石坤和 高瑛 顧淵

多基因聯(lián)合檢測對晚期胃癌個體化化療效果的研究

石坤和 高瑛 顧淵

目的 探討核苷酸切除修復交叉互補基因1（ERCC1）和β微管蛋白Ⅲ基因（TUBB3）聯(lián)合檢測對晚期胃癌個體化化療效果的影響。方法 收集2013年6月至2015年6月晚期胃癌患者50例，將其隨機分為觀察組和對照組，每組各25例。觀察組根據(jù)ERCC1、TUBB3基因mRNA表達水平檢測結(jié)果選擇不同的化療方案；對照組不進行基因檢測，采用DCF方案化療；21d為1個周期。兩組均化療≥4個周期。觀察比較兩組的化療效果及毒副反應。結(jié)果 觀察組有效率為68.00%，高于對照組的56.00%，但兩組差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。兩組均未出現(xiàn)與化療相關(guān)的死亡事件，化療的主要毒副反應為骨髓抑制、消化道反應、黏膜炎、肝腎功能損害、心臟毒性等方面。其中兩組的骨髓抑制、消化道反應、黏膜炎發(fā)生率差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。結(jié)論 ERCCl和TUBB3聯(lián)合檢測并基于其的化療方案對晚期胃癌患者具有安全性高、毒副反應少的優(yōu)點，可提高化療效果。

晚期胃癌 基因檢測 核苷酸切除修復交叉互補基因1 β微管蛋白Ⅲ基因

胃癌是世界范圍內(nèi)高發(fā)病率惡性腫瘤之一［1］，給人們的生命健康造成嚴重損害。大量臨床研究和基礎(chǔ)試驗表明［2，3］，特異性腫瘤分子標志物即相關(guān)基因mRNA表達水平是識別患者之間差異的重要依據(jù)，實現(xiàn)對這些靶標的檢測是實施腫瘤個體化治療的前提和基礎(chǔ)。本研究探討與晚期胃癌患者化療藥物密切相關(guān)的核苷酸切除修復交叉互補基因l（Excision Repair Cross Complementing gene-1，ERCCl）和β微管蛋白Ⅲ基因（β-Tubulin-Ⅲ，TUBB3）聯(lián)合檢測對晚期胃癌個體化化療效果的影響。報道如下。

1 臨床資料

1.1 一般資料 收集2013年6月至2015年6月本院收治的晚期胃癌患者50例，其中男28例，女22例；年齡42～80歲，平均年齡（59.73±12.64）歲。低分化癌23例、中分化癌16例、高分化癌11例。將50例患者隨機分為觀察組和對照組，每組各25例，兩組患者性別、年齡、病理分化等基本資料差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。所有患者均簽署知情同意書。

1.2 基因mRNA檢測 通過DNA液相芯片技術(shù)，對胃癌組織中ERCC1、TUBB3的mRNA表達水平進行檢測，并以所有檢測樣本上述基因mRNA表達量的中位數(shù)為界值，分為“高表達組”和“低表達組”。具體步驟：（1）可獲得病理活檢組織樣本。（2）裂解樣品釋放RNA。（3）捕獲目標RNA。（4）信號放大。（5）Luminex檢測獲得結(jié)果。

1.3 化療方案 （1）觀察組：根據(jù)ERCC1、TUBB3基因mRNA表達水平檢測結(jié)果，均為低表達者8例，選擇DCF方案（多西紫杉醇+順鉑+氟尿嘧啶）；僅ERCC1低表達者6例，選擇FOLFOX4方案（奧沙利鉑+氟尿嘧啶）；僅TUBB3低表達者5例，選擇TF方案（紫杉醇+氟尿嘧啶）；均為高表達者6例，選擇FOLFIRI方案（伊立替康+氟尿嘧啶）。藥物劑量：多西紫杉醇，60mg/m2，靜脈滴注ld；順鉑，60mg/m2，靜脈滴注1～4d；氟尿嘧啶600mg/m2（聯(lián)合用藥時）或750 mg/m2（單藥時），靜脈滴注1～5d；21d為1個周期。（2）對照組：不進行基因檢測，采用DCF方案化療，藥物劑量同觀察組，21d為1個周期。兩組均化療≥4個周期。

1.4 觀察指標及評價標準 （1）療效評價：按照RECIST實體瘤療效評價標準評估化療效果［4，5］。完全緩解（CR）：目標病灶均消失，且維持≥4周。部分緩解（PR）：基線狀態(tài)目標病灶總直徑比所有目標病灶直徑總和縮小≥30%，且維持≥4周。疾病進展（PD）：目標病灶增大或出現(xiàn)新病灶，且基線病灶最大徑之和增加≥20%。疾病穩(wěn)定（SD）：目標病灶有縮小，但基線病灶最大徑之和縮小未達PR，或目標病灶增大，但基線病灶最大徑之和增大未達PD。有效率（RR）= （CR+PR）例數(shù)/總例數(shù)×100%。（2）不良反應評價：根據(jù)美國國家癌癥研究所（NCI）常見毒性分級標準評價化療期間的毒副反應，觀察化療期間骨髓抑制程度、肝腎功能變化情況。

1.5 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件。計數(shù)資料以%表示，采用χ2檢驗；計量資料以（±s）表示，采用t檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組化療效果的比較 見表1。

表1 兩組化療效果的比較（n）

2.2 兩組毒副反應的比較 見表2。

表2 兩組毒副反應的比較［n（%）］

3 討論

胃癌易出現(xiàn)淋巴結(jié)及遠處轉(zhuǎn)移、腹腔種植等，有80%～90%胃癌患者最終進入晚期階段，在治療手段上主要行姑息性全身化療以延長晚期胃癌患者的生存時間，提高生存質(zhì)量［6］。由于胃癌異質(zhì)性大、病因復雜，目前晚期胃癌化療有效率低、中位生存時間短、化療副作用大，因此選擇適合不同患者的化療方案，即實現(xiàn)化療個體化至關(guān)重要［7，8］。

對晚期胃癌患者最基本的治療方式為化療。在2010年美國國家綜合癌癥網(wǎng)（National Comprehensive Cancer Network，NCCN）指南中已推薦（1類）DCF方案為晚期胃癌一線化療方案［9，10］。但是DCF方案較高的＞Ⅲ°毒副反應發(fā)生率、有限的生存獲益，以及患者對藥物敏感性的個體差異，限制了其臨床應用，因此，如何提高化療效果、減少無效化療及降低化療藥物毒性即個體化化療方案的實現(xiàn)是臨床亟需解決的難題［11］。

本研究根據(jù)化療藥物敏感性相關(guān)基因的研究，聯(lián)合檢測晚期胃癌患者ERCCl、TUBB3基因的表達水平，探討基因檢測對制訂個體化化療方案的指導意義。ERCCl是核酸外切修復家族中的重要成員，可使DNA損傷迅速修復，在DNA鏈間交聯(lián)損傷中發(fā)揮重要作用，ERCCl的表達量多少直接影響DNA修復過程。TUBB3高表達可使藥物對細胞內(nèi)微管蛋白的特異性降低，從而產(chǎn)生耐藥。多項臨床研究均顯示低TUBB3表達水平的腫瘤患者接受紫杉醇類化療的效果較好，中位生存期較長［12］。

本研究結(jié)果顯示，觀察組有效率為68.00%，高于對照組的56.00%，但兩組差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。兩組均未出現(xiàn)與化療相關(guān)的死亡事件，化療的主要毒副反應為骨髓抑制、消化道反應、黏膜炎、肝腎功能損害、心臟毒性等方面。其中兩組的骨髓抑制、消化道反應、神經(jīng)毒性黏膜炎發(fā)生率差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

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Objective To investigate the influnce of excision repair cross-complementing gene l（ERCCl）and β-Tubulin-Ⅲ（TUBB3）combined detection of individual chemotherapy for advanced gastric cancer. Methods 50 cases of patients with advanced gastric cancer in our hospital from June 2013 to June 2015 were selected，and were randomly divided into observation group and control group，25 cases in each group. Different chemotherapy regimens were chosen in observation group based on ERCC1，TUBB3 gene mRNA expression test Results. DCF regimen was given to control group without genetic testing. 21 days was a treatment course，both groups were at least four cycles of chemotherapy. The efficacy and toxicity of chemotherapy was compared between the two groups. Results The effective rate of observation group was 68.00%，higher than 56.00% of control group，but the difference was significant（P＞0.05）. There were no death associated with chemotherapy ouucred in the two groups，main side effects of chemotherapy were bone marrow suppression，gastrointestinal reactions，mucositis，liver and kidney dysfunction，cardiac toxicity. The incidence of bone marrow suppression，gastrointestinal reactions，mucositis between the two groups was significant（P＜0.05）. Conclusion ERCC1 and TUBB3 multiple genes combined detection of individual chemotherapy for advanced gastric cancer has the advantages of high security，less toxicity，and can enhance the effect of chemotherapy.

Advanced gastric cancer Genetic testing Excision repair cross-complementing gene 1（ERCC1） β-Tubulin-Ⅲ（TUBB3）

200071 上海中醫(yī)藥大學附屬市中醫(yī)醫(yī)院外科