梁曉輝, 張曉東 *,司洪宇, 趙玉曉,華棟梁，王丙蓮，嚴(yán)媛媛，楊黎軍，盧勇

(1.山東省科學(xué)院能源研究所，山東省生物質(zhì)氣化重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，山東 濟(jì)南 250014；2.山東省科學(xué)院生物研究所，山東 濟(jì)南 250014；3.江蘇綠方園生物科技有限公司，江蘇 鹽城　224000；4.山東冠寶林炭業(yè)集團(tuán)有限公司，山東 青島　266300 )

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【生物質(zhì)能源】

市政剩余污泥蛋白質(zhì)堿提取資源化利用工藝研究

梁曉輝1, 張曉東1 *,司洪宇1, 趙玉曉1,華棟梁1，王丙蓮2，嚴(yán)媛媛3，楊黎軍4，盧勇1

(1.山東省科學(xué)院能源研究所，山東省生物質(zhì)氣化重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，山東 濟(jì)南 250014；2.山東省科學(xué)院生物研究所，山東 濟(jì)南 250014；3.江蘇綠方園生物科技有限公司，江蘇 鹽城224000；4.山東冠寶林炭業(yè)集團(tuán)有限公司，山東 青島266300 )

摘要：研究了市政剩余污泥的蛋白質(zhì)提取工藝。首先比較了酸堿兩種預(yù)處理方法對(duì)蛋白質(zhì)提取的影響，對(duì)效果較好的堿處理方法進(jìn)行了進(jìn)一步優(yōu)化。利用響應(yīng)面法對(duì)NaOH濃度、溶液加入量和處理時(shí)間進(jìn)行了優(yōu)化，獲得了最優(yōu)蛋白質(zhì)提取條件: 21.79 g 濕污泥中加入 80 mL NaOH溶液(3.68 mol/L)，在50 ℃條件下處理 20.32 h。在上述條件下，蛋白質(zhì)產(chǎn)量為8 967±0.4 μg/g 干污泥, 是優(yōu)化前的 2.33倍。

關(guān)鍵詞：市政剩余污泥；蛋白質(zhì)提??；堿水解；優(yōu)化

近年來(lái)，隨著我國(guó)城鎮(zhèn)化進(jìn)程的加快，污水處理量日益上升，其主要副產(chǎn)物剩余污泥的產(chǎn)量也隨之增加。市政剩余污泥的處理方法主要有堆肥、焚燒、填海和填埋等[1]，污泥的處理處置費(fèi)用已經(jīng)占污水廠(chǎng)處理費(fèi)用的25%～60%[2]。目前我國(guó)大量市政剩余污泥并未能得到有效的處理處置，已經(jīng)造成了嚴(yán)重的二次污染，對(duì)城市污水廠(chǎng)剩余污泥減量化、無(wú)害化及資源化利用已引起我國(guó)環(huán)保部門(mén)的高度重視。在發(fā)達(dá)國(guó)家，污泥處理處置是極其重要的環(huán)節(jié)，其投資約占污水處理廠(chǎng)總投資的50%～70%。在我國(guó)現(xiàn)有污水處理設(shè)施中，有污泥穩(wěn)定處理設(shè)施的還不到25%，處理工藝和配套設(shè)備較為完善的還不到10%，其中能夠正常運(yùn)行的為數(shù)不多，特別是在城市化水平較高的地區(qū)，污泥處理處置問(wèn)題已經(jīng)十分突出[3]。隨著我國(guó)“水十條”的出臺(tái)，剩余污泥的合理化處理處置已經(jīng)成為當(dāng)務(wù)之急。

剩余污泥的組成十分復(fù)雜，其有機(jī)成分主要包括原生動(dòng)物、后口動(dòng)物及藻類(lèi)等[4-5]，蛋白質(zhì)含量很高。剩余污泥中的蛋白質(zhì)可以用于微生物培養(yǎng)基、可生物降解的發(fā)泡劑、泡沫滅火劑及泡沫混凝土保溫材料等的生產(chǎn)。為了提高蛋白質(zhì)提取率，目前已經(jīng)報(bào)道了多種細(xì)胞破壁方法，包括物理法(熱水解、高壓提取及超聲波等)、化學(xué)法 (酸堿處理和臭氧處理等)以及生物法(主要為酶處理)等[6-9]。由于物理法需要特殊設(shè)備且能耗較高，生物法所需酶制劑價(jià)格高、處理速度較慢，均不適用于價(jià)值較低的剩余污泥資源化利用?；瘜W(xué)法不需要特殊設(shè)備且處理成本低廉，適宜大規(guī)模工業(yè)化應(yīng)用。

本文主要比較了酸(HCl)和堿(NaOH)處理對(duì)市政剩余污泥蛋白質(zhì)提取效果的影響，發(fā)現(xiàn)NaOH處理的提取效果優(yōu)于HCl，并利用響應(yīng)面法對(duì)市政剩余污泥NaOH提取條件進(jìn)行了進(jìn)一步的優(yōu)化。

1　材料與方法

1.1市政剩余污泥主要性質(zhì)

本研究所用市政剩余污泥的主要性質(zhì)如表1所示。污泥的含水量、灰分、揮發(fā)分、固定碳、總碳、總氮、pH和有機(jī)質(zhì)等參考文獻(xiàn)[10-11]進(jìn)行測(cè)定。

表1　市政剩余污泥主要性質(zhì)

1.2蛋白質(zhì)提取

將20 g濕污泥樣品裝入250 mL三角瓶中，分別加入80 mL濃度為4 mol/L HCl或者4 mol/L NaOH溶液，在50oC條件下進(jìn)行水解提取蛋白質(zhì)，2 h后對(duì)提取液進(jìn)行離心(10 000 g, 15 min)，取上清液采用福林酚進(jìn)行蛋白質(zhì)含量測(cè)定[11-12]。

1.3蛋白質(zhì)提取工藝優(yōu)化

通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，NaOH溶液對(duì)污泥中蛋白質(zhì)的提取效果優(yōu)于稀鹽酸。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，選取NaOH、處理時(shí)間和污泥加入量3個(gè)主要因素采用Box-behnken實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，進(jìn)一步優(yōu)化污泥中的蛋白質(zhì)提取條件[13-14]，根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果建立擬合模型并對(duì)其進(jìn)行ANOVA 分析，對(duì)模型涉及到的主要參數(shù)如決定系數(shù)(R2)、純誤差、殘差和失擬項(xiàng)等進(jìn)行了計(jì)算。本研究采用Design Expert (version 7.0, STATEASE Inc., Minneapolis, USA)軟件進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和分析。

2　結(jié)果與討論

2.1酸堿處理對(duì)市政剩余污泥中蛋白質(zhì)提取的影響

采用酸堿處理法提取市政剩余污泥中的蛋白質(zhì)，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2　酸堿處理對(duì)市政剩余污泥中蛋白質(zhì)提取的影響

由表2可以看出，酸堿處理后蛋白質(zhì)提取量均遠(yuǎn)高于對(duì)照組，其中NaOH對(duì)污泥中蛋白質(zhì)提取的效果優(yōu)于HCL，產(chǎn)量可以達(dá)到3 842.6 μg/g 干污泥，是HCl處理的1.2倍。故選擇NaOH處理法用于后續(xù)提取工藝研究。

2.2蛋白質(zhì)提取工藝優(yōu)化

為了提高污泥蛋白質(zhì)產(chǎn)量，本研究選取3個(gè)主要影響因素即NaOH溶液濃度(X1), 污泥加入量(X2)和處理時(shí)間(X3)在所獲得的初步優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件(80 mL濃度4 mol/L NaOH溶液中加入20 g濕污泥，處理時(shí)間為20 h)基礎(chǔ)上利用響應(yīng)面法進(jìn)行了進(jìn)一步優(yōu)化，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果見(jiàn)表3。

表3　市政剩余污泥提取蛋白質(zhì)Box-behnken實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果分析

注：括號(hào)中的數(shù)值為編碼值。

根據(jù)表3的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，通過(guò)回歸分析所得到的擬合方程如下：

Y=8 807.1-3.1X1+98.56X2+121.04X3+629.45X1X2+171.35X1X3-

75.73X2X3-380.11X12-540.04X22-1 039.59X32，

(1)

其中，Y為響應(yīng)值(蛋白質(zhì)產(chǎn)量，μg/g干污泥)、X1、X2和X3分別表示NaOH濃度(mol/L)，污泥加入量 (g) 和處理時(shí)間(h)。

對(duì)擬合模型的ANOVA分析見(jiàn)表4。由表4可知，決定系數(shù)R2=0.940 5，說(shuō)明該模型擬合度較高，約94%的變化可以通過(guò)該模型解釋?zhuān)籔<0.0138表明該模型顯著(P<0.05)。失擬合系數(shù)不顯著(P>0.05)，同樣表明模型擬合度較好?？傊?，該模型與實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)擬合度較高，能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)本研究中蛋白質(zhì)提取實(shí)驗(yàn)的預(yù)測(cè)。

表4　回歸模型ANOVA分析

通過(guò)實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以繪制出NaOH濃度(X1)、污泥加入量(X2)、處理時(shí)間 (X3) 和蛋白質(zhì)產(chǎn)量之間關(guān)系的響應(yīng)曲面圖(圖1～3)，并可以通過(guò)計(jì)算獲得X1、X2和X3的解分別為 -0.159 1，0.179 4和0.064 8，從而獲得了優(yōu)化后的蛋白質(zhì)提取條件為：80 mL濃度為3.68 mol/L的NaOH溶液中加入21.79 g濕污泥，處理時(shí)間為20.32 h，處理溫度為50 ℃。在上述條件下，蛋白質(zhì)產(chǎn)量的預(yù)測(cè)值為8 819.6 μg/g干污泥。為了確定該提取條件，采用所獲得的優(yōu)化條件進(jìn)行了3次實(shí)驗(yàn)，其蛋白質(zhì)產(chǎn)量為8 967±0.4 μg/g干污泥，與模型預(yù)測(cè)值符合性很好。

X1　NaOH濃度；X2　污泥加入量；Y　蛋白質(zhì)產(chǎn)量圖1　NaOH濃度、污泥加入量與蛋白質(zhì)產(chǎn)量響應(yīng)面三維圖Fig.1　Three dimensional graph of the response surface of NaOH concentration, sludge concentration and protein yield

X2　污泥加入量；X3　處理時(shí)間；Y　蛋白質(zhì)產(chǎn)量圖2　污泥加入量、處理時(shí)間與蛋白質(zhì)產(chǎn)量響應(yīng)面三維圖Fig.2　Three dimensional graph of the response surface of sludge concentration, treatment time and protein yield

X1　NaOH濃度；X3　處理時(shí)間；Y　蛋白質(zhì)產(chǎn)量圖3　NaOH濃度、處理時(shí)間與蛋白質(zhì)產(chǎn)量響應(yīng)面三維圖Fig.3　Three dimensional graph of the response surface of NaOH concentration, treatment time and protein yield

3　結(jié)論

近年來(lái)市政剩余污泥產(chǎn)量連年增加，由于處理處置難度大，目前已經(jīng)對(duì)城市固體垃圾處理造成了很大壓力。研究表明，市政剩余污泥中蛋白質(zhì)資源豐富，這為其高值化及資源化利用提供了可能。在本研究中，首先對(duì)酸堿處理市政剩余污泥提取蛋白質(zhì)的效果進(jìn)行了比較，發(fā)現(xiàn)堿處理效果優(yōu)于酸處理。在此基礎(chǔ)上，選取了3個(gè)主要因素即NaOH溶液濃度、市政剩余濕污泥的加入量和處理時(shí)間采用響應(yīng)面法進(jìn)行了優(yōu)化，優(yōu)化后的蛋白質(zhì)提取條件為：80 mL濃度為3.68 mol/L的NaOH溶液中加入21.79 g濕污泥，處理時(shí)間為20.32 h，處理溫度為50 ℃。在上述條件下，蛋白質(zhì)產(chǎn)量的預(yù)測(cè)值為8 819.6 μg/g干污泥，實(shí)測(cè)值為8 967±0.4 μg/g干污泥。上述研究結(jié)果可以為市政剩余污泥規(guī)?；崛〉鞍踪|(zhì)提供理論支持。

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DOI:10.3976/j.issn.1002-4026.2016.04.012

收稿日期：2016-06-16

基金項(xiàng)目：山東省重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃 (2015GSF117034)；國(guó)家自然科學(xué)基金青年項(xiàng)目(51408348)；濟(jì)南市青年科技明星計(jì)劃(201406021)

作者簡(jiǎn)介：梁曉輝(1978-)，男，博士，研究方向?yàn)楣腆w有機(jī)廢棄物資源化利用。 *通信作者，張曉東。Email：zhangxd@sderi.cn

中圖分類(lèi)號(hào)：X703.1

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1002-4026(2016)04-0055-05

Resource utilization of protein alkali extraction from municipal residual sewage sludge

LIANG Xiao-hui1，ZHANG Xiao-dong1*,SI Hong-yu1,ZHAO Yu-xiao1, HUA Dong-liang1,WANG Bing-lian2,YAN Yuan-yuan3,YANG Li-jun4,LU Yong1

(1. Shandong Provincial Key Laboratory of Biomass Gasification Technology, Energy Research Institute, Shandong Academy of Sciences,Jinan 250014, China; 2. Biology Institute, Shandong Academy of Sciences,Jinan 250014, China; 3. Jiangsu Green Square Garden Biological Technology Co., Ltd.,Yancheng 224000, China; 4.Shandong Guanbaolin Carbon Industry Group Co.,Ltd., Qingdao 266300, China)

Abstract∶We address protein extraction process of municipal residual sewage sludge.We initially compared acid and alkaline hydrolysis pretreatment methods and optimized the better alkaline hydrolysis method for protein extraction from municipal residual sludge. To acquire optimal extraction condition, we optimized NaOH concentration, solution amount and pretreatment time with response surface method.The optimal protein extraction condition is 21.79 g wet municipal sludge,80 mL NaOH solution (3.68 mol/L), and pretreatment time of 20.32 h at 50 ℃.The optimal protein extraction yield is 8 967±0.4 μg/g dry sludge, 2.33 times of initial extraction yield.

Key words∶municipal sewage sludge waste; protein extraction; alkaline hydrolysis; optimization