孔　山，忽勝和，楊新原，趙衛(wèi)東*

（1.大理大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院，云南大理　671000；2.大理大學(xué)附屬醫(yī)院，云南大理　671000）

98株肺炎鏈球菌的臨床分布及耐藥性分析

孔山1，忽勝和2，楊新原2，趙衛(wèi)東1*

（1.大理大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院，云南大理671000；2.大理大學(xué)附屬醫(yī)院，云南大理671000）

目的：分析大理大學(xué)附屬醫(yī)院肺炎鏈球菌的臨床分離情況及耐藥性，為臨床診斷和治療提供參考和依據(jù)。方法：收集2011年3月至2014年3月分離的98株肺炎鏈球菌，菌株鑒定和藥敏試驗采用法國生物梅里埃VITEK-2 Compact全自動微生物鑒定與藥敏分析儀，藥敏結(jié)果判讀采用美國臨床實驗室標準協(xié)會（CLSI）2012版，耐藥性分析采用WHONET5.6軟件。結(jié)果：98株肺炎鏈球菌中，分離自痰液77株、咽拭子15株、血液3株、腦脊液2株；科室來源以兒科、呼吸內(nèi)科、ICU、皮膚科為主，分別為34株、27株、16株和11株；年齡分布≤5歲兒童52株，≥60歲老年人34株。該菌對紅霉素、四環(huán)素和復(fù)方新諾明的耐藥率較高，分別為90.8%、81.6%和80.6%，對青霉素的耐藥率為26.5%，對頭孢噻肟、厄他培南、阿莫西林、美羅培南和頭孢曲松的耐藥率較低，均小于20%，未發(fā)現(xiàn)耐萬古霉素、莫西沙星和利奈唑胺菌株。結(jié)論：肺炎鏈球菌感染以呼吸系統(tǒng)感染為主，感染人群以兒童和老年人為主。臨床應(yīng)合理使用抗生素，防止耐藥菌的不斷增加。

肺炎鏈球菌；臨床分布；耐藥性

［DOI］10.3969/j.issn.2096-2266.2016.08.017

肺炎鏈球菌（Streptococcus pneumoniae）是社區(qū)獲得性肺炎的主要病原菌之一，易感人群主要是2歲以下嬰幼兒及65歲以上的老年人，據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計，肺炎鏈球菌性疾病每年在全球造成約160萬人死亡，其中5歲以下兒童約占死亡人數(shù)的63%。大多數(shù)菌株不致病或致病力很弱，僅部分菌株有致病力，主要引起大葉性肺炎，其次是支氣管炎，也可侵入機體其他部位，引起中耳炎、腦膜炎和敗血癥等疾病〔1〕。近年來，肺炎鏈球菌對臨床常用抗生素如β-內(nèi)酰胺類、大環(huán)內(nèi)酯類、磺胺類和氟喹諾酮類耐藥情況不容樂觀，甚至出現(xiàn)了同時對幾類抗生素耐藥的多重耐藥菌株，給臨床治療帶來許多困難。為了解本院肺炎鏈球菌的臨床分布和對主要抗生素的耐藥特點，對2011年3月至2014年3月我院臨床科室分離的肺炎鏈球菌進行分析。

1　材料

1.1菌株來源收集2011年3月至2014年3月大理大學(xué)附屬醫(yī)院臨床送檢的標本，包括痰液、咽拭子、血液和腦脊液等標本，共非重復(fù)分離到肺炎鏈球菌98株。

1.2儀器與試劑CO2培養(yǎng)箱（HEAL FORCE）、全自動血液培養(yǎng)儀（Bact/ALERT 3D）、全自動微生物鑒定與藥敏分析儀（VITEK-2 Compact）、哥倫比亞血瓊脂平板和肺炎鏈球菌藥敏AST-GP68卡（Bio-Merieux）。

2　方法

2.1分離培養(yǎng)將臨床送檢痰液、咽拭子、腦脊液等標本接種于哥倫比亞血瓊脂平板，置37℃含5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24～48 h，挑選菌落周圍有草綠色溶血環(huán)、邊緣隆起、中央凹陷、呈臍窩狀的可疑單個菌落，接種于哥倫比亞血平板進行菌落純化。

2.2初步鑒定對可疑菌落進行革蘭染色、鏡檢；挑選出革蘭染色呈陽性，菌體成雙排列，呈矛頭狀，無鞭毛、芽孢的菌落，做進一步的Optochin敏感試驗。

2.3上機鑒定及藥敏試驗挑選對Optochin敏感的菌株，用VITEK-2 Compact及配套肺炎鏈球菌AST-GP68卡進行菌株鑒定和藥敏試驗，質(zhì)控菌株為肺炎鏈球菌ATCC 49619，采用WHO提供的WHONET5.6軟件進行耐藥性分析。

2　結(jié)果

2.1標本來源與分布98株肺炎鏈球菌主要分離自≤5歲兒童和≥60歲老年人，其中兒童52株（53.1%），老年人34株（34.7%）；主要來自口痰、咽拭子、血液、腦脊液標本，其中分離自痰液77株（78.6%）、咽拭子15株（15.3%）、血液3株（3.1%）、腦脊液2株（2.0%）。見表1。科室來源以兒科、呼吸內(nèi)科、ICU、皮膚科為主，分別為34株（34.7%）、27株（27.6%）、16株（16.3%）、11株（11.2%）。見表2。

表1　肺炎鏈球菌的標本來源構(gòu)成比

表2　肺炎鏈球菌的科室分布構(gòu)成比

2.2肺炎鏈球菌的藥敏結(jié)果分析98株肺炎鏈球菌對15種抗生素的耐藥情況。見表3。

3　討論

肺炎鏈球菌是引起社區(qū)獲得性肺炎的主要病原菌之一，常引起兒童肺炎、中耳炎，嚴重者可引起腦膜炎、敗血癥等疾病。但其大部分菌株在正常人的口腔及鼻咽部經(jīng)常存在，一般不致病，只形成帶菌狀態(tài)，只有在免疫力下降時才致病，尤其在呼吸道病毒感染后或嬰幼兒，年老體弱者易發(fā)生肺部感染〔2〕。

肺炎鏈球菌感染最常發(fā)生在冬季和初春，這個時段也正是上呼吸道疾病的高發(fā)季。從本研究資料看，分離的標本主要來源于痰液（78.6%），其次是咽拭子（15.3%），人群也主要來源于≤5歲兒童和≥60歲的老人，這與兒童尤其是嬰幼兒的免疫系統(tǒng)尚未發(fā)育完全以及老年人免疫力相對低下、易受侵襲有關(guān)〔3〕。

表3　98株肺炎鏈球菌對常用抗生素的藥敏情況

青霉素作為肺炎鏈球菌感染的首選藥物，但耐藥株的流行已成為全球性問題，目前臨床上常用苯唑西林藥敏試驗來預(yù)測肺炎鏈球菌對青霉素的敏感性〔4〕。本研究其耐藥率為26.5%，應(yīng)給予持續(xù)監(jiān)測與關(guān)注。其他β-內(nèi)酰胺類抗生素，如頭孢菌素，已成為一線藥物，與萬古霉素聯(lián)合，來治療腦膜炎及社區(qū)感染的重癥肺炎。該菌雖對β-內(nèi)酰胺類耐藥率雖較低，均小于20%，但對其耐藥的肺炎鏈球菌也常表現(xiàn)對大環(huán)內(nèi)酯類、磺胺類等藥物多重耐藥〔5〕。氟喹諾酮類藥物在呼吸道感染的治療中應(yīng)用廣泛，但由于此類藥物的軟骨毒性，兒童感染者應(yīng)選頭孢菌素類抗生素為佳。萬古霉素、莫西沙星和利奈唑胺雖未見耐藥菌株，但由于劑量、入侵組織、價格等原因限制了其在臨床中的廣泛應(yīng)用〔6-7〕。

大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的廣泛應(yīng)用、耐藥菌株的克隆傳播被認為是肺炎鏈球菌對大環(huán)內(nèi)酯類抗生素耐藥的重要原因，耐藥機制主要是通過erm介導(dǎo)的核糖體甲基化和由mef介導(dǎo)的外排泵系統(tǒng)〔8〕。本院肺炎鏈球菌對紅霉素耐藥率高達90.8%，且大多數(shù)大環(huán)內(nèi)酯類抗生素具有相似或相近的化學(xué)結(jié)構(gòu)，肺炎鏈球菌在產(chǎn)生對紅霉素耐藥的同時，也會對阿奇霉素、克拉霉素等新型大環(huán)內(nèi)酯類產(chǎn)生交叉耐藥，該類藥物已不適用于作為治療肺炎鏈球菌感染的常用藥物〔9〕。

在某些國家和地區(qū)，易發(fā)肺炎鏈球菌感染的高危人群（包括小兒，尤其是患有鐮狀細胞病的兒童或先天性無脾臟或脾切除而缺乏脾臟功能的患者最易感染）用多價肺炎鏈球菌多糖疫苗預(yù)防〔10〕。我國使用的肺炎鏈球菌疫苗為美國默沙東公司研制生產(chǎn)的“多價肺炎鏈球菌疫苗”（紐莫法23），該疫苗是將肺炎球菌滅活，提取其莢膜多糖制成的，接種后誘發(fā)產(chǎn)生抗體，可以有效的預(yù)防肺炎鏈球菌肺炎和敗血癥。

綜上所述，考慮到肺炎鏈球菌所致疾病的臨床重要性，準確掌握肺炎鏈球菌的耐藥現(xiàn)象是至關(guān)重要的。臨床醫(yī)師必須合理、審慎使用抗生素以減少選擇性壓力，從而控制肺炎鏈球菌耐藥株的播散。結(jié)合藥敏試驗結(jié)果和藥效學(xué)及藥動學(xué)資料，根據(jù)當?shù)乇O(jiān)測數(shù)據(jù)來制定合適的用藥方案，將有助于控制肺炎鏈球菌耐藥的發(fā)展。

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〔Abstract〕Objective:To investigate the clinical distribution and antibiotic resistance of Streptococcus pneumoniae in the Affiliated Hospital of Dali University in order to provide reference for clinical diagnosis and treatment.Methods:A total of 98 S.pneumoniae were obtained from March 2011 to March 2014.The identification and drug sensitive test of all strains were measured by VITEK-2 Compact analyzer.Drug sensitivity results were interpreted by using the American Clinical and Laboratory Standards Institute（CLSI）2012 Edition.The resistance results were analyzed via WHONET 5.6 software.Results:Among 98 strains of S.pneumoniae，77 strains were isolated from sputum，15 from pharynx swab，3 from blood and 2 from cerebrospinal fluid.Those strains were mainly from Paediatrics，Respiratory Medicine，ICU，and Dermatology，respectively 34，27，16，and 11.52 of the strains were from children of 5 and under，and 34 were from the elderly people of 60 or over.The assay showed that the resistance rates of S.Pneumoniae to erythromycin，tetracycline and SMZ-TMZ were relatively high，reaching 90.8%，81.6%and 80.6%respectively.The resistance rateto penicillin was 26.5%.The resistance rates to cefotaxime，ertapenem，amoxicillin，meropenem and ceftriaxone were less than 20%.No vancomycin and moxifloxacin and linezolidresistant strain was found.Conclusion：S.pneumoniae infection were mainly caused by respiratory infection. S.pneumoniae infection was the commonest in children and the elderly.We should use antibiotics rationally so as to prevent the increase of drug-resistant bacteria.

〔Key words〕Streptococcus pneumoniae；clinical distribution；antibiotic resistance

（責(zé)任編輯董杰）

Analysis of the Clinical Distribution and Antibiotic Resistance of 98 Strains of Streptococcus Pneumoniae

Kong Shan1，Hu Shenghe2，Yang Xinyuan2，Zhao Weidong1*
（1.Clinical College，Dali University，Dali，Yunnan 671000，China；2.Dali Affiliated Hospital of Dali University，Dali，Yunnan 671000，China）

R446.5

B

2096-2266（2016）08-0062-03

云南省科技廳應(yīng)用基礎(chǔ)研究基金資助項目（2013FD095）

2015-07-15

2015-10-30

孔山，講師，主要從事臨床病原微生物研究.

趙衛(wèi)東，博士研究生.