康立勛　高艷宇黑龍江省醫(yī)院口腔種植中心，黑龍江哈爾濱　150036

兩種材料復(fù)合用于犬前牙拔牙位點(diǎn)保存的實(shí)驗(yàn)研究

康立勛高艷宇
黑龍江省醫(yī)院口腔種植中心，黑龍江哈爾濱150036

目的 探討前牙拔牙位點(diǎn)即刻保存中重組合異種骨（reconstituted bone xenograft，RBX）與羥基磷灰石生物陶瓷復(fù)合物的作用。方法 比格犬共6只，隨機(jī)分為A、B、C組，每組各2只。所有動(dòng)物拔除上頜全部第二切牙后，三組采用不同的實(shí)驗(yàn)方法，A組應(yīng)用RBX與羥基磷灰石生物陶瓷復(fù)合物，B組僅應(yīng)用羥基磷灰石生物陶瓷，C組為對(duì)照組，術(shù)后4周每組各處死1只犬，12周每組再處死1只犬，觀察大體標(biāo)本、形態(tài)學(xué)測(cè)量以及CT檢查評(píng)價(jià)拔牙窩愈合情況。結(jié)果 三組犬4、12周時(shí)唇舌側(cè)牙槽嵴寬度差值比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），A組差值最??；4周與12周時(shí)拔牙窩唇側(cè)骨吸收程度A組阻止牙槽骨吸收效果最好，B組次之，C組最差；12周時(shí)A組唇側(cè)牙槽嵴高度差值比較優(yōu)于B組和C組（P＜0.05）；術(shù)后4周與12周CT值與術(shù)前CT值之差A(yù)組均高于B組和C組（P＜0.05）。結(jié)論 RBX與羥基磷灰石生物陶瓷復(fù)合物聯(lián)合應(yīng)用，可減緩牙槽嵴吸收，促進(jìn)新生骨形成，具有保存拔牙位點(diǎn)的作用，可作為良好的新型復(fù)合骨移植材料。

重組合異種骨；羥基磷灰石生物陶瓷；位點(diǎn)保存；犬

［Abstract］Objective To discuss the function of RBX（reconstituted bone xenograft）and hydroxyapatite bioceramics complexes in the instant preservation of anterior extraction sockets.Methods Six beagle dogs were divided into group A，group B and group C，with 2 dogs in each group.After the extraction of both maxillary incisors，group A was immediately implanted RBX/hydroxyapatite bioceramics complexes，group B was implanted coralline hydroxyapatite，and group C was blank control.One dog from each group was sacrificed 4 weeks later and the other dog was sacrificed 12 weeks later to prepare tissue samples.The healing of extraction soket was evaluated by gross observation，morphological measurements and photographs of cone beam CT.Results There were significant differences in the labial-lingual alveolar ridge width difference among these three groups both 4 and 12 weeks later（P＜0.05），and the smallest difference of labial-lingual width was in group A.In 4 and 12 weeks，the re-absorption in extraction area bone was the best in group A，followed by group B，and was the worst in group C.The labial alveolar bone height difference was better in group A than that in group B and group C in 12 weeks（P＜0.05）.The difference between postoperative cone beam CT value and preoperative cone beam CT value was higher in group A than that in group B and group C in 4 and 12 weeks （P＜0.05）.Conclusion RBX/hydroxyapatite bioceramics complex can be used as a new material in the field of bone graft which can slow the absorption of alveolar ridge，promote new bone formation，and save the tooth extraction sites.

［Key words］RBX；Hydroxyapatite bioceramics complexes；Site preservation；Dogs

種植義齒是修復(fù)牙列缺失的重要方式，已被越來(lái)越多的患者所認(rèn)可。牙齒種植可以為義齒提供理想的支撐，使義齒更加穩(wěn)固，提高了咀嚼效率，而且具有無(wú)需磨削基牙、舒適等優(yōu)點(diǎn)；同時(shí)，種植義齒還可恢復(fù)發(fā)音，滿足患者對(duì)口腔美學(xué)的期盼。但種植義齒修復(fù)需要有足夠的骨量和良好的骨質(zhì)，才能實(shí)現(xiàn)種植體的長(zhǎng)期穩(wěn)定性，由于拔牙后自然愈合的拔牙窩發(fā)生的骨吸收可能導(dǎo)致種植區(qū)的骨量不足，在上頜前牙美學(xué)區(qū)域尤為明顯［1-3］。針對(duì)種植區(qū)骨量不足這一困擾口腔種植醫(yī)生的棘手問(wèn)題，本研究應(yīng)用RBX聯(lián)合羥基磷灰石生物陶瓷對(duì)犬拔牙位點(diǎn)保存進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究，現(xiàn)報(bào)道如下。

1　材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

比格犬6只，雄性，體重11～15 kg，隨機(jī)分為三組，每組各2只。實(shí)驗(yàn)犬由哈爾濱醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物部提供，許可證編號(hào)：SCXK（黑）2013-001。

1.2儀器與材料

重組合異種骨（reconstituted bone xenograft，RBX，天津中津生物發(fā)展有限公司提供）由牛骨形態(tài)發(fā)生蛋白（bone morphogenetic protein，BMP）重組合而成，海奧口腔修復(fù)膜（煙臺(tái)正海生物技術(shù)有限公司），鈦釘（西安中邦），微創(chuàng)拔牙器械、不可吸收縫線，LEICA型鋸割切片機(jī)（德國(guó)），DPCX-L型雙能X線骨密度儀（Lunar公司），800型沉淀離心機(jī)（上海手術(shù)器械廠）。

1.3RBX與羥基磷灰石生物陶瓷復(fù)合物材料的制備

安靜狀態(tài)下對(duì)A組中1只犬頸外靜脈采血20 mL，置于標(biāo)記好的2支抗凝離心管中，于無(wú)菌室內(nèi)以500 r/min的速度，離心10 min，離心后血液分為3層，中間層置于無(wú)菌紗布上，將水分吸干，將其中的一份細(xì)小的碎片，與羥基磷灰石生物陶瓷顆粒充分混合；另外一份輕輕擠壓成膜狀，即為RBX膜。

1.4手術(shù)過(guò)程［4］

比格犬取仰臥位，應(yīng)用速眠新肌肉注射（0.1 mL/ kg），術(shù)區(qū)常規(guī)消毒，鋪無(wú)菌巾，分離牙齦，拔牙鉗拔除上頜左右第二切牙（圖1A），參考平面設(shè)定為上頜第一前磨牙切緣所在的平面，分別測(cè)定高度值及寬度值。高度值設(shè)定為各牙槽窩唇側(cè)嵴中點(diǎn)至參考平面的距離；寬度值設(shè)定為各牙槽窩唇、舌側(cè)嵴中點(diǎn)的距離［5］，拍攝X線測(cè)量垂直方向的骨密度。所有拔牙位點(diǎn)均用刮匙搔刮干凈，生理鹽水沖洗，修整軟組織邊緣，A組植入RBX復(fù)合植骨材料（圖1B），B組植入羥基磷灰石生物陶瓷，C組為空白對(duì)照組。三組位點(diǎn)均嚴(yán)密縫合，覆蓋海澳膜以保護(hù)全部拔牙位點(diǎn)。

1.5觀察指標(biāo)

術(shù)后4周三組均處死1只犬，12周時(shí)再處死另一只犬。觀察：①肉眼觀察術(shù)區(qū)創(chuàng)口愈合情況，有無(wú)感染、裂開(kāi)；②形態(tài)學(xué)觀察牙槽嵴的高度及寬度；③CBCT測(cè)定骨密度。由同一位醫(yī)生實(shí)施測(cè)量工作，每一位點(diǎn)至少重復(fù)測(cè)量5次取平均值［6］。

1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，比較采用t檢驗(yàn)；三組拔牙創(chuàng)CT值比較采用方差分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1大體觀察

肉眼觀察術(shù)區(qū)創(chuàng)口愈合良好，無(wú)感染、裂開(kāi)。4周時(shí)，A組探測(cè)牙槽嵴質(zhì)地較韌，B組同A組感覺(jué)相似，C組探測(cè)較軟，可見(jiàn)骨壁凹陷。12周時(shí)，各組新生骨高度又有下降，質(zhì)地A組和B組堅(jiān)硬，C組明顯質(zhì)地松軟。

2.2形態(tài)學(xué)觀察

4周時(shí)，測(cè)量牙槽嵴高度及寬度，各組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；12周時(shí)，A組牙槽嵴高度及寬度優(yōu)于B組和C組（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

表1　三組術(shù)后與術(shù)前唇舌側(cè)牙槽嵴寬度和高度差值比較（x±s，mm）

2.3三組間CT值比較

術(shù)后4周、12周三組CT值比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），術(shù)后12周，A組高于B組和C組（P＜0.05）。見(jiàn)表2。

表2　三組拔牙創(chuàng)CT值比較（x±s）

2.4實(shí)驗(yàn)犬新鮮拔牙創(chuàng)建立及RBX復(fù)合植骨材料填充過(guò)程

見(jiàn)圖1。

圖1　新鮮拔牙創(chuàng)建立及RBX復(fù)合植骨材料填充

3　討論

口腔種植技術(shù)為恢復(fù)患者牙列缺失提供了條件，目前口腔種植修復(fù)正在蓬勃發(fā)展，生物材料的不斷更新也極大地提高了種植后效果。既往的病例較多是就醫(yī)時(shí)已是缺牙狀態(tài)，僅有部分病例是外傷等情況造成牙齒斷裂或缺失，現(xiàn)在大多是未曾拔牙就來(lái)咨詢(xún)種植修復(fù)，為拔牙位點(diǎn)保存提供了方向［7］。傳統(tǒng)觀念是不認(rèn)可在新鮮拔牙創(chuàng)內(nèi)植入骨替代材料，認(rèn)為自然愈合最為妥當(dāng)，在自然愈合后，再行種植修復(fù)，但這可能限制了牙槽骨再生潛能，為后續(xù)的種植修復(fù)制造困難，對(duì)前牙美學(xué)區(qū)域影響最為突出。前牙美學(xué)區(qū)因自身的解剖學(xué)特點(diǎn)，骨壁較薄，且拔牙后，牙槽骨可能出現(xiàn)吸收或者骨量不足，想要保證種植修復(fù)的成功及達(dá)到良好的美學(xué)效果，就必須附加一系列骨增量手術(shù)，加大了患者生理創(chuàng)傷和心理負(fù)擔(dān)。在實(shí)際臨床工作中，尋求牙齒位點(diǎn)保存的方法，盡早讓缺失的牙列恢復(fù)功能及美學(xué)，是臨床醫(yī)生及患者共同的目標(biāo)［8］。本研究采用微創(chuàng)拔牙位點(diǎn)保存技術(shù)［9，10］，最大限度地減少拔牙過(guò)程中人為破壞骨組織，阻斷或減輕牙槽嵴吸收，為骨替代材料的充填以及維持牙槽嵴豐滿度奠定了基礎(chǔ)。

本研究在犬口腔中展開(kāi)，將犬前牙區(qū)牙齒拔除，建立新鮮拔牙位點(diǎn)（圖1A），制備好拔牙位點(diǎn)后，將RBX與羥基磷灰石生物陶瓷填充致拔牙位點(diǎn)中（見(jiàn)圖1B），并用自制的生物膜進(jìn)行覆蓋，增加了該復(fù)合材料的穩(wěn)定性及作用面積。本研究中使用的RBX［11，12］是BMP和小牛部分骨組織重組而成，其理化性質(zhì)和人體骨相似，具有良好的生物相容性。既往結(jié)果提示［13］，RBX與羥基磷灰石生物陶瓷具有協(xié)同作用，減緩牙槽嵴吸收，促進(jìn)新骨形成，可增加牙槽骨的骨量，是種植修復(fù)得以實(shí)現(xiàn)。本研究在術(shù)后4周時(shí)，實(shí)驗(yàn)組牙槽嵴高度明顯優(yōu)于對(duì)照組；術(shù)后12周，A組的骨密度較術(shù)前恢復(fù)更多，CT檢查提示植骨材料已與牙槽骨融為一體，牙槽骨骨量明顯增加，說(shuō)明RBX復(fù)合物并不阻礙新生骨形成，相反促進(jìn)細(xì)胞遷移、分化與增殖，誘導(dǎo)新骨形成［14，15］。

本研究結(jié)果顯示，添加了羥基磷灰石生物陶瓷的RBX復(fù)合物不僅不阻礙新生骨形成，更具有成骨作用。將RBX自制膜覆蓋材料表面，一方面增加了復(fù)合物的穩(wěn)定性，另一方面，RBX壓縮成膜狀，其面積顯著增大，使得內(nèi)含的生長(zhǎng)因子緩慢釋放，較為持續(xù)的發(fā)揮成骨效果［16，17］，膜的覆蓋同時(shí)避免唇頰側(cè)微小血管損傷，對(duì)菲薄的唇頰側(cè)骨壁起到一定的保護(hù)作用，使其不會(huì)造成血液供應(yīng)障礙，與Fickl等［18］的研究一致。術(shù)后12周時(shí)，A組CT值高于B組，說(shuō)明拔牙后在拔牙創(chuàng)內(nèi)即刻植入RBX復(fù)合物，可達(dá)到減緩牙槽骨吸收，誘導(dǎo)成骨細(xì)胞分化，實(shí)現(xiàn)拔牙位點(diǎn)保存的作用。

本研究采用微創(chuàng)拔牙技術(shù)與位點(diǎn)保存技術(shù)相結(jié)合，并在犬的前牙區(qū)植入RBX與羥基磷灰石生物陶瓷復(fù)合物，將臨床技術(shù)與生物材料相結(jié)合，證實(shí)其對(duì)骨密度的增加、牙槽嵴的增量都有良好的效果，結(jié)合其生物相容性、價(jià)格經(jīng)濟(jì)的特點(diǎn)，在未來(lái)的口腔種植修復(fù)中會(huì)有一定的應(yīng)用前景。

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An experimental study of two materials used for the saving of the dog tooth extraction sites

KANG LixunGAO Yanyu
Dental Implantology Center，Hospital of Heilongjiang Province，Harbin150036，China

R783

A

1673-9701（2016）17-0025-03

黑龍江省衛(wèi)生計(jì)生委科研課題（2014-151）

（2016-03-19）