張立國，喻　卓

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CYP2C19基因多態(tài)性與云南漢族人群冠心病的相關性研究

張立國1，喻卓2

目的研究細胞色素P450 (CYP)2C19基因多態(tài)性與云南漢族人群冠心病的相關性。方法隨機選取2012年9月—2013年12月在昆明醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院心內科住院且無血緣關系的云南漢族人群127例作為研究對象，采用基因芯片法檢測所選血液樣本DNA中 CYP2C19 基因序列單核苷酸多態(tài)性位點CYP2C19*1、CYP2C19*2、CYP2C19*3 的基因型，分析63例冠心病組和64例對照組的基因多態(tài)性，從而分析基因多態(tài)性與冠心病的相關性。結果Logistic回歸分析結果：除了年齡、性別、高血壓、糖尿病、高膽固醇血癥等傳統(tǒng)危險因素之后，CYP2C19 *1/*2基因突變者患病風險明顯增加[OR=5.24，95% CI (2.00～13.72)]，CYP2C19 *1/*3基因突變者患病風險亦明顯增加[OR=4.54，95% CI(0.55～37.08)]。結論CYP2C19基因多態(tài)性是云南漢族人群冠心病發(fā)生的重要危險因素。 CYP2C19基因多態(tài)性可以增加云南漢族人群患冠心病的發(fā)生風險。

冠心病；細胞色素P450 2C19；基因多態(tài)性；云南漢族人群

近年來，西南邊陲云南漢族人群的冠心病發(fā)病人數(shù)逐年增多，因此，對云南漢族人群冠心病發(fā)病機制的研究是目前的一個重要課題。目前研究證實，花生四烯酸在內源性細胞色素P450(Cytochrome P450，CYP450)作用下的產(chǎn)物，如環(huán)氧二十碳三烯酸(epoxyeicosatrienoic acids，EETs)[1]、20-羥基二十碳四烯酸(hydroxyeicosatetraenoic acids，HETEs)及前列環(huán)素(PGI2)等，在動脈粥樣硬化、高血壓、心力衰竭等疾病的發(fā)生發(fā)展中起著重要作用[2]。EETs還可以抑制血小板聚集、抑制活化的白細胞黏附及減少血管細胞黏附分子的表達而抑制血栓形成[3]。CYP2C19是CYP家族中的重要成員，是EETs生成和代謝的關鍵酶，目前已經(jīng)有研究證實其基因多態(tài)性和動脈粥樣硬化[4]及氯吡格雷代謝[5-6]有關。本研究采用基因芯片法檢測所選血液樣本DNA中 CYP2C19 基因序列單核苷酸多態(tài)性位點 CYP2C19*1、CYP2C19*2、CYP2C19*3 的基因型，探索云南地區(qū)漢族人群 CYP2C19 基因多態(tài)性與冠心病的相關性。

1　資料與方法

1.1研究對象2012年9月—2013年12月在昆明醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院心內科住院的云南漢族無血緣關系的病人，病人及其父輩均在云南出生并長期居住，共入選127例，冠心病組63例，年齡(50.26±6.65)歲；對照組64例，年齡(46.57±3.86)歲。入選標準：冠心病組符合世界衛(wèi)生組織(WHO)關于冠心病的命名和診斷標準，且經(jīng)冠狀動脈造影證實有一支或多支血管狹窄，狹窄程度大于50%，對照組為冠脈造影證實無冠脈病變或冠脈粥樣硬化者。排除標準：對阿司匹林或氯吡格雷過敏或不能耐受者；半年內有卒中或內臟出血性疾病病史者；嚴重肝臟疾患和(或)凝血功能異常者；具有抗血小板治療禁忌證或近期擬行外科手術者；心臟瓣膜病、心肌病、心肌炎、周圍血管病、感染性心內膜炎；晚期腎功能不全、腫瘤及慢性心力衰竭等嚴重影響近期預后的疾病史。

1.2研究方法對入選病人采用基因芯片法檢測所選血液樣本DNA中 CYP2C19 基因序列單核苷酸多態(tài)性位點CYP2C19*1、CYP2C19*2、CYP2C19*3 的基因型，了解本地區(qū) CYP2C19 基因多態(tài)性分布情況。入選病人常規(guī)行冠脈造影術，分析冠心病組與對照組的等位基因與基因型，從而分析其基因多態(tài)性與冠心病的相關性。

2　結　果

2.1冠心病組與對照組一般資料比較冠心病組吸煙人數(shù)、高血壓病人明顯多于對照組，血肌酐(Scr)、總膽固醇(TC)、血糖水平明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；兩組三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、血尿素氮(BUN)等指標比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。詳見表1。

表1　兩組臨床資料比較

2.2CYP2C19基因多態(tài)性與云南漢族人群冠心病的相關性研究

2.2.1Hardy-Weinberg平衡檢驗127例云南地區(qū)漢族的昆明醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院心內科住院病人(男61例，女66例)，經(jīng)詢問、記錄入選病人均無血緣關系。所選樣本針對CYP2C19 等位基因(*1、*2、*3)的6種基因型*1/*1、*1/*2、*1/*3、*2/*2、*2/*3、*3/*3進行檢測，基因型分布冠心病組χ2=2.91，P=0.71，對照組χ2=1.55，P=0.91。兩組P>0.05，符合 Hardy-Weinberg 遺傳平衡，說明樣本來自于隨機分配平衡狀態(tài)的群體，具有一定代表性。詳見表2、表3。

表2　冠心病組CYP2C19基因型Hardy-Weinberg 平衡檢驗 　例

表3　對照組CYP2C19基因型Hardy-Weinberg 平衡檢驗　例

2.2.2CYP2C19等位基因和基因型在兩組樣本中的分布頻率比較冠心病組CYP2C19*2等位基因明顯高于對照組，冠心病組和對照組等位基因的頻率分布有統(tǒng)計學意義(χ2=17.31， P=0.004)，基因型頻率比較差異有統(tǒng)計學意義(χ2=12.65， P=0.002)。詳見表4。

表4　兩組樣本間等位基因和基因型比較

2.2.3CYP2C19基因多態(tài)性和冠心病的關系Logistic回歸分析將冠心病作為應變量，性別、吸煙史、高血壓病、血糖、TG、TC、年齡和CYP2C19基因多態(tài)性作為自變量，同時將CYP2C19 基因多態(tài)性納入方程，行多因素非條件Logistic回歸分析，在a=0.05的水平上，擬合主效應模型，入選主效應模型的變量有吸煙史、高血壓、血糖及CYP2C19 基因多態(tài)性。CYP2C19 *1/*2基因突變者患病風險明顯增加[OR=5.24，95% CI(2.00～13.72)]，CYP2C19 *1/*3基因突變者患病風險亦明顯增加[OR=4.54，95% CI(0.55～37.08)]。詳見表5。

表5　多因素非條件Logistic回歸分析結果

3　討　論

基因多態(tài)性是指在一個生物群體中，同時并經(jīng)常存在兩種或多種不連續(xù)的變異基因型或等位基因。近年來，對花生四烯酸代謝途徑上的CYP家族基因進行多態(tài)性分析發(fā)現(xiàn)，CYP8B1[7]、CYP3A5[8]、CYP4F2[9]、CYP2J2[10]、CYP2C9[11]、CYP2C19[12]等基因的多態(tài)性和冠心病、高血壓等疾病的發(fā)生具有關聯(lián)性。目前報道的CYP2C19突變型均屬于單個堿基突變，即單核苷酸多態(tài)性。眾所周知，聚集于動脈管壁部位的氧化型低密度脂蛋白是動脈粥樣硬化斑塊形成的關鍵因素。目前認為CYP 酶主要參與細胞氧化應激及低密度脂蛋白被活性氧族(reactive oxygen species，ROS)氧化的過程[13]。Ercan等[12]研究顯示：CYP作為調節(jié)環(huán)氧二十碳三烯酸基因家族中的表氧化酶，在調節(jié)血管中發(fā)揮重要作用。檢測了108例冠脈狹窄病人和90名健康對照個體，利用PCR檢測CYP2C9/19*2和CYP2C9/19*3，發(fā)現(xiàn)病例組和對照組CYP2C9*2/*3等位基因分布差異無統(tǒng)計學意義，CYP2C9*2雜合子吸煙病人動脈粥樣硬化患病風險增加3.7倍。病例組CYP2C19*3雜合子等位基因出現(xiàn)頻率較對照組高(分別為10.2%，5.6%)，患病風險為對照組3倍[OR=3.75，95%CI(0.75～18.65)]，CYP2C9等位基因突變攜帶者CYP2C9代謝能力下降，從而導致內皮源性超極化因子(EDHF)合成減少，動脈粥樣硬化患病風險增加。

本研究對127例云南地區(qū)無血緣關系的漢族人群 CYP2C19 的基因多態(tài)性進行統(tǒng)計，對兩個最常見代謝缺陷基因CYP2C19*2、CYP2C19*3 進了檢測。本研究顯示：在云南漢族人群中，冠心病組和對照組之間基因型和等位基因的分布差異有統(tǒng)計學意義。冠心病組中雜合子出現(xiàn)頻率明顯高于對照組，并且兩組在等位基因分布差異有統(tǒng)計學意義，冠心病組CYP2C19*2等位基因頻率明顯高于對照組。實驗結果與理論分析相一致。冠心病除了遺傳因素的作用，高血壓、高血脂、糖尿病、年齡、性別、吸煙等因素也與冠心病的發(fā)生、發(fā)展密切相關。本研究結果顯示：入選主效應模型的變量有吸煙史、高血壓、血糖及CYP2C19 基因多態(tài)性。CYP2C19 *1/*2基因突變者患病風險明顯增加[OR=5.24，95%CI(2.00～13.72)]，CYP2C19 *1/*3基因突變者患病風險亦明顯增加[OR=4.54，95%CI(0.55～37.08)]。CYP2C19 基因多態(tài)性使冠心病的發(fā)生風險明顯增加。在調整了其他危險因素的干擾之后，發(fā)現(xiàn)CYP2C19 基因多態(tài)性是云南漢族人群冠心病發(fā)生的重要危險因素。

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(本文編輯郭懷印)

Correlation between CYP2C19 Gene Polymorphism and Coronary Heart Disease in Yunnan Han Population

Zhang Liguo，Yu Zhuo

Tai’an Hospital of Traditional Chinese Medicine，Tai’an 271000，Shandong，China Corresponding Author：Yu Zhuo(First Affiliated Hospital of Kunming Medical University，Kunming 650032，Yunnan，China)

ObjectiveTo investigate the correlation between gene polymorphism of cytochrome P450 (CYP) 2C19 and coronary heart disease (CHD) in Yunnan Han population.MethodsOne hundred and twenty-seven Yunnan Han population were randomly selected from September 2012 to December 2013.Using gene chip assay，the genotypes were detected in the selected blood sample with genotype CYP2C19 gene sequence of single nucleotide polymorphisms CYP2C19 * 1，CYP2C19 * 2，CYP2C19 * 3 genotype.The gene polymorphisms were analyzed in CHD group (n=63)and control group(n=64).The correlation of gene polymorphism and CHD were analyzed.ResultsLogistic regression analysis showed that in addition to age，sex，hypertension，diabetes，hypercholesterolemia and other traditional risk factors，CYP2C19*1/*2 gene mutation significantly increased risk of CHD[OR=5.24，95% CI (2.00 to 13.72)]，CYP2C19*1/ *3 gene mutation was also significantly increased the risk [OR = 4.54，95% CI (0.55 to 37.08)].CYP2C19 gene polymorphism was an important risk factor for coronary heart disease in Yunnan Han population.Conclusion CYP2C19 gene polymorphism may increase the risk of coronary heart disease in Yunnan Han population.

coronary heart disease；cytochrome P450 (CYP) 2C19；gene polymorphism；Yunnan Han population

1.山東省泰安市中醫(yī)醫(yī)院(山東泰安 271000)；2.昆明醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院

喻卓，E-mail：dr_yuzhuo@163.com

R541.4R256.2

Adoi：10．3969/j．issn．1672-1349．2016．14．010

1672-1349(2016)14-1597-04

2015-10-26)