玉 華（內蒙古民族大學，內蒙古通遼028000）

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如達七味散質量標準的研究

玉 華
（內蒙古民族大學，內蒙古通遼028000）

目的 建立蒙藥如達七味散 （木香、梔子、蓽茇等）的質量標準。方法 TLC法鑒別木香、梔子、蓽茇。HPLC分析采用Inertsi1C18色譜柱 （150 mm×4.6 mm，5μm）；流動相甲醇-水 （59∶41）；柱溫30℃；體積流量1.0mL/min；檢測波長225 nm（木香烴內酯、去氫木香內酯）和343 nm（胡椒堿）。結果 TLC斑點清晰，專屬性強。木香烴內酯、去氫木香內酯和胡椒堿分別在76.6～459.6 ng、123.6～741.6 ng、130.62～738.72 ng范圍內線性關系良好，平均回收率分別為99.07%、98.87%、99.24%，RSD分別為1.02%、1.58%、1.76%（n=6）。結論 該方法精密度高，重復性好，可用于如達七味散的質量控制。

如達七味散；木香；梔子；蓽茇；木香烴內酯；去氫木香內酯；胡椒堿

蒙藥如達七味散載自 《赤峰市藥品標準》，由木香、梔子、石榴皮、瞿麥、砂仁、蓽茇、山楂7味藥材組成，具有止吐，解痙之功效，主要用于“巴達干”、“寶日”引起的呃逆、嘔吐、胃痙攣等癥，臨床療效極為顯著，沿用至今。然而，目前無該制劑質量標準的研究報道，故本實驗采用HPLC法對該藥物中的木香烴內酯、去氫木香內酯和胡椒堿進行測定，同時應用TLC法對木香、梔子和蓽茇等進行鑒別，為其后續(xù)臨床應用及研發(fā)提供參考。

1　材料

LC-20ATVP液相色譜儀（包括SPD-M20AVP檢測器、Shimadzu-VP色譜工作站）、AUW電子天平 （日本島津公司）；KQ-600超聲波清洗器（40 kHz、600 W，昆山市超聲儀器有限公司）；DHG-9070電熱恒溫鼓風干燥箱 （上海精宏實驗設備有限公司）；ZF-I三用紫外分析儀 （上海銀澤儀器設備有限公司）。木香烴內酯 （批號 111524-201208）、去氫木香內酯 （批號 111525-201209）、胡椒堿 （批號 110775-201105）、梔子苷 （批號110749-201316）對照品 （中國食品藥品檢定研究院）。蒙藥如達七味散 （批號分別為 131125、140428、130720，內蒙古赤峰市巴林右旗蒙醫(yī)院）。

2　TLC鑒別

2.1木香 取樣品及相應的陰性樣品各約2.0 g，加甲醇15 mL，超聲處理30 min，過濾，濾液蒸干，2 mL甲醇溶解，即得供試品溶液。另取木香烴內酯和去氫木香內酯，加甲醇配成1.0 mg/mL溶液。各吸取6μL，點于同一硅膠G薄層板上，丙酮-環(huán)己烷 （3∶10）預飽和25 min并上行展開至12 cm后取出，晾干，5%香草醛硫酸溶液顯色，適當溫度加熱至斑點清晰，結果見圖1。由圖可知，在對照品與供試品相應的位置處，顯示相同顏色斑點，陰性樣品無干擾［1］。

圖1　木香的TLC色譜圖Fig.1 TLC chromatogram of Aucklandiae Radix

2.2梔子 取樣品及相應的陰性樣品各約1.5 g，分別加甲醇10 m L，超聲處理30 min，過濾，濾液蒸干，1.5 mL甲醇溶解，即得供試品溶液。另取梔子苷，加甲醇配成1.0 mg/mL溶液。各吸取8μL，點于同一硅膠G薄層板上，甲酸-丙酮-乙酸乙酯-水 （1∶5∶5∶1）預飽和20 min并上行展開至12 cm后取出，晾干，置365 nm紫外光燈下檢視，結果見圖2。由圖可知，在對照品與供試品相應的位置處，顯示相同顏色斑點，陰性樣品無干擾［2-3］。

圖2　梔子的TLC色譜圖Fig.2 TLC chromatogram of Gardeniae Fructus

2.3蓽茇 取樣品及相應的陰性樣品各約1.0 g，加無水乙醇10 mL，超聲處理30 min，濾液蒸干，1.0 mL甲醇溶解，即得供試品溶液。另取胡椒堿，加無水乙醇配成1.2 mg/mL溶液。各吸取5μL，點于同一硅膠G薄層板上，丙酮-乙酸乙酯-甲苯（1∶2∶7）預飽和30 min并上行展開至12 cm后取出，晾干，10%硫酸乙醇溶液顯色，適當溫度加熱至斑點清晰，結果見圖3。由圖可知，在對照品與供試品相應的位置處，顯示相同顏色斑點，陰性樣品無干擾［4］。

圖3　蓽茇的TLC色譜圖Fig.3 TLC chromatogram of Piperis Longi Fructus

3　木香烴內酯、去氫木香內酯和胡椒堿含有量的測定［5-10］

3.1色譜條件 Inertsi1-C18色譜柱（150 mm× 4.6 mm，5μm）；流動相為甲醇-水 （59∶41）；體積流量1.0 mL/min；柱溫35℃；木香烴內酯、去氫木香內酯的檢測波長225 nm，在保留時間15 min時變換胡椒堿的檢測波長343 nm；進樣量10μL。

3.2對照品溶液的制備 精密稱取木香烴內酯和去氫木香內酯對照品適量，加甲醇配成含30.64μg/m L木香烴內酯和49.44μg/mL去氫木香內酯的溶液。再精密稱取胡椒堿對照品適量，加甲醇配成52.248μg/mL溶液，即得。

3.3供試品溶液的制備 精密稱取樣品1.0 g，置于具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50 mL，稱定質量，密塞過夜，超聲處理30 min，放冷，甲醇補足減失的質量，取續(xù)濾液，0.45μm微孔濾膜過濾，即得。

3.4陰性溶液的制備 按處方量制備缺相應藥材的樣品，按 “3.3”項下方法制備。

3.5專屬性考察 精密吸取上述溶液各10μL，在 “3.1”項色譜條件下分別注入儀器，結果見圖4。由圖可知，供試品溶液與木香烴內酯、去氫木香內酯和胡椒堿色譜峰處均有吸收峰，而陰性樣品無干擾。

3.6線性關系考察 精密吸取木香烴內酯、去氫木香內酯的混合溶液和胡椒堿溶液2.5、5.0、7.5、10.0、12.5、15.0μL，注入HPLC色譜儀，以峰面積為縱坐標 （Y），進樣量為橫坐標 （X）進行回歸，得到三者的回歸方程分別為Y= 1 882.3X+1 691.3（r=0.999 8），Y=1 278.4X+ 5 906.1（r=0.999 9），Y=7 097.9X-18 705（r=0.999 8），分別在76.6～459.6、123.6～741.6、130.62～738.72 ng范圍內線性關系良好。

3.7 精密度試驗 精密吸取3個對照品溶液10μL，連續(xù)注入儀器6次，記錄峰面積。結果，木香烴內酯、去氫木香內酯和胡椒堿峰面積RSD分別為1.09%、1.28%、1.26%，表明儀器精密度良好。

3.8穩(wěn)定性試驗 取同一樣品溶液10μL，分別于0、2、4、6、8、10、12 h進樣。結果，木香烴內酯、去氫木香內酯和胡椒堿峰面積RSD分別為1.23%、1.52%、0.77%，表明供試品溶液在12 h內穩(wěn)定性良好。

3.9重復性試驗 取同一樣品約1.0 g，按“3.3”項下方法制備6份供試品溶液，在 “3.1”項條件下測定。結果，木香烴內酯、去氫木香內酯和胡椒堿峰面積RSD分別為0.65%、1.70%、0.80%，表明該方法重復性良好。

1.木香烴內酯 2.去氫木香內酯 3.胡椒堿1.costuno1ide 2.dehydrocostus 1actone 3.piperine

3.10加樣回收率試驗 取含有量已知的樣品0.5 g，精密加入0.1244、0.0766和0.082 4 mg/mL對照品貯備液，按“3.3”項下方法制備6份供試品溶液，進行測定，結果見表1。

3.11 含有量測定 取3批樣品，每批約1.0 g，按 “3.3”項下方法制備供試品溶液，測定木香烴內酯、去氫木香內酯、胡椒堿的含有量，結果見表2。

表1　加樣回收率試驗結果（n=6）Tab.1 Results of recovery tests（n=6）

表2　含有量測定結果Tab.2 Results of con tent determ ination

4　討論

4.1TLC鑒別木香展開劑的選擇 本實驗考察甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸 （10∶1∶0.1）、環(huán)己烷-醋酸乙酯 （17∶3）、甲苯-乙酸乙酯 （19∶1）、石油醚（60～90℃）-醋酸乙酯-苯 （7∶1.5∶1.5）、環(huán)己烷-丙酮 （10∶3）等展開系統(tǒng)，發(fā)現(xiàn)環(huán)己烷-丙酮（10∶3）的效果最好，故選用該展開系統(tǒng)。

4.2提取方法的選擇 對70℃恒溫水浴加熱回流提取1、1.5 h，以及冷浸過夜超聲提取30、40min 2種提取方法進行比較，發(fā)現(xiàn)無顯著差異。綜合考慮，選擇冷浸過夜超聲提取30 min。

4.3流動相比例的選擇 以不同比例 （65∶35、60∶40、58∶42、57∶43、59∶41）甲醇-水進行分析，發(fā)現(xiàn)比例為59∶41時分離度最佳，而且峰形良好，故選擇其作為流動相。

5　結論

本實驗采用HPLC法和TLC法，對蒙藥如達七味散進行含有量測定和定性鑒別，該方法操作簡單，重復性良好，準確可靠，可為該藥物的質量標準建立及其開發(fā)應用提供實驗基礎。

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Quality standard for Ruda Q iwei Powder

YU Hua

（Inner Mongolia University for Nationalities，Tongliao 028000，China）

AIM To estab1ish the qua1ity standard for Mongo1ian medicine Ruda Qiuwei Powder（Aucklandiae Radix，Gardeniae Fructus，Piperis Longi Fructus，etc.）.M ETHODS TLC was app1ied to identifying A.Radix，G.Fructus and P.Longi.HPLC ana1ysiswas performed on a 30℃thermostatic Inertsi1C18co1umn（150 mm× 4.6 mm，5μm），with themobi1e phase comprising ofmethano1-water（59∶41）at a f1ow rate of 1.0 mL/min，and the detection wave1engthswere set at225 nm for costuno1ide and dehydrocostus 1actone，and 343 nm for piperine.RESULTS The c1ear spots proved the specificity of TLC.Costuno1ide，dehydrocostus 1actone and piperine showed good 1inear re1ationshipswithin the ranges of 76.6-459.6 ng，123.6-741.6 ng and 130.62-738.72 ng. The average recoveries were 99.07%，98.87%and 99.24%with the RSDs of 1.02%，1.58%and 1.76%（n=6），respective1y.CONCLUSION With high precision and good reproducibi1ity，thismethod can be used for the qua1ity contro1of Ruda Qiwei Powder.

Ruda Qiwei Powder；Aucklandiae Radix；Gardeniae Fructus；Piperis Longi Fructus；costuno1ide；dehydrocostus 1actone；piperine

R927.2

A

1001-1528（2016）06-1285-04

10.3969/j.issn.1001-1528.2016.06.017

2015-11-04

內蒙古民族大學科研基金項目 （NMD1335）

玉 華（1979—），女，講師，從事蒙藥化學的教學與科研工作。Te1：15849553184，E-mai1：mengyiyuhua@126.com