李 軍 李昱憬 宋虎平 閆瓏文

（延安市技術轉移中心 陜西延安 716000）

分析菌草栽培銀耳培養(yǎng)基配方篩選

李 軍 李昱憬 宋虎平 閆瓏文

（延安市技術轉移中心 陜西延安 716000）

近些年，國內外很多學者對銀耳的細胞學以及生長歷程進行研究工作。從醫(yī)學的角度分析，與普通食藥用菌相比較，銀耳的特殊性可以從以下兩個方面進行闡述：①其自體有芽孢生存；②有半生菌（羽毛狀菌絲）寄生。與棉籽殼銀耳、椴木銀耳相比較，菌草栽培技術栽培出的銀耳不存在棉酚等問題，且其粗質蛋白以及粗多糖的含量相對較高。

菌草；銀耳；配方篩選

作者對銀耳栽培的專業(yè)理論進行分析，并借助試管法對其配方進行篩選[1]，希望銀耳栽培者能夠選對配方，從而提高銀耳生產產量以及質量。長期的實踐結果證明，當栽培銀耳培養(yǎng)基中的各種成分含量滿足（類蘆70%、高粱5%、麩皮24%、石灰粉1%），優(yōu)質的菌草再配環(huán)境就被創(chuàng)造出來，此時銀耳菌絲也會實現(xiàn)快速繁殖的目標?？傊?，本文作者認為菌草栽培銀耳過程中其配方的選擇時至關重要的，所以本文在探究銀耳對培養(yǎng)基營養(yǎng)需求的基礎上，對栽培方案進行科學的策劃，使最佳的配方得以構建。

1 試驗材料與方法

1.1 地點的選取

試驗地點一般選擇在某一菌草研究院，這樣試驗環(huán)境的清潔、規(guī)整使試驗的順利開展有了基礎的保證。

1.2 試驗原材料的供應

為本次試驗提供的原材料主要包括以下材料：巨菌草、象草、五節(jié)芒以及菌草栽培培養(yǎng)基的四大必備物質（蘆類、高粱、麩皮、石灰粉），這里作者想要做的說明是，麩皮這一原材料可以被棉籽殼代替，此外小米的假如使菌草銀耳培養(yǎng)基中的營養(yǎng)更加的豐盛。當然銀耳菌株的采用是必不可少的，產自福建省古田縣Tr.083型號的銀耳菌株具有極高的利用價值。

1.3 試驗儀器

作者認為利用菌草栽培技術對銀耳進行栽培培養(yǎng)工作中，試驗儀器的選擇對試驗的成敗起著決定性的作用，因為儀器的材質在某種環(huán)境下很有可能與試驗的各種原材料發(fā)生化學反應，最終使培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分發(fā)生改變，此外儀器容積大小的設置能夠為銀耳菌絲的生長提供最適宜的生長空間。通過長期的栽培實踐，作者向廣大銀耳栽培者推薦以下幾種試驗儀器：江南儀器廠生產的XSP-18A型電子顯微鏡；SW-CJ-1F型超凈工作臺以及產自山東習得分析天平以及立式滅菌器等都是上好的試驗儀器。

1.4 銀耳栽培配方的確立

試驗過程中應用試管法以完成對菌草栽培銀耳培養(yǎng)基優(yōu)質配方的篩選工作。依據(jù)上述試驗原材料供應的種類，在試驗過程中菌草的選擇范圍就被確定了，即五節(jié)芒、巨菌草、象草以及類蘆四類，為了使菌草培養(yǎng)基個物質的比例闡述得更加明確，作者以表格（表1）的形式去表明每一類菌草在培養(yǎng)基中添加的比例。

在培養(yǎng)基中，輔助銀耳菌絲生產的材料是多種多樣的，例如我們日常生活中常見的小米顆粒、小米粉、高粱顆粒或者是高粱粉碎面等，如果培養(yǎng)基中不添加任何輔助原料，那么就必須對小米或者高粱米的顆粒實施粉碎工作。對表1的配方表進行分析，通過計算可以形成169個不同類型的配方。那么這一配方數(shù)怎樣計算出來的呢？菌草種類為4，“輔料”共有6種表現(xiàn)形式，任何一個菌草都有與之相匹配的7種比例添加梯度，那么此時我們可以得出的運算式為：7×4×6+1=169種，這169即為組合配方數(shù)目。為了使上述的論述更加具有說服力，作者對某一配方進行舉例分析，例如配方21b中，“2”代表的是培養(yǎng)基中菌草的種類巨菌草，“1”這一數(shù)字代表的是菌草添加的百分比例為55%，字母“b”是高粱顆粒這一輔佐材料。

表1 菌草栽培銀耳培養(yǎng)基配方表

1.5 試驗方法的應用

為使銀耳菌絲以及羽毛狀菌絲的外部結構以及形狀更加便于觀察，那么就應該在PDA這一平板型培養(yǎng)基中使銀耳菌絲以及羽毛狀菌絲得以完全的植入，蓋玻片經過嚴格的殺毒滅菌程序以后，以45°的角度置于培養(yǎng)基中，當然蓋玻片的數(shù)量不能低于2個，接下來進行的工作環(huán)節(jié)是對平板培養(yǎng)基的開口處進行密封工作，在此基礎上將培養(yǎng)基整體放入清潔的培養(yǎng)箱里，當然該培養(yǎng)箱的溫度時刻應該保持25℃的狀態(tài)中。對菌絲或者是羽毛狀菌絲進行觀察室時，在鑷子的配合下將其輕置于載玻片上，在其表皮輕輕滴上微量的無水乙醇，此時的環(huán)境應該那是溫度適宜、通風良好的，接下來無菌水完成對其的沖洗工作以后將載玻片整體置于通風口處，使其自行完成干燥工作；最后進行的步驟是將2滴棉蘭染色劑完成對其的染色工作，講干燥的蓋玻片置于載玻片的上面，這樣菌絲的形態(tài)在40倍的熒光顯微鏡下就能清晰的顯現(xiàn)出來。

本文作者認為，菌草栽培銀耳銀耳培養(yǎng)基配方的篩選是一門學問。對表1中169種配方的培養(yǎng)基進行參照，作者通過相關計算認為培養(yǎng)基的水分含量應該管控在55%范圍之內，對試驗原料進行充分的攪拌以后，將其全部裝進18cm×1.5cm的試管儀器中，每種配方的制作至重復5次，最后將試管儀器置于121℃的高壓鍋內進行1h的消毒處理，繼而使其自行冷卻到25℃的室溫。對進行接種時，上述兩種菌絲的混合必須充分均勻，每2d在儀器上劃線1次，以此確定銀耳菌絲的生產速度，那么子實體的出耳情況就顯露出來了。

2 試驗結果與分析工作的開展

對銀耳菌絲以及羽毛狀菌絲外部形狀的觀察：

試驗結果表明，在PDA栽培培養(yǎng)基上，羽毛狀菌絲色澤為乳白色、呈羽毛片狀，在試驗的后期階段該菌絲的色彩漸漸演化為淺黃色，最后發(fā)展為淺棕色，在此過程中銀耳培養(yǎng)基的顏色也發(fā)生相應的變化，試驗者看到的是黑色會這是黑綠色（圖1）。

圖1 羽毛狀菌絲在明場和熒光顯微鏡下[200μg/（mL·CFW）]的對比照片（×40）

銀耳菌絲在PDA培養(yǎng)環(huán)境中的色彩并不是單一化的，大體上呈現(xiàn)在我們眼前的是乳白色、淺黃色以及黃色之間的中間色澤。此外在培養(yǎng)基容器的表皮上，氣生菌絲生長的形態(tài)千變萬化，或直立或平立或附著生長。同時部分節(jié)段上有橫隔膜出現(xiàn)，甚至是鎖狀聯(lián)合結構的形成?？傊?，試驗結果表明銀耳菌絲的生長速率較為遲緩，原基具有膠質化的屬性，分生孢子與瓜子的形狀相似（如圖2）。

在試驗結束以后運用DPS軟件的特效功能完成對優(yōu)質菌草栽培銀耳培養(yǎng)基配方的篩選工作?？梢詫⒉煌吓囵B(yǎng)基的菌絲生長速率大小列出來，類蘆最快，象草居于尾端，五節(jié)芒大于巨菌草；但是從菌絲的生長態(tài)勢上看，巨菌草為最佳的優(yōu)質原料；子實體的出耳情況與輔料添加的種類與原料的選取之間有直接的聯(lián)系。

圖2

3 對菌草栽培銀耳試驗結果的探討與總結

對試驗的全程現(xiàn)象進行細致、深入的觀察，同時在生物學理論的依托下，菌草栽培技術原理在銀耳產品生產過程中的應用是對傳統(tǒng)銀耳栽培技術的有效改良，同時它在銀耳生產過程中的應用豐富了銀耳栽培體系的內容?？傊?，本文作者主觀的認為，菌草栽培技術可以被視為一種新型的、創(chuàng)新型的高科技生產手段，在培養(yǎng)基中，類蘆與高粱粉末的均勻混合是最優(yōu)質的配方組合。作者強烈建議廣大銀耳栽培者可以選擇類蘆70%、高粱5%、麩皮24%、石灰粉1%的配方進行銀耳的生產活動。此外作者也提出這樣的意見，如果只是利用菌草進行銀耳栽培試驗，那么高粱這一試驗輔助材料必須進行改良工作，這樣其特質的性能才會發(fā)揮出來。

4 結束語

對試驗的結果進行具體的分析工作，相關數(shù)據(jù)表明，菌草銀耳的營養(yǎng)價值略高于棉籽殼銀耳與椴木銀耳，且具有養(yǎng)生保健的功效[2]。所以我們可以肯定的是，菌草栽培技術在銀耳產品生產過程中的應用是具有極高的現(xiàn)實價值的，它一方面使生產成本得以壓縮，另一方面對“菌林矛盾”起到了緩解的作用，使銀耳栽培者獲得經濟利潤的同時，提高其市場競爭力，此時我國的銀耳生產事業(yè)實現(xiàn)了健康平穩(wěn)發(fā)展的目標。

[1]黃玉琴，項麗娟，林占熺，等．菌草栽培銀耳培養(yǎng)基配方篩選[J]．中國農學通報，2014．

[2]暴悅梅，陳仁紹．銀耳多糖的保健作用及應用前景[J]．營養(yǎng)健康學報，2009．

S646

A

1004-7344（2016）24-0196-02

2016-8-14

李軍（1962-），男，高級工程師，本科，主要從事微生物工作。

李昱憬（1992-），女，本科，主要從事技術服務工作。

宋虎平（1985-），男，大專，主要從事技術服務工作。

閆瓏文（1981-），男，大專，主要從事技術服務工作。