李學東，陳家康，覃　軍，麥用軍，肖振勇

(柳州市工人醫(yī)院，廣西 柳州　545000)

?

丙泊酚干預對大鼠視神經(jīng)損傷的影響及機制研究

李學東，陳家康*，覃軍，麥用軍，肖振勇

(柳州市工人醫(yī)院，廣西 柳州545000)

目的探討大鼠視神經(jīng)損傷后丙泊酚干預對損傷視神經(jīng)及視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)的影響及機制。方法SD大鼠 67只，隨機取20只為正常組，不予任何處理。余行視神經(jīng)鉗夾法造模，造模成功42只納入實驗。隨機分為：模型對照組和丙泊酚組，各21只/組。造模后4 d, 以TUNEL法檢測大鼠視網(wǎng)膜和視神經(jīng)細胞凋亡，造模后7 d， RT-PCR、Western-blot檢測視網(wǎng)膜和視神經(jīng)節(jié)細胞組織 Caspase-3、BCL-2基因和蛋白表達。造模后14 d，行閃光視覺誘發(fā)電位檢測，處死大鼠取眼球，觀察各組大鼠視網(wǎng)膜和視神經(jīng)的病理形態(tài)，行視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞計數(shù)。結果 造模后4 d，丙泊酚組視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞凋亡數(shù)量明顯低于模型對照組(P< 0.05)，造模后7 d與模型對照組相比，丙泊酚組 Caspase-3的表達顯著降低(P< 0.05)；BCL-2的表達顯著升高(P< 0.05)。造模后14 d，熒光金陽性RGC數(shù)：模型對照組最少，丙泊酚組較多，正常組最多，且各組之間差異有統(tǒng)計學意義(P< 0.05)。丙泊酚組大鼠閃光視覺誘發(fā)電位伏期較模型對照組大鼠短(P< 0.05)、波幅明顯高于模型對照組(P< 0.05)。結論丙泊酚干預通過減少大鼠視神經(jīng)鉗夾后RGCs的凋亡，降低視網(wǎng)膜Caspase-3的表達，升高BCL-2的表達，對視神經(jīng)損傷起到保護作用。

大鼠；視神經(jīng)損傷；丙泊酚； 視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞；Caspase-3；BCL-2

視神經(jīng)損傷發(fā)病率逐年增高，可能是交通事故發(fā)生率上升所致。視神經(jīng)損傷導致的患者不可逆的視力喪失明顯增多，給患者的生活帶來極大的痛苦和不便[1-2]。屬于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的視神經(jīng)及神經(jīng)節(jié)細胞損傷后具有修復和再生困難的特點。視神經(jīng)損傷早期采取有效手段進行干預，以挽救損傷的視神經(jīng)和神經(jīng)節(jié)細胞意義重大。近年來，丙泊酚在中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷的康復治療過程中的應用也越來越受到臨床及科研工作者的重視[3-4]。研究表明丙泊酚對腦缺血再灌注損傷有較強的保護作用，對多種細胞的凋亡均有一定的的抑制作用。它能突顯大鼠腦缺血再灌注時TNF的抑制作用。同時丙泊酚具還具有作用時間短、蘇醒完全而迅速、起效快、持續(xù)輸注后無蓄積等優(yōu)點。目前已有研究表明丙泊酚對損傷的視神經(jīng)及視網(wǎng)膜亦有一定的保護作用[5-6]，然而丙泊酚治療是怎樣改善視神經(jīng)損傷區(qū)及視網(wǎng)膜的微環(huán)境，進而起到保護視神經(jīng)的作用的，具體保護效果如何，仍需進一步探討。

1　材料和方法

1.1實驗動物

清潔級SD 雌性大鼠67 只， 1月齡，體重(250～270)g購于廣西醫(yī)科大學實驗動物中心[SCXK(桂)20090006]；動物飼養(yǎng)于柳州市工人醫(yī)院標準動物飼養(yǎng)室[SYXK(桂)20100014]。所有大鼠均在 12 h明光 ( 7 : 00～19 : 00) /12 h暗光、 溫度為22℃～25℃ 的環(huán)境下飼養(yǎng)。按實驗動物使用的“3R”原則給以人道主義關懷。

1.2主要試劑與儀器

GAPDH、 Caspase-3、BCL-2兔抗大鼠多克隆抗體(美國Sigma公司)；耐熱性TaqDNA 聚合酶、RT-PCR試劑盒(TaKaRa公司)；M-MLV逆轉錄酶(美同Promega 公司產(chǎn)品)；100 bPDNA ladder (華美生物工程公司)；熒光金(美國 Biotium 公司)；TUNEL凋亡試劑盒(德國Roche公司)；丙泊酚(20 mL：200 mg樂山裕恒藥業(yè)有限公司)；BCL-2和 Caspase-3物根據(jù)Genebank資料，利用Primer 5.0引物設計軟件確定最優(yōu)引物，然后經(jīng)Blast匹對，由上海生工生物有限公司合成；眼科手術顯微鏡(上海軼德醫(yī)療設備有限公司)；立體定位儀 (日本成茂)；眼科視覺電生理儀 (德國 Roland 公司)；血管夾(創(chuàng)生醫(yī)療器械有限公司)；光學顯微鏡(奧林巴斯公司)。

1.3實驗方法

1.3.1視神經(jīng)損傷大鼠造模及丙泊酚干預

依據(jù)參考文獻采用目前國內(nèi)外最常用的視神經(jīng)夾挫傷模型造模[7]，67只大鼠眼部經(jīng)裂隙燈和檢眼鏡檢查屈光間質(zhì)清晰,眼底無病變。隨機取20只大鼠為正常組，不予任何處理。余47只進行視神經(jīng)鉗夾法造模(右眼)，過程如下：10%的水合氯醛腹腔注射麻醉后(0.3 mL/kg)，乙醇消毒右眼上瞼后，垂直于瞼緣方向剪開。于上方鞏膜緣處將大鼠球結膜剪開，鈍性分離。眼球向下方牽拉后，鈍性分離肌錐，避免血管損傷，逐漸暴露出視神經(jīng)。于球后2.5 mm 處動脈瘤夾持視神經(jīng)6 s。觀察術眼瞳孔散大且無視網(wǎng)膜出血，逐層縫合后于結膜囊內(nèi)及上眼瞼涂紅霉素眼膏。大鼠清醒后，觀察術眼出現(xiàn)瞳孔散大，眼底無視網(wǎng)膜出血，且大鼠無眼球突出及眼瞼閉合不全，表明造模成功，納入實驗。5只大鼠造模失敗，予以剔除，余42只納入實驗。將其隨機分為：模型對照組21 只，丙泊酚組21 只。模型對照組大鼠無治療，常規(guī)飼養(yǎng)，丙泊酚組大鼠造模后4 h予以丙泊酚治療，通過尾靜脈留置針泵注丙泊酚注射液(2 mL/kg/h) 持續(xù)4 h，連續(xù)治療2 d。

1.3.2凋亡細胞檢測

造模后第4天各組大鼠分別隨機取5只, 按前述方法麻醉滿意后剖胸，行左心室主動脈插管， 以4%的多聚甲醛灌流進行固定。摘取眼球作石蠟切片，TUNEL法檢測計數(shù),按德國Roche公司試劑盒購操作。待水化、37℃條件下蛋白酶K消化10 min，行標記液標記后， 37℃下，經(jīng)生物素化的地高辛反應30 min，加SABC，DAB顯色。封片，損傷區(qū)周圍隨機選取不重復的6個高倍視野，對胞核含棕黃色顆粒的細胞計數(shù)。

1.3.3RT-PCR檢測

造模后第7天各組大鼠分別隨機取5只, 迅速取出右眼眼球，分離出視網(wǎng)膜，以Trizol說明書法提取視網(wǎng)膜的總RNA，總RNA含量測定采用紫外分光光度計法，用RT～PCR兩步法試劑盒(TaKaRa公司)將mRNA逆轉錄成cDNA，接著再將cDNA行PCR擴增。用以下引物見表1，取擴增產(chǎn)物行電泳，電泳結果通過凝膠圖像分析系統(tǒng)進行光密度分析，計算BCL-2， Caspase-3與GAPDH的光密度積分的比值，作為BCL-2，Caspase-3 mRNA表達的指標。

表1　引物序列

1.3.4Western-blot檢測

RT-PCR提取后的剩余物經(jīng)1500 r/min，離心30 min后，取上清為粗體蛋白， Bradford法測定總的蛋白濃度。5%濃縮膠40 V衡壓1 h，10%分離膠60 V恒壓3.5 h，濕轉14 V恒壓14 h，37℃搖床封閉2 h，洗膜10 min，3次，兔抗鼠抗體Caspase-3或BCL-2(1∶800)4℃ 過夜；抗鼠GAPDH(1∶1000)4℃過夜。TBST洗膜5 min×4次，山羊抗兔抗體1∶700，37℃搖床孵育1.5 h，TBST洗膜5 min×4次。再次運用TBS洗膜10 min后DAB顯色，按Quantity one圖像進行分析研究，Caspase-3、BCL-2與GAPDH的灰度積分的比值進行分析，作為Caspase-3、BCL-2蛋白表達的量。

1.3.5逆行熒光金標記

造模后第9天各組大鼠分別隨機取5只， 按前述方法麻醉滿意后，立體定位儀固定(日本成茂)大鼠的頭部,正中縱行切開頭皮，分離皮下組織，暴露顱骨， 以前顱為標志用手持式電動骨鉆在顱骨表面相應位置(前顱后方6.0 mm，旁開1.4 mm，深度4.0 mm)鉆開顱骨并暴露硬腦膜，于每點各注射3%的熒光金3 μL。造模后14天，以頸椎脫臼法處死每組經(jīng)熒光金標記的大鼠，迅速取出右眼眼球，將眼球于4%多聚甲醛磷酸中固定2 h，生理鹽水沖洗，將其眼前節(jié)和玻璃體去除，將眼杯剪開放射狀切口4個，使其視網(wǎng)膜剝離，將分離后的視網(wǎng)膜于載玻片上平鋪，玻璃體面朝上。在空氣中自然干燥后，待視網(wǎng)膜加蓋玻片并滴熒光增強劑進行封片。使用熒光顯微鏡與距離視乳頭中心2 mm 處，分別上下左右各拍攝一張照片，并代表4個象限的RGC情況。本研究經(jīng)盲態(tài)人工RGC進行計數(shù)測量。

1.3.6閃光視覺誘發(fā)電位檢查

參照ISCEV標準[8]，并且使用Roland視覺電生理檢查儀(德國)，各組隨機取5只大鼠于夾傷后第14天進行F-VEP 檢查。10%的水合氯醛腹腔注射麻醉后(0.3 mL/kg)，大鼠皮膚備皮后，安爾碘消毒，將電極銀針刺入皮下，兩耳尖連線中點處為記錄電極，右眼同側頰部處為參考電極，置右側耳郭為地電極， 阻抗標準5 Ω以下，經(jīng)適應15 min后，左眼完全被不透光黑眼罩遮蓋，通過電生理儀，LED 眼罩閃爍刺激，光強：3.93 cd/m2，頻率：1.9 Hz，通頻帶寬：1～100 Hz，分析時間：250 ms，疊加：100次，連續(xù)測量5次。取均值為閃光視覺誘發(fā)電位 P1的波幅及潛伏期。

1.3.7視網(wǎng)膜病理組織學觀察

以上檢測均完成后，剩余大鼠以頸椎脫臼法處死，摘出整個眼球及5 mm長的視神經(jīng)，向眼球中注射少量固定液后于FAA固定液中固定48 h，經(jīng)梯度乙醇脫水后，剪開眼球前段去掉晶狀體后，二甲苯透明處理，石蠟行定向包埋，行視網(wǎng)膜冠狀面連續(xù)4 μm切片，常規(guī)HE染色，光鏡觀察。

1.4統(tǒng)計方法

2　結果

2.1TUNEL檢測細胞凋亡

凋亡神經(jīng)細胞的細胞核內(nèi)可見特異性棕黃色顆粒，光鏡下可見正常組視網(wǎng)膜均未見棕黃色顆粒著染的RGCs(圖1A)；模型對照組可見較多棕黃色顆粒著染的RGCs(白箭所指)((圖1B )；丙泊酚組可見少量的棕黃色顆粒著染的RGCs，其數(shù)量較模型對照組少(圖1C)。具體見表2，經(jīng)兩兩比較后，差異顯著(P< 0.01)。

2.2Caspase-3、BCL-2 基因表達

結果 (圖2，表3 )顯示視神經(jīng)造模損傷后第7天，丙泊酚組大鼠視網(wǎng)膜的Caspase-3基因表達較正常組高，BCL-2 基因表達較正常組低，差異有顯著性意義(P< 0.05)；視網(wǎng)膜Caspase-3基因的表達丙泊酚組與模型對照組相比明顯降低，BCL-2基因的表達明顯升高，差異有顯著性意義(P< 0.05)。2.3Caspase-3、BCL-2 Protein 表達

結果 (圖3、表3) 顯示視神經(jīng)造模損傷后第7天，丙泊酚組大鼠視網(wǎng)膜的Caspase-3 蛋白因表達較正常組高，BCL-2 蛋白表達較正常組低，差異有顯著性意義(P< 0.05)；視網(wǎng)膜Caspase-3蛋白的表達丙泊酚組與模型對照組相比明顯降低，BCL-2蛋白的表達明顯升高，差異有顯著性意義(P< 0.05)。

2.4大鼠FG陽性RGCs計數(shù)

三組大鼠的平均FG陽性RGCs數(shù)有顯著差異(P<0.05)。正常對照組FG陽性RGCs數(shù)均較丙泊酚組和模型對照組多(P<0.05)，丙泊酚組FG陽性的RGCs數(shù)較模型對照組多(P<0.05)。模型對照組視網(wǎng)膜組織FG陽性RGCs計數(shù)(圖4A，紅箭所指)；丙泊酚組視網(wǎng)膜組織FG陽性RGCs計數(shù)(圖4B，紅箭所指)；正常組視網(wǎng)膜組織FG陽性RGCs計數(shù)(圖4C，紅箭所指)，具體見表2，各組間比較均有統(tǒng)計學意義(P< 0.05)。

表2　各組大鼠TUNEL細胞凋亡及FG陽性RGCs計數(shù)

注：與模型對照組相比，*P< 0.05；與正常組相比#P< 0.05。

Note.Compared with the model control group,*P< 0.05 compared with the normal group#P< 0.05.

注：(1A)正常組；(1 B)模型對照組；(1 C)丙泊酚組。圖1　TUNEL檢測各組細胞凋亡(×20)Note.(1A)Normal group;(1B)Model control group;(1C)Propofol group.Fig.1　TUNEL staining of each group

組別(Group)Caspase-3BCL-2mRNACaspase-3、BCL-2ProteinCaspase-3BCL-2Caspase-3BCL-2模型對照組(Modelcontrolgroup)2.34±0.460.21±0.04#3.46±0.34#0.36±0.10#丙泊酚組(Propofolgroup)1.26±0.27*0.57±0.12*2.38±0.26*0.83±0.19*正常組(Normalgroup)0.65±0.110.94±0.130.96±0.081.38±0.24

注：與模型對照組相比，*P< 0.05；與正常組相比#P< 0.05。

Note.Compared with the model control group,*P<0.05 compared with the normal group#P< 0.05.

圖2　各組大鼠 Caspase-3、BCL-2 m RNA的表達Fig.2　The rats Caspase-3, BCL-2 m RNA of expression

圖3　各組大鼠 Caspase-3、BCL-2 蛋白的表達Fig.3　The rats Caspase-3, BCL-2 Protein of expression

2.5各組大鼠F-VEP 檢查結果

在造模后14 d，3組各隨機取大鼠5只，進行F-VEP檢查，結果表明丙泊酚組大鼠P1波的波幅與模型對照組相比增大，其潛伏期較模型對照組明顯縮短。丙泊酚組與模型對照組相比差異顯著(P< 0.05)。即模型對照組大鼠的視覺誘發(fā)電位由視網(wǎng)膜傳導枕部腦組織的時間較丙泊酚組長，表明了丙泊酚組的傳導通路較模型對照組暢通，視神經(jīng)損傷恢復較好(見表4)。

2.6視網(wǎng)膜HE染色觀察

正常組(5A)大鼠視網(wǎng)膜HE 染色可見3層結構，由圖片下方向上依次是感光細胞層、雙極細胞層及RGC 層，多層排列的是感光細胞層和雙極細胞層，RGC層的細胞則呈單層排列。造模后14 d，模型對照組(5C)的視網(wǎng)膜結構破壞嚴重，視網(wǎng)膜的厚度明顯變薄，感光細胞的數(shù)量顯著下降，細胞的內(nèi)外節(jié)幾乎消失，胞核大而淺染，而RGC層細胞的胞核亦明顯稀疏。丙泊酚組(5B)RGC 胞體與正常組大小無明顯區(qū)別，但數(shù)目略少，感光細胞的內(nèi)外節(jié)存在，外核層細胞有輕度的水腫與空泡變性，其排列稍紊亂(圖5)。

注：(4A)模型對照組；(4B)丙泊酚組；(4C)正常組。圖4　各組大鼠FG陽性RGCs計數(shù)比較(×20)Note.(4A)Model control group;(4 B)Propofol group;(4C)Normal group.Fig.4　The rats FG-positive RGCs count comparator

注：(5A)正常組；(5B)丙泊酚組；(5C)模型對照組。圖5　各組大鼠造模后14 d視網(wǎng)膜組織(×20)Note.(5A)Normal group;(5 B)Propofol group;(5C)Model control group.Fig.5　Rats 14 d after modeling Retinal tissue

組別(Group)潛伏期(ms)波幅(μV)模型對照組(Modelcontrolgroup)115.34±6.82#3.04±0.48#丙泊酚組(Propofolgroup)76.48±5.46*8.75±1.12*正常組(Normalgroup)64.26±2.5314.30±2.36

注：與模型對照組相比，*P< 0.05；與正常組相比#P< 0.05。

Note.Compared with the model control group,*P< 0.05 compared with the normal group，#P< 0.05.

3　討論

為了研究丙泊酚對大鼠視神經(jīng)損傷的影響及相關機制，本文采用了國內(nèi)外最常用的視神經(jīng)夾挫傷模型，據(jù)目前研究表明該視神經(jīng)夾挫傷模型較為精確，其具有可直視視神經(jīng)的損傷部位，可控性較強．損傷的性質(zhì)具體化且定量等優(yōu)點，為相關丙泊酚干預大鼠視神經(jīng)損傷的相關研究提供了可靠的動物實驗模型，能充分的模擬并體現(xiàn)出臨床丙泊酚干預對于視神經(jīng)損傷作用的病理生理過程[8-10]。因為在臨床上各種原因所致的視神經(jīng)損傷中，以外力及周圍組織水腫壓迫引起者較為常見，以間接損傷為主，多為視神經(jīng)被急性擠壓傷所致，根據(jù)以上情況，沽通常采用擠壓、鉗夾視神經(jīng)等方法建立視神經(jīng)損傷的動物模型[10-11]。

視神經(jīng)損傷后導致繼發(fā)性的視網(wǎng)膜細胞的缺血、缺氧, 通過是視網(wǎng)膜細胞的 Caspase-3表達升高，BCL-2的表達降低導致了視神經(jīng)及視網(wǎng)膜節(jié)細胞的繼發(fā)性凋亡。相關實驗研究表明，神經(jīng)系統(tǒng)損傷后予以丙泊酚干預能夠使是損傷后的 Caspase-3表達受到抑制，促進損傷后BCL-2的表達，從而起到了抑制神經(jīng)細胞凋亡的作用[12-14]，本研究同樣表明了丙泊酚通過降低視網(wǎng)膜 Caspase-3基因和蛋白的表達，促進BCL-2基因基因和蛋白的表達，對視神經(jīng)損傷起到保護作用，減少了視網(wǎng)膜節(jié)細胞的凋亡。造模后4 d丙泊酚組細胞凋亡數(shù)均明顯較模型對照組少(P< 0.05)，丙泊酚組大鼠閃光視覺誘發(fā)電位伏期較模型對照組大鼠短(P< 0.05)、波幅明顯高于模型對照組(P< 0.05)。表明了視神經(jīng)細胞凋亡減少的同時視覺功能得到了一定程度的恢復。同時丙泊酚已被證明具有抗氧化活性，它可能還可以通過以下途徑起到視神經(jīng)保護作用：降低代謝率、減少神經(jīng)組織耗氧；抑制線粒體通透性轉換孔，抗脂質(zhì)過氧化反應；激活細胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶轉導的通路；抑制細胞鈣超載及炎性細胞因子表達等。以上機制的研究有待將來相關實驗進一步驗證。

總之本研究對丙泊酚干預治療大鼠視神經(jīng)損傷就細胞凋亡及 Caspase-3、BCL-2等指標的的表達變化進行了研究，初步進行了有益的探討，取得了一定的實驗成果，具體更深入及詳盡的研究有待進一步探討。

[1]郭建，付研，丁寧，等.機動車事故致間接性視神經(jīng)損傷的臨床研究[J].中華急診醫(yī)學雜志,2014,23(1):84-88.

[2]尹丹萍，柳林.視神經(jīng)損傷后修復與再生的研究進展[J].國際眼科雜志,2013,13(6):1152-1156.

[3]陳君，王國林.丙泊酚預處理或后處理對缺氧鼠腦神經(jīng)元保護效應的研究[J].中國麻醉與鎮(zhèn)痛,2004,6(2):109-112.

[4]李慶凱.急性重型顱腦損傷術中丙泊酚靜脈麻醉的腦保護作用分析[J].中國實用神經(jīng)疾病雜志,2014,2(14):62-63.

[5]孫海燕，路紅，趙平,等.丙泊酚對急性高眼壓大鼠視神經(jīng)保護作用研究[J].中國實用眼科雜志,2014,32(03):379-382.

[6]楊明，朱彧.丙泊酚對體外培養(yǎng)小鼠視網(wǎng)膜細胞抗氧化應激的作用[J].臨床麻醉學雜志,2013,29(12):1222-1225.

[7]劉曉坤，羅鋼，趙平.重組人促紅細胞生成素對大鼠視神經(jīng)挫傷后GAP-43mRNA影響[J].中國實用眼科雜志, 2014, 32(06):789-792.

[8]Yoles E，Muller S，Schwartz M.NMDA-recePtor antagonist Protects neurons from secondary degeneration after Partial oPtic nerve crush[J]. J Neurotrauma,1997,14(9):665-675.

[9]劉德林，吳小影，羅瑜琳，等.不同劑量左旋多巴對形覺剝奪性弱視鼠閃光視覺誘發(fā)電位的影響[J]. 眼視光學雜志,2009,11(04):246-253.

[10]劉曉坤，楊伊帆，卞曉蕓，等.大鼠視神經(jīng)損傷后一氧化氮合酶的變化及?；撬岬挠绊慬J].中華眼外傷職業(yè)眼病雜志,2013(11):801-804.

[11]朱夏茹，陳曉明.大鼠外傷性視神經(jīng)損傷模型建立的研究進展[J].國際眼科雜志,2014,14(12):2182-2184.

[12]Vucetic M,lensen PK,Jansen EC,etal.Diameter variatiOIlS ofretinal blood vessels during and after treatment with ProPofol[J]. Br J OPhthalmol,2004,88(6):771-775.

[13]張蔚，于金國，王興，等.周圍神經(jīng)損傷神經(jīng)脊細胞 Caspase-3的表達與病理變化[J].中華眼科雜志,2010,46(12):1084-1089.

[14]章靜，吳香麗，劉麗霞，等.銀杏葉提取物對大鼠視神經(jīng)損傷后Bcl-2和Bax表達的影響[J].河北醫(yī)科大學學報,2014,35(03):336-338.

NeuroProtective mechanisms of ProPofol to retinal ganglion cells in a Partial oPtic nerve crush rat model

LI Xue-Dong,CHEN Jia-Kang*, QIN Jun,MAI Yong-Jun,XIAO Zhen-Yong

(Liuzhou Worker’s Hospital, Liuzhou 545000, China)

ObjectiveTo investigate the Protective effect of propofol on the retinal ganglion cells of the rat optic nerve crush model. Methods 67 SD rats. Randomly selected 20 rats, don’t do any processing for the normal group. With more than 47 rats optic clamps for optic nerve contusion model, legal system building 5 failure, success of 42 rats were randomly divided into the optic nerve damage and propofol group, 21 / group. Will not be any treatment after optic nerve injury group building, 4 hours after propofol group for propofol therapy. After 4 days of successful modeling, the apoptosis of retinal ganglion cells were detected by TUNEL staining. After 7 days of successful modeling, the expression of Caspase-3, BCL-2 in retina and optic nerve cells of rats were detected by RT-PCR and Western-blot.After 14 days of successful modeling, The amplitude and latent period of P1 wave of flash visual evoked potential were detected.The animals were sacrificed and the optic nerve was taken to observe the pathological morphology of retina and optic nerve in rats, and the retinal ganglion cells (RGC) were counted. ResultsAfter 4 days of successful modeling,the apoptosis of the propofol group was significantly lower than that of the optic nerve injury group (P< 0.05).After 7 days of successful modeling,the expression of Caspase-3 in the propofol group was significantly lower than that in the propofol group (P< 0.05), the expression of BCL-2 in the propofol group was significantly higher than that in the propofol group (P< 0.05).After 14 days of successful modeling, FG Positive RGC numbers: normal group>propofol group> optic nerve injury group and between groups difference was statistically significant (P< 0.05). The flash visual evoked potential of the rats in propofol group was significantly shorter than that in the optic nerve injury group (P< 0.05) and the amplitude of the visual evoked Potential was significantly higher than that of the optic nerve injury group (P< 0.05).ConclusionsPropofol treatment can through an early reduction in rats after optic nerve crush RGCs apoptosis, decreased Caspase-3 expression, increased BCL-2 expression and improve number of optic nerve crush of RGCs survival.

Rats；Optic nerve damage；Propofol；Retinal ganglion cells；Caspase-3；BCL-2

李學東(1970-)，男，學士學位，研究方向：神經(jīng)外科。E-mail:lixuedonggx@163.com。

陳家康，E-mail:LXDDOCTORLG@163.com。

研究報告

R-332

A

1671-7856(2016)07-0042-06

10.3969.j.issn.1671-7856.2016.07.007

2015-09-01