龔永飛 光雪峰 戴海龍 尹小龍

臨床研究

先天性心臟病合并肺動(dòng)脈高壓患者血清血管緊張素-（1-7）水平變化與心臟重構(gòu)的研究

龔永飛 光雪峰 戴海龍 尹小龍

目的 觀察先天性心臟?。–HD）伴肺動(dòng)脈高壓（PAH）患者血清中血管緊張素-（1-7）［Ang-（1-7）］含量水平的變化，探討其與心臟重構(gòu)的關(guān)系。方法 收集先天性心臟病肺動(dòng)脈高壓患者90例，根據(jù)心臟彩超的臨床指標(biāo)，將其分為無心臟重構(gòu)組和心臟重構(gòu)組，其中無心臟重構(gòu)組69例，心臟重構(gòu)組21例。并收集正常對(duì)照組30例。應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測(cè)血清Ang-（1-7）酶含量，所得實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)使用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。結(jié)果 正常對(duì)照組（A組）、先天性無心臟重構(gòu)組（B組）、先天性心臟病心臟重構(gòu)組（C組）中Ang-（1-7）含量測(cè)定值分別為（17.39±1.33）pg/ml、（21.73±3.91）pg/ml和（12.52±1.85）pg/ml。無重構(gòu)組的Ang-（1-7）含量較正常對(duì)照組顯著升高；重構(gòu)組Ang-（1-7）含量較其他兩組水平顯著降低，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均<0.05）。結(jié)論 先天性心臟病心臟重構(gòu)患者比無重構(gòu)患者血清Ang-（1-7）含量顯著降低。

先天性心臟?。?肺動(dòng)脈高壓； 血管緊張素-（1-7）； 心臟重構(gòu)

血管緊張素-（1-7）［Angiotensin-（1-7），Ang-（1-7）］作為一種寡肽類激素，能引起血管收縮、血壓升高，促進(jìn)腎上腺皮質(zhì)釋放醛固酮[1,2]。越來越多的證據(jù)表明，Ang-（1-7）可能在腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)（RAAS）的調(diào)節(jié)和平衡中起到關(guān)鍵作用，特別對(duì)心血管的保護(hù)[3,4]。由于其潛在的靶向治療能力，這種具有生物活性的內(nèi)源性七肽化合物正越來越受到研究人員的關(guān)注。目前國內(nèi)外對(duì)于Ang-（1-7）的研究主要涉及癌癥、冠心病、心力衰竭、高血壓及原發(fā)性肺動(dòng)脈高壓患者血清中Ang-（1-7）水平的研究，但對(duì)先天性心臟病肺動(dòng)脈高壓患者血清Ang-（1-7）水平變化與心臟重構(gòu)研究較少。本研究對(duì)先天性心臟病合并肺動(dòng)脈高壓血清中Ang-（1-7）水平進(jìn)行檢測(cè)，探討Ang-（1-7）與先天性心臟病心臟重構(gòu)的關(guān)系。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 樣本收集自昆明醫(yī)科大學(xué)附屬延安醫(yī)院心血管內(nèi)科2013年8月1日至2013年10月24日收治并被確診為先天性心臟病的患者。根據(jù)2008年在美國加利福尼亞州的Dana point舉辦的第四屆肺動(dòng)脈高壓國際論壇會(huì)公布的肺動(dòng)脈高壓的診斷標(biāo)準(zhǔn)納入符合病例共90例，其中男性31例、女性59例，房間隔缺損（atrial septal defect，ASD）61例，室間隔缺損（ventricular septal defect，VSD）29例。根據(jù)心臟彩超的臨床指標(biāo)，將先心病肺動(dòng)脈高壓患者分為無心臟重構(gòu)組和心臟重構(gòu)組，其中無心臟重構(gòu)組69例（B組）、心臟重構(gòu)組21例（C組）。正常對(duì)照組（normal control group）30例（A組）。所有患者均簽署知情同意書。

1.2 方法 所有入選對(duì)象均于入院次日清晨空腹，在無菌操作下抽取肘正中靜脈血4 ml裝入普通干管內(nèi)，血樣放置60～90 min使其自然凝固，然后離心（3000 r/min）15 min，吸取上層血清2.5 ml分裝于3個(gè)EP管中，置入-80℃冰箱保存，待測(cè)。標(biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融。血清中Ang-（1-7）的水平按照 ELSIA試劑盒（購自 NeoBiolab公司，貨號(hào)HA0213）的操作說明進(jìn)行檢測(cè)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所有數(shù)據(jù)采用 SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析處理。統(tǒng)計(jì)指標(biāo)均進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)。計(jì)量資料用±s表示。兩組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，多組間均數(shù)比較采用方差分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般資料 入選三組間性別、年齡比較未見統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P均＞0.05），三組間血液生物化學(xué)檢測(cè)指標(biāo)ALT、AST、Cr比較均無差異（P均＞0.05）（表1），成人先天性心臟病以房間隔缺損多見，房間隔缺損與室間隔缺損的患者比例約為2∶1（表2）。

表1 三組間一般臨床檢測(cè)資料比較（±s）

表1 三組間一般臨床檢測(cè)資料比較（±s）

注：A組：正常對(duì)照組；B組：無心臟重構(gòu)組；C組：心臟重構(gòu)組。ALT：丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶；AST：天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶；Cr：肌酐。

組別 男/女 ALT（U/L） AST（U/L） Cr（μmol/L）A組 11/19 21.73±2.28 20.50±1.99 73.77±2.62 B組 24/45 21.86±2.06 20.04±1.09 68.54±1.63 C組 7/14 19.86±1.50 21.86±1.58 72.24±1.87

表2 試驗(yàn)組肺動(dòng)脈壓比較（±s）

表2 試驗(yàn)組肺動(dòng)脈壓比較（±s）

注：B組：無心臟重構(gòu)組；C組：心臟重構(gòu)組。與B組比較，aP＜0.001

組別 房缺（例） 室缺（例） 平均肺動(dòng)脈壓（mm Hg）B組 51 18 33.32±1.15 C組 10 11 80.57±4.85a

2.2 Ang-（1-7）含量檢測(cè)結(jié)果 正常對(duì)照組、先天性心臟病無心臟重構(gòu)組、先天性心臟病心臟重構(gòu)組Ang-（1-7）含量測(cè)定值分別為（17.39±1.33）pg/ml、（21.73±3.91）pg/ml和（12.52±1.85）pg/ml。先天性心臟病心臟重構(gòu)組的平均Ang-（1-7）含量較其他兩組均顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均<0.05）；而先天性心臟病無心臟重構(gòu)組的平均Ang-（1-7）含量比正常對(duì)照組高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P< 0.05）（圖1）。

圖1 三組間Ang-（1-7）含量的比較

3 討論

心臟重構(gòu)（cardiac remodeling）是心臟損傷或在血液動(dòng)力學(xué)的應(yīng)激反應(yīng)時(shí)由于分子和基因表達(dá)的變化，所引發(fā)的心肌組織結(jié)構(gòu)改變，其是慢性心力衰竭發(fā)生發(fā)展的基本機(jī)制[5]。目前的研究表明，心肌重構(gòu)與腎素-血管緊張素系統(tǒng)（Renin-Angiotensin System，RAS）關(guān)系緊密[6]。傳統(tǒng)觀念認(rèn)為在RAS系統(tǒng)中，兩種血管緊張素轉(zhuǎn)換酶（ACE和ACEⅡ）是RAS的樞紐，前者催化生成血管緊張素Ⅱ（AngⅡ）使血管收縮、心肌細(xì)胞增殖；而后者能夠降解AngⅡ產(chǎn)生Ang-（1-7）。與AngⅡ的效應(yīng)相反，Ang-（1-7）具有舒張血管、抗增生、抗炎癥的作用，能抑制和逆轉(zhuǎn)心肌重構(gòu)，對(duì)衰竭心臟有保護(hù)效應(yīng)。因此，檢測(cè)心室重構(gòu)過程中Ang-（1-7）的水平有助于了解RAS平衡動(dòng)態(tài)，為進(jìn)一步揭示其分子機(jī)制提供幫助。

本研究發(fā)現(xiàn)，先天性心臟病無心臟重構(gòu)患者的Ang-（1-7）含量較正常對(duì)照組顯著升高，而心臟重構(gòu)患者的Ang-（1-7）含量較對(duì)照組人群略有下降。這可能是因?yàn)锳ng-（1-7）本身可拮抗RAS中AngⅡ產(chǎn)生所帶來的副作用。這與已有研究結(jié)果相類似。例如，過表達(dá)Ang-（1-7）的慢病毒感染大鼠可抑制博來霉素誘導(dǎo)的肺纖維化和肺動(dòng)脈高壓[7]，Ang-（1-7）可抑制心肌重構(gòu)[8-10]。Loot等[11]發(fā)現(xiàn)，在小鼠心肌梗死后的2周，外源性灌注Ang-（1-7），可增加心臟冠狀動(dòng)脈血流量，促進(jìn)心臟收縮功能的恢復(fù)，減少心臟缺血再灌注過程中乳酸脫氫酶、肌酸磷酸激酶的釋放，縮小心肌梗死的范圍，顯示對(duì)心臟功能、冠脈血流量和大動(dòng)脈血管內(nèi)皮功能的保護(hù)作用。此外，研究還發(fā)現(xiàn)，Ang-（1-7）還可以通過ACE2/Ang（1-7）/Mas軸對(duì)心室重構(gòu)發(fā)揮巨大作用。如在心肌梗死的大鼠模型中，Ang-（1-7）能改善血管內(nèi)皮功能、保護(hù)血管內(nèi)皮、延緩心肌梗死后心力衰竭的發(fā)展[12]。利用腺病毒載體表達(dá)融合蛋白，釋放Ang-（1-7），可通過活化Mas受體抑制AngⅡ引起的心肌細(xì)胞肥大[13]。另一個(gè)研究也發(fā)現(xiàn)，Ang-（1-7）可通過激活Mas受體減少心肌細(xì)胞蛋白合成，同時(shí)抑制心肌細(xì)胞生長(zhǎng)，揭示了Ang-（1-7）的抗增殖作用[14]。本研究中，可能由于機(jī)體的應(yīng)激反應(yīng)，導(dǎo)致先天性心臟病無心臟重構(gòu)患者血清中的Ang-（1-7）含量維持一個(gè)高表達(dá)水平，進(jìn)而起到對(duì)心臟的保護(hù)作用。而在先天性心臟病心臟重構(gòu)患者中，RAS中ACEⅡ等酶的活性和含量的降低，導(dǎo)致最后AngⅡ降解生成Ang-（1-7）的含量也略有降低，這與已報(bào)道的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果相符。Cohen-Segev等[15]在心臟衰竭大鼠模型的離體腎臟和心臟組織中發(fā)現(xiàn)，ACE和ACEⅡ表達(dá)水平均較正常手術(shù)組顯著升高，而Ang-（1-7）表達(dá)水平則相應(yīng)降低。

綜上所述，Ang-（1-7）是RAS重要成員，是調(diào)節(jié)心肌細(xì)胞功能的重要因子。在先天性心臟病中，評(píng)估血清Ang-（1-7）的水平具有一定的臨床意義。Ang-（1-7）很可能成為先天性心臟病患者有效扭轉(zhuǎn)心臟重構(gòu)的新靶點(diǎn)，對(duì)提高患者生存期具有一定的臨床價(jià)值。盡管如此，Ang-（1-7）在心肌重構(gòu)過程中所涉及的分子機(jī)制和信號(hào)通路仍需要我們深入研究。

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The study of the levels of serum Angiotensin-（1-7）and cardiac remodeling in patients with pulmonary arterial hypertension due to congenital heart disease

GONG Yong-fei，GUANG Xue-feng，DAI Hai-long，et al.Department of Cardiology，Yan′an Affiliated Hospital of Kunming Medical University，Yunnan Cardiovascular Hospital，Kunming 650051，China

YIN Xiao-long，E-mail：yinxl001@gmail.com；DAI Hai-long，E-mail：dhlkm@qq.com

ObjectiveWe observed the Angiotensin-（1-7）［Ang-（1-7）］protein levels in the serum with congenital heart disease（CHD）combined with pulmonary arterial hypertension（PAH），and investigated the correlation of those and cardiac remodeling with pulmonary arterial hypertension.Methods90 patients with congenital heart disease and 30 normal control patients were collected.The patients with non-cardiac remodeling group are 69 cases，the patients with cardiac remodeling group are 21 cases.The serum level of Ang-（1-7）protein levels were detected by enzyme-linked immunosorbent assay（ELISA）.Statistical analysis was performed by using SPSS 19.0 software.ResultsThe Ang-（1-7）protein levels in plasma measured by enzyme-linked immunosorbent assay were（17.39±1.33）pg/ml，（21.73±3.91）pg/ml，（12.52±1.85）pg/ml in normal control group，congenital heart disease with non-cardiac remodeling group，congenital heart disease with cardiac remodeling group.The levels of Ang-（1-7）protein levels showed significantly difference among the three groups（P<0.05）.Conclusion Ang-（1-7）protein levels in the patients with congenital heart disease combined with cardiac remodeling have significantly decreased.

Congenital heart disease； Pulmonary arterial hypertension； Angiotensin-（1-7）； Cardiac remodel

國家自然科學(xué)基金（項(xiàng)目編號(hào)：81360037）；云南省自然科學(xué)基金（項(xiàng)目編號(hào)：2012FB009）

650051 云南省昆明市，昆明醫(yī)科大學(xué)附屬延安醫(yī)院（云南心血管病醫(yī)院）心內(nèi)科

尹小龍，E-mail：yinxl001@gmail.com；戴海龍，E-mail：dhlkm@qq.com

10.3969/j.issn.1672－5301.2016.01.004

R541.1

A

1672-5301（2016）01-0015-03

2015-08-05）