王天華 李思敏 王璐文 張亞寧
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核心抗原在乙肝五項病毒標志物檢出模式中表達分析
王天華李思敏王璐文張亞寧
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目的探討核心抗原與乙肝五項病毒標志物檢出模式中的關系。方法采用普查方法對3796例血清標本用酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)進行六項HBV標志物(HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc、HBcAg)檢測,并對檢測結果進行統(tǒng)計分析。結果3796例血清標本中HBV總感染率51.95%,有15種檢出模式,HBcAg在HBsAg、HBeAg、抗-HBc(1、3、5);HBsAg、抗-HBe、抗-HBc(1、4、5);HBsAg、抗-HBc(1、5)中被檢出,占40.71%。結論健康人群體檢在傳統(tǒng)五項HBV檢測基礎上增加核心抗原(HBcAg)檢測,能準確反映HBV感染者血清中Dane顆粒的存在及肝內(nèi)HBV復制,為臨床提供更加可靠的信息。
體檢;核心抗原;乙型肝炎標志物;乙肝模式
文章編號:2095—9559(2016)04—2355—02
完整的HBV又稱為Dane顆粒,核心抗原(HBcAg)存在于Dane顆粒核心,是HBV的結構蛋白即核殼蛋白,HBcAg與抗-HBc以復合物的形式存在于受感染者的肝細胞內(nèi)[1],并包裝成HBV-DNA。幾乎所有的HBV感染均會出現(xiàn)抗-HBc。檢測中我們發(fā)現(xiàn)HBcAg與抗-HBc常常同時出現(xiàn),這是由于一方面HBcAg作為強免疫原刺激機體產(chǎn)生抗-HBc,另一方面HBcAg則作為HBV的結果蛋白組裝成新的Dane顆粒,因為外面包裹著表面抗原(HBsAg)將其封閉,不能被抗-HBc中和。加之血清中極少有游離的HBcAg,使用常規(guī)方法不能直接檢出HBcAg[2],我們采用間接法開殼劑處理抗體夾心法即可將HBcAg和抗-HBc同時檢出。
1.1 一般資料 檢測樣本來自于體檢中心日常流動體檢人群,男性2040例,女性1756例,年齡19-71歲,樣本均進行了HBV表面抗原(HBsAg)、表面抗體(抗-HBs)、e抗原(HBeAg)、e抗體(抗-HBe)、核心抗體(抗-HBc)、核心抗原(HBcAg)6項HBVM檢測。
1.2 檢測試劑與方法
1.2.1 試劑 五項HBVM(兩對半)檢測試劑采用廈門新創(chuàng)生物科技有限公司生產(chǎn)的試劑盒;核心抗原(HBcAg)檢測試劑采用北京美迪科生物技術有限公司生產(chǎn)的試劑盒;檢測儀器采用亞特斯生產(chǎn)的酶標儀。
1.2.2 方法 六項HBVM均采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA),嚴格按照試劑盒操作規(guī)程進行檢測。核心抗原(抗-HBc)按試劑盒要求血清標本1:30稀釋后檢測,并按試劑盒說明書進行結果判定。
1.2.3 統(tǒng)計學處理 數(shù)據(jù)計算采用χ2檢驗。
2.1 表達模式分布 3796例門診體檢共檢出6種HBVM感染15種表達模式,見表1
表1 3796例健康體檢人群乙肝病毒標志物表達模式分布
2.2HBcAg陽性與常見模式的關系 3796例門診體檢共檢出HBsAg表達66例,其與HBV常見模式的關系,見表2
表2 核心抗原(HBcAg)陽性與常見模式的關系
通過3796例門診體檢人群血清樣本HBVM檢測,共檢出15種表達模式(表1)。模式2為抗-HBs表達,其比例達45.79%,說明人群接近半數(shù)已獲得了保護性中和抗體,若因人群自然感染,只產(chǎn)生單一抗-HBs的幾率較小,分析原因可能與計劃接種乙肝疫苗有關。本案男性HBVM未表達者(全陰性)1037例,占總數(shù)的27.32%,HBV感染者(含抗-HBs表達,下同)1003例,占總數(shù)的26.42%;女性HBVM來表達者787例,占總數(shù)的20.73%,HBV感染者969例,占總數(shù)的25.53%,男女合
計HBV感染率為51.95%,與全國流行病學調(diào)查結果相符[3]。從表1看出,小三陽(模式6)在本案中所占比例高于大三陽,且男性明顯高于女性(P<0.01),說明該人群慢性感染者多于急性感染者,或因編碼HBsAg的ere-C基因突變,產(chǎn)生終止密碼,從而阻止HBsAg的分泌,產(chǎn)生不出HBeAg使e系統(tǒng)轉換,但抗-HBe仍可陽性[4],導致檢測中抗-HBe的陽性率高于HBeAg。
綜上所述,HBV血清標志物檢測是臨床分析和判斷感染與傳染性的重要依據(jù)。HBcAg是乙肝病毒復制的直接標志物,其表達強度與HBV DNA定量有較強正相關聯(lián)。檢測血清中的HBcAg,相當于檢測循環(huán)著的乙型肝炎病毒[5]。用ELISA法檢測血清HBcAg無放射污染,不受同位素半衰期長短的影響,檢測靈敏度較高,方法快捷,是一種值得推薦的檢測方法。
[1] 駱抗先.乙型肝炎基礎和臨床[M].北京:人民衛(wèi)生出版社.1999:158.
[2]金奇.主編.醫(yī)學分子病毒學[M].北京:科學出版社,2001:330.
[3]李興、狄鵬超,等,免疫檢驗乙肝病毒8項血清標志物16305例結果分析[J].陜西醫(yī)學雜志,1997.26(7):418.[4]程樹政,曾倚球,韋增良.血清中HBeAg檢測的意義[J].中華微生物和免疫學雜志,1992,12(5):304.
[5]王曉光,王衛(wèi)東.HBcAg、HBcAb同時陽性的探討[J].HELONGJIANGMEDICINE ANDPHARMACY,2000.23(2):65-66.
2095—9559(2016)04—2232—02
10.3969/j.issn.2095-9559.2016.04.031
2015-10-08