□ 陳彩彥　陳丹萍　鄧健娣　佛山出入境檢驗檢疫局

食品中菌落總數(shù)測定的不確定度分析

□ 陳彩彥陳丹萍鄧健娣佛山出入境檢驗檢疫局

根據(jù)食品中菌落總數(shù)測定的原理和步驟建立數(shù)學模型，對不確定度各分量進行分析，找出影響不確定度的主要因素，最終得出食品中菌落總數(shù)測定的不確定度。結果表明：當檢驗結果以2次測量對數(shù)值的平均值表示時，其取值區(qū)間分布于±0.042之間。

菌落總數(shù)是食品微生物學檢驗的一個常規(guī)項目，各類預包裝食品的衛(wèi)生指標中均要求檢驗菌落總數(shù)項目，其限量標準根據(jù)產品類型的不同，可能低至10 CFU/g，也可能高達數(shù)萬CFU/g。當結果處于臨界值時，其取值區(qū)間就尤為重要。

檢驗方法

按《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 菌落總數(shù)測定》（GB 4789.2-2010）規(guī)定，無菌操作取樣25 g，加入225 mL磷酸鹽緩沖液中制成1:10稀釋液，制備2個連續(xù)稀釋度的樣品勻液。每個稀釋度接種2個平皿各1 mL。傾注約15 mL平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基，于36℃培養(yǎng)48 h。培養(yǎng)結束后，計算并報告菌落總數(shù)。

不確定度來源及分布

在菌落總數(shù)檢驗中，引起結果不確定度的因素主要有取樣準確性、樣品保存條件、人為操作的誤差、培養(yǎng)條件及重復測量等。經(jīng)總體評價認為，B類不確定度對合成不確定度貢獻較小，重復測量帶來的不確定度占主要部分。所以，在此主要考慮重復測量的不確定度。

數(shù)學模型

設菌落總數(shù)為A，試驗結果為x，則：A=xCFU/g。

計算不確定度分量

分40次對40個不同樣品進行檢測，得到每個樣品的菌落總數(shù)結果，見表1。第j個樣品兩個平皿結果分別為x1j和x2j。由于是多次獨立檢測，故采用合并樣本標準差進行計算。

殘差平方和求和：

合并樣本標準差：

兩次檢測平均值的標準不確定度：

取置信概率p=95%，v=40，查t分布表得t95(40)=2.02

報告：當檢驗結果以2次測量對數(shù)值的平均值表示時，其取值區(qū)間分布于±0.042之間。當檢驗結果以2次測量平均值表示時，相對于對數(shù)值的取值再取反對數(shù)得其取值區(qū)間分布，這個取值區(qū)間適合于任何一次測量。

表1　20個樣品菌落總數(shù)測試結果 單位：CFU/g

應用實例

表1中，第1個樣品，對數(shù)值的平均值3.377，其取值區(qū)間在3.335～3.419，取反對數(shù)得2次測量平均值的取值區(qū)間為：2162～2624，菌落總數(shù)=2.39×103±2.3×102CFU/g。

第8個樣品，對數(shù)值的平均值1.477，其取值區(qū)間在1.435～1.519，取反對數(shù)得2次測量平均值的取值區(qū)間為：27～33，菌落總數(shù)=30±3 CFU/g。