療方案提供依據(jù)。

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R 733.3

10.3969/j.issn.1004-437X.2016.08.013

2015-12-08)