徐福勝，李林臣，張建偉，高洪芬，馬顯亮，劉建軍

(1.河北省黃驊市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，河北 黃驊 061100；2.河北省張家口市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，河北 張家口 075000)

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腺苷脫氨酶及外周血異型淋巴細(xì)胞聯(lián)合測定對(duì)小兒傳染性單核細(xì)胞增多癥的診斷價(jià)值

徐福勝1，李林臣2，張建偉1，高洪芬1，馬顯亮1，劉建軍1

(1.河北省黃驊市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，河北 黃驊 061100；2.河北省張家口市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，河北 張家口 075000)

目的探討血清腺苷脫氨酶(adenosine deaminase，ADA)及外周血異型淋巴細(xì)胞聯(lián)合檢測在傳染性單核細(xì)胞增多癥(IM)患兒診斷及鑒別診斷中的臨床價(jià)值。方法采用過氧化物酶法檢測50例IM患兒血清ADA活性水平及外周血涂片分類100個(gè)白細(xì)胞，計(jì)數(shù)異型淋巴細(xì)胞百分比，并與50例同時(shí)期健康體檢(排除EB病毒感染)對(duì)照組兒童進(jìn)行比較。結(jié)果血清ADA檢測對(duì)小兒IM鑒別診斷特異性為71.0%、敏感性為55.6%、準(zhǔn)確性為69.8%；外周血異型淋巴細(xì)胞分類計(jì)數(shù)特異性為61.1%、敏感性為58.6%、準(zhǔn)確性為63.3%；聯(lián)合兩項(xiàng)指標(biāo)檢測特異性為76.9%、敏感性為67.8%、準(zhǔn)確性為79.8%。結(jié)論聯(lián)合檢測血清ADA及外周血異型淋巴細(xì)胞有助于小兒IM的診斷，較單一指標(biāo)檢測可明顯提高診斷特異性、敏感性及準(zhǔn)確性?；純撼霈F(xiàn)不規(guī)則發(fā)熱，且血清ADA水平及異型淋巴細(xì)胞比例升高時(shí)，應(yīng)考慮到有EB病毒感染的可能性。

腺苷脫氨酶；異型淋巴細(xì)胞；傳染性單核細(xì)胞增多癥；EB病毒

傳染性單核細(xì)胞增多癥(infectious mononucleosis,IM)是一種單核-巨噬細(xì)胞系統(tǒng)急性增生性傳染病。主要臨床癥狀包括發(fā)熱、頸部淋巴結(jié)腫大、咽峽炎、肝脾腫大，其中發(fā)熱、頸部淋巴結(jié)腫大和咽峽炎為IM三聯(lián)征。在中國，本病多見于兒童，與西方國家發(fā)病高峰為青年不同[1]。主要由飛沫與唾液經(jīng)呼吸道傳播，其次經(jīng)密切接觸傳播。主要由Epstein-Barr病毒(EB病毒)感染引起，是兒童發(fā)熱的原因之一，且逐年增多[2]。因其臨床表現(xiàn)缺乏特異性及首發(fā)癥狀的多樣性，早期常易誤診或漏診，給臨床快速診斷帶來困難[3-4]。為尋求一種快速、簡便的實(shí)驗(yàn)室檢查方法，我們對(duì)臨床診斷為IM的50例患兒及同期同齡健康兒童進(jìn)行血清ADA及異型淋巴細(xì)胞聯(lián)合檢測，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料

2013-01—2014-08月在黃驊市人民醫(yī)院兒科住院IM患兒50例，均符合《實(shí)用兒科學(xué)》診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]，其中男31例，女19例；年齡6個(gè)月～11歲，平均4.55歲。選擇同期同齡健康兒童50例為對(duì)照組，其中男29例，女21例；年齡9～12歲，平均4.90歲。與IM組比較，年齡和性別差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2儀器與試劑

德國羅氏P800全自動(dòng)生化分析儀，德國羅氏診斷有限公司生產(chǎn)的ADA檢測試劑盒，瑞氏染液(珠海貝索生物公司生產(chǎn))及磨砂玻片。

1.3方法

空腹采集靜脈血3 mL，及時(shí)分離血清，ADA采用液體雙試劑過氧化物酶法檢測，2 h內(nèi)完成;采集末梢血推片，瑞氏液染色，油鏡下分類100個(gè)白細(xì)胞，計(jì)算異型淋巴細(xì)胞百分比。所有操作嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，以血清ADA>25 U·L-1、異型淋巴細(xì)胞百分比>10%為有臨床診斷價(jià)值。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2　結(jié)　果

2.1血清ADA及異型淋巴細(xì)胞測定值比較

IM組血清ADA值為(27.3±11.2)U·L-1、異型淋巴細(xì)胞比例(18.5±7.8)%，正常對(duì)照組血清ADA值為(15.8±6.1)U·L-1、異型淋巴細(xì)胞比例(1.7±0.8)%，組間差異有顯著性(P<0.01)。IM組中ADA>25U·L-138例，陽性率76%，異性淋巴細(xì)胞比例>10%為43例，陽性率86%；對(duì)照組ADA值均<25U·L-1、異型淋巴細(xì)胞比例均<10%，無陽性病例。(表1)。

n血清ADA值(U·L-1)異型淋巴細(xì)胞比例(%)IM組5027.3±11.218.5±7.8對(duì)照組5015.8±6.11.7±0.8

2.2血清ADA與外周血異型淋巴細(xì)胞分類計(jì)數(shù)聯(lián)合檢測結(jié)果

聯(lián)合檢測小兒IM診斷及鑒別診斷的特異性、敏感性、準(zhǔn)確性均有所提高，表明聯(lián)合檢測優(yōu)于單個(gè)指標(biāo)檢測(表2)。

表2　ADA、異型淋巴細(xì)胞聯(lián)合檢測特異性、敏感性、準(zhǔn)確性比較　(%)

3　討　論

EB病毒為一種嗜淋巴細(xì)胞的DNA病毒，屬于皰疹病毒科。研究表明，世界上超過90%的人有過EB病毒感染[6]。EB病毒感染時(shí)癥狀差異較大，有些只表現(xiàn)出無癥狀的血清學(xué)ADA陽性，有些則病情兇險(xiǎn)，其中約半數(shù)發(fā)展為IM，IM是由EB病毒感染引起的一種累及多系統(tǒng)的全身性病患，表現(xiàn)為淋巴細(xì)胞增生，細(xì)胞體積和細(xì)胞核體積增大，形成異型淋巴細(xì)胞。

ADA屬于巰基酶，使腺苷脫氨并通過一系列化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生次黃嘌呤，并最終氧化次黃嘌呤形成尿酸，通過尿液排出體外。血細(xì)胞中ADA主要存在于紅細(xì)胞和白細(xì)胞中，其生物活性是血清的40～70倍，且淋巴細(xì)胞含量明顯高于紅細(xì)胞，尤其是T淋巴細(xì)胞的含量最高[7]。但ADA活性與淋巴細(xì)胞的絕對(duì)數(shù)量無直接關(guān)系，而與淋巴細(xì)胞的分化和激活相關(guān)[8]。本研究結(jié)果表明，IM患兒血清ADA活性明顯高于對(duì)照組，且陽性率達(dá)到了76%。IM患兒血清ADA活性升高可能是由于B淋巴細(xì)胞溶解釋放大量ADA及免疫系統(tǒng)受到刺激、T淋巴細(xì)胞異?；罨鲋常偈勾罅苛馨图?xì)胞中ADA釋放入血所致[9]。因此，血清ADA檢測IM患兒有較大臨床價(jià)值。

異型淋巴細(xì)胞(abnormal lymphocyte)是外周血中出現(xiàn)的一種形態(tài)變異的非典型淋巴細(xì)胞，在顯微鏡下可看到其細(xì)胞漿、細(xì)胞核發(fā)生形態(tài)學(xué)上的變化。增多的原因較為復(fù)雜，主要與病毒感染及病毒引起的變態(tài)反應(yīng)有關(guān),健康人血片中一般較少[10]。IM患兒體內(nèi)B淋巴細(xì)胞是EB病毒侵犯的主要細(xì)胞，病毒進(jìn)入到靶細(xì)胞內(nèi)后，在細(xì)胞內(nèi)大量復(fù)制，最終導(dǎo)致B淋巴細(xì)胞溶解，逐步誘導(dǎo)T細(xì)胞及NK細(xì)胞生成大量活化因子[11],從而引起一系列免疫反應(yīng)，其中對(duì)CD8+T淋巴細(xì)胞的作用最為重要。在EB病毒感染的急性期，全部CD8+T淋巴細(xì)胞活性及數(shù)目增加，其能夠殺滅EB病毒及被EB病毒感染的成熟B淋巴細(xì)胞[12]。研究表明，IM患兒存在繼發(fā)性免疫功能紊亂，尤其是T淋巴細(xì)胞免疫功能紊亂[10]。本研究結(jié)果顯示，IM患兒異型淋巴細(xì)胞比例明顯高于對(duì)照組，且陽性率達(dá)到了86%。IM患兒異型淋巴細(xì)胞比例升高可能是由于患兒免疫系統(tǒng)受到刺激使T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞異常活化增殖，形成了大量的異性淋巴細(xì)胞，從而使其比例增高。

在中國IM多發(fā)生在學(xué)齡前及學(xué)齡兒童，尤其是4～6歲的兒童，發(fā)達(dá)國家則是以青春期和成人居多，年齡多在10～30歲之間[13]。造成這種差異的原因可能與衛(wèi)生醫(yī)療條件及生活習(xí)慣有關(guān)。ADA與外周血異型淋巴細(xì)胞分類計(jì)數(shù)聯(lián)合檢測對(duì)小兒IM診斷及鑒別的特異性、敏感性和準(zhǔn)確性均有所提高，提示二者聯(lián)合檢測優(yōu)于單個(gè)指標(biāo)檢測。當(dāng)患兒有發(fā)熱、咽峽炎或淋巴結(jié)炎，且伴有血清ADA活性增高、外周血涂片異型淋巴細(xì)胞增多時(shí)，應(yīng)想到發(fā)生IM的可能，可進(jìn)一步檢測相關(guān)EB病毒VCA-IgM抗體、EB病毒DNA、嗜異性抗體等確診。治療IM應(yīng)以抗病毒對(duì)癥治療為主，防止發(fā)生并發(fā)癥，避免臨床濫用抗菌藥物。

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[責(zé)任編輯：李薊龍英文編輯：劉彥哲]

Diagnostic Value of Combined Detection of Serum Adenosine Deaminase and Abnormal Peripheral Lymphocytes in Children Infectious Mononucleosis

XU Fu-sheng1,LI Lin-chen2，ZHANG Jian-wei1，et al

(Department of Clinical Laboratory,The People’s Hospital of Huanghua City,Huanghua,Hebei 061100,China)

ObjectiveTo study the clinical value of diagnosis and differential diagnosis of combined detection serum adenosine deaminase(ADA)and abnormal peripheral lymphocytes in children infectious mononucleosis(IM).MethodsThe serum adenosine deaminase activity level was detected in 50 cases of infectious mononuclear cells increased patients by peroxidase and 100 white blood cells of outside blood were classified with smears,and the percentage of abnormal lymphocytes was worked out.And then a comparison was made with 50 cases of healthy physical examination(excluding EB infection)children in the control group.ResultsThe specificity,sensitivity and accuracy of differential diagnosis of serum adenosine deaminase in children with infectious mononucleosis were 71.0%,55.6%,and 69.8,respectively.The specificity,sensitivity and accuracy of peripheral blood lymphocyte classification were 72.1%,58.6%,and 70.3%,respectively.The specificity,sensitivity and accuracy of the combined indicators were 76.9%,67.8%,and 79.8%,respectively.ConclusionThe combined detection of serum ADA and peripheral blood lymphocytes is more helpful for the diagnostic of infectious mononucleosis in children.Compared with the single index detection,the diagnosis specificity,sensitivity and accuracy can be improved significantly.So when there is irregular fever in children with the increased serum ADA level and the proportion of abnormal lymphocytes,the possibility of EB infection should be considered.

adenosine deaminase;abnormal lymphocytes;infectious mononucleosis;EB virus

河北省衛(wèi)生廳重點(diǎn)科技研究計(jì)劃(No.ZD20140065)

徐福勝(1981-)，男，河北黃驊人，主管檢驗(yàn)師，主要研究方向：臨床微生物學(xué)。

R 725.1

A

10.3969/j.issn.1673-1492.2016.06.003

來稿日期：2016-03-31