盛曉光，常紅葉，齊　力，譚　巖，方艷秋，王起來(lái)*

(1.吉林省人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)診治實(shí)驗(yàn)中心，吉林 長(zhǎng)春130021；2.吉林省臨床檢驗(yàn)中心，吉林 長(zhǎng)春130021)

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電化學(xué)發(fā)光免疫法和放射免疫法檢測(cè)血清甲狀腺激素的對(duì)比分析

盛曉光1，常紅葉2，齊力2，譚巖1，方艷秋1，王起來(lái)1*

(1.吉林省人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)診治實(shí)驗(yàn)中心，吉林 長(zhǎng)春130021；2.吉林省臨床檢驗(yàn)中心，吉林 長(zhǎng)春130021)

甲狀腺功能紊亂是內(nèi)分泌科常見(jiàn)疾病，甲狀腺激素水平檢測(cè)是臨床常用的檢測(cè)項(xiàng)目，RIA作為傳統(tǒng)的檢測(cè)手段[1]，將抗體用放射性碘元素標(biāo)記來(lái)檢測(cè)血清中甲狀腺素。但因其需手工加樣、操作過(guò)程繁瑣，且檢測(cè)過(guò)程中可能出現(xiàn)放射性污染、放射性元素的衰減影響檢測(cè)結(jié)果，精準(zhǔn)度相對(duì)降低[2]，在臨床檢驗(yàn)中的應(yīng)用受到一定限制。新一代標(biāo)記免疫檢測(cè)技術(shù)ECLIA，由電化學(xué)發(fā)光(ECL)和免疫測(cè)定法結(jié)合而成[3]，具有檢測(cè)迅速，靈敏度高等特點(diǎn)，近年來(lái)被廣為使用。促甲狀腺激素(TSH)由垂體前葉分泌，是一種糖蛋白類激素，促進(jìn)甲狀腺代謝，診斷甲狀腺疾病最靈敏的標(biāo)志物就是檢測(cè)血清TSH水平，同時(shí)也是甲狀腺功能檢測(cè)的首選指標(biāo)[4]。TSH分泌受血清中游離三碘甲狀腺原氨酸(FT3)、游離甲狀腺素(FT4)負(fù)反饋調(diào)節(jié)[5]。本文分別用放射免疫法及電化學(xué)發(fā)光免疫法對(duì)TSH、FT3、FT4進(jìn)行檢測(cè)，比較其結(jié)果。

1　材料與方法

1.1標(biāo)本來(lái)源選取我院2012年10月至2013年11月門(mén)診及住院患者共130例，其中正常對(duì)照組及甲狀腺功能亢進(jìn)組(甲亢組)各50例，甲狀腺功能減退組(甲減組)各30例。

1.2儀器與試劑電化學(xué)發(fā)光法采用瑞士羅氏Cobase411全自動(dòng)分析儀及原廠家配備的檢測(cè)試劑；放射免疫法采用上海日環(huán)儀器廠的SH-682 放射免疫計(jì)數(shù)器,試劑盒來(lái)源于北京北方生物技術(shù)研究所。

1.3測(cè)定方法采空腹靜脈血2管，每管3ml，所有操作嚴(yán)格按照試劑及儀器操作使用說(shuō)明書(shū)，檢測(cè)血清中TSH、FT3以及FT4水平，由經(jīng)驗(yàn)豐富的檢驗(yàn)員在2小時(shí)內(nèi)完成。

2　結(jié)果

無(wú)論是正常組、甲亢組還是甲減組，利用RIA及ECLIA檢測(cè)患者血清中甲狀腺激素水平，所得到的結(jié)果均相似，兩種方法所得到的結(jié)果差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)果見(jiàn)表1-3。

表1　正常組檢測(cè)比較情況

表2　甲亢組檢測(cè)比較情況

表3　甲減組檢測(cè)比較情況

3　討論

RIA始于20世紀(jì)60年代，其原理是將抗原/抗體用放射性物質(zhì)標(biāo)記，與待檢樣本結(jié)合，形成抗原抗體復(fù)合物來(lái)進(jìn)行測(cè)定。它分為競(jìng)爭(zhēng)性放射免疫法和免疫放射分析法(IRMA)兩種，前者也被稱為傳統(tǒng)的放射免疫測(cè)定方法，是對(duì)樣品中的抗原含量的測(cè)定，其基本原理是利用放射性物質(zhì)標(biāo)記的抗原，與待檢樣本中未標(biāo)記抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合特異性抗體。后者在前者的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)，是將足量抗體以放射性物質(zhì)標(biāo)記，直接結(jié)合待檢抗原，采用固相免疫吸附載體分離結(jié)合與游離標(biāo)記抗體的非競(jìng)爭(zhēng)放射免疫分析法。因?yàn)镽IA測(cè)定的靈敏性、特異性及測(cè)定的精確性較好，對(duì)抗原和半抗原均可檢測(cè)，儀器設(shè)備要求不高，被廣泛用于生物醫(yī)學(xué)測(cè)定，由于大部分檢測(cè)項(xiàng)目都有上述兩種放射免疫方法的試劑盒，故其仍是基層部門(mén)對(duì)超微量物質(zhì)檢測(cè)的主要技術(shù)。但其只能測(cè)定特定物質(zhì)、因放射性物質(zhì)有半衰期保存的時(shí)間較短、會(huì)造成環(huán)境污染和機(jī)體損傷等[6]，且不能形成自動(dòng)化，不能快速地檢測(cè)、出報(bào)告[7]。

ECLIA是目前標(biāo)記免疫檢測(cè)最前沿的技術(shù)手段，由電化學(xué)發(fā)光和免疫檢測(cè)兩個(gè)部分組成。標(biāo)記物的發(fā)光原理主要是由電化學(xué)產(chǎn)生的,在電極表面特異性化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，抗原和抗體的結(jié)合有很高的特異性，所以精確度準(zhǔn)、檢測(cè)結(jié)果重復(fù)性高，臨床檢驗(yàn)結(jié)果穩(wěn)定，ECLIA能有效的消除樣本底產(chǎn)生的干擾以及對(duì)位量的散射，從而能真正的提高這一方法靈敏度。另一個(gè)優(yōu)點(diǎn)ECLIA可以完全自動(dòng)化，不僅操作簡(jiǎn)便而且能有效的減少工作中存在系統(tǒng)誤差和隨機(jī)誤差。并且ECLIA試劑保存期長(zhǎng)，測(cè)定結(jié)果快而準(zhǔn)，且安全無(wú)毒，不會(huì)出現(xiàn)同位素輻射污染的問(wèn)題[8]。隨著技術(shù)的發(fā)展，ECLIA被廣泛應(yīng)用于多種激素的檢測(cè)，病毒檢測(cè)，腫瘤標(biāo)記物檢測(cè)，藥物濃度的鑒定等，但也存在著需要引進(jìn)特殊設(shè)備，試劑價(jià)格成本高等缺點(diǎn)。

本試驗(yàn)中兩種方法的檢測(cè)結(jié)果基本相同，都具有較高的準(zhǔn)確性和精密度，不同單位可以根據(jù)自身情況結(jié)合兩種檢測(cè)方法的優(yōu)缺點(diǎn)，酌情選擇不同的方法進(jìn)行檢測(cè)，作為體外標(biāo)記免疫分析的這兩種方法在今后的檢驗(yàn)領(lǐng)域發(fā)展中仍然會(huì)互補(bǔ)而存在。

[1]范旭.血標(biāo)本采集方法對(duì)放射免疫分析甲狀腺激素的影響[J].中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2010,7(30):68.

[2]趙云霞,李培鋼,王秀珠,等.放射免疫法和發(fā)光法測(cè)定甲狀腺微粒體蛋白抗體、甲狀腺球蛋白抗體及其相關(guān)性研究[J].中國(guó)實(shí)用內(nèi)科雜志,2010,26(6):150.

[3]方光輝.放射免疫分析與電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)血清HCG效果分析[J].中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生,2010,48(27):74.

[4]王自正.現(xiàn)代醫(yī)學(xué)標(biāo)記免疫學(xué)[M].北京:人民軍醫(yī)出版社,2000.145-146.

[5]李少林,王榮福.核醫(yī)學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2008.63-69.

[6]JohnPickup.ODLinsulinpumptherapyandcontinuousglucosemonitoring[J].OxfordMedicine,2011,13(78):1783.

[7]馮琴,楊駿,朱菩軍.電化學(xué)發(fā)光分析與酶聯(lián)免疫分析用于測(cè)定血清甲狀腺激素的評(píng)價(jià)[J].地方病通報(bào),2007,22(6):32.

[8]馬紅霞,周運(yùn)恒,楊藺,等.ELISA法和電化學(xué)發(fā)光免疫法檢測(cè)血清HBsAg結(jié)果比較分析[J].醫(yī)學(xué)檢驗(yàn),2010,25(6):473.

1007-4287(2016)08-1349-02

吉林省科技發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(20160622008JC)

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