吳金斌，鄒德學(xué)，周　逵，晏耀明

(北京大學(xué)深圳醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東深圳 518036)

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CD64指數(shù)與C反應(yīng)蛋白在新生兒細(xì)菌感染性疾病中的臨床診斷價(jià)值

吳金斌，鄒德學(xué)，周逵，晏耀明

(北京大學(xué)深圳醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東深圳 518036)

摘要:目的探討聯(lián)合檢測中性粒細(xì)胞CD64指數(shù)和C反應(yīng)蛋白(CRP)水平在新生兒細(xì)菌感染性疾病中的診斷價(jià)值。方法選取北京大學(xué)深圳醫(yī)院新生兒科2015年1～12月收治的139例新生兒進(jìn)行回顧性分析，分為細(xì)菌感染組72例和病毒感染組67例，并選取健康新生兒50例作為健康對照組，對3組間CD64指數(shù)、CRP水平及其陽性率進(jìn)行比較分析，并對CD64指數(shù)和CRP診斷細(xì)菌感染的敏感度、特異度、陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值進(jìn)行分析。結(jié)果細(xì)菌感染組CD64指數(shù)和CRP水平與病毒感染組和健康對照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，細(xì)菌感染組治療后CD64指數(shù)和CRP水平均明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。CD64指數(shù)診斷細(xì)菌感染的敏感度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值分別為91.7%、92.5%、93.0%、91.2%，明顯高于CRP，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。CD64指數(shù)與CRP呈正相關(guān)(r=0.781，P<0.01)。結(jié)論聯(lián)合檢測CD64指數(shù)和CRP水平，有助于新生兒細(xì)菌感染的早期診斷、鑒別診斷及對抗感染療效的考核，且CD64指數(shù)的診斷效率明顯優(yōu)于CRP。

關(guān)鍵詞:CD64；C反應(yīng)蛋白；新生兒；細(xì)菌感染

新生兒感染性疾病是新生兒期常見的一種疾病，細(xì)菌感染是引起嬰兒死亡的主要原因，且新生兒缺乏特異體征和癥狀，易與其他疾病混淆，早期診斷和及時(shí)治療是決定預(yù)后的關(guān)鍵[1]。但由于免疫功能尚未成熟等原因，對新生兒感染的早期臨床診斷仍缺乏一種有效、準(zhǔn)確的檢測手段。為進(jìn)一步提高新生兒感染的早期診斷率，探討一種快速、可靠的方法，本研究對北京大學(xué)深圳醫(yī)院新生兒科2015年1～12月收治的疑似感染患兒進(jìn)行了中性粒細(xì)胞CD64指數(shù)和C反應(yīng)蛋白(CRP)聯(lián)合檢測，來探討CD64指數(shù)和CRP在新生兒細(xì)菌感染診斷中的實(shí)用價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1一般資料研究對象為2015年1～12月北京大學(xué)深圳醫(yī)院新生兒科收治的新生兒共139例，細(xì)菌感染組72例(經(jīng)細(xì)菌培養(yǎng)、病原學(xué)檢測證實(shí))，其中男47例，女35例，平均日齡8.3 d(1～29 d)，平均胎齡38.5周(37～42周)，敗血癥27例，非敗血癥感染45例，為局部感染患兒，包括感染性肺炎、臍炎、尿路感染、腸炎、膿皰瘡；病毒感染組67例(經(jīng)相關(guān)血清學(xué)抗體檢測證實(shí))，其中男39例，女28例，平均日齡8.1 d(1～28 d)，平均胎齡38.2周(37～42周)，嬰幼兒急疹29例，皰疹性咽峽炎21例，輪狀病毒腸炎11例，病毒性腦炎4例，蕁麻疹2例。選取同期來本院體檢無感染癥狀健康新生兒50例作為健康對照組，其中男30例，女20例，平均日齡8.4 d(1～28 d)，平均胎齡38.7周(38～42周)。3組新生兒在年齡、性別等方面差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法入院當(dāng)天應(yīng)用抗菌藥物、抗病毒藥物治療之前，采集外周血用于CD64、CRP檢測。檢測CD64的流式細(xì)胞儀為美國BD FACS Calibur，配套分析軟件由美國VERITY SOFTWARE HOUSE提供，取50 μL全血+20 μL CD64 PE/CD45 Percp抗體(美國BD公司配套產(chǎn)品)混勻放置，以IgG1-FITC為同型對照。暗處放置30 min后加FACS溶血?jiǎng)? mL，再暗處放置15 min后上機(jī)檢測。上機(jī)前先以標(biāo)準(zhǔn)熒光微球校準(zhǔn)儀器，每次上機(jī)檢測都使用同一電壓條件。每份標(biāo)本計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞，計(jì)算中性粒細(xì)胞上CD64的平均熒光強(qiáng)度與淋巴細(xì)胞上CD64的平均熒光強(qiáng)度之比，即CD64指數(shù)。同時(shí)滿足以下2個(gè)條件：(1)以檢測標(biāo)本的淋巴細(xì)胞作為內(nèi)部陰性對照；(2)以檢測標(biāo)本的單核細(xì)胞作為內(nèi)部陽性對照，單核細(xì)胞CD64指數(shù)須≥3.5 MFI。CRP檢測采用免疫比濁法，儀器為Beckman Coulter公司生產(chǎn)的IMMAGE免疫分析儀和配套試劑，操作按儀器說明書進(jìn)行，≥8 mg/L為陽性。

2結(jié)果

2.1各組CD64指數(shù)、CRP水平比較組間兩兩比較顯示，細(xì)菌感染組治療前外周血中性粒細(xì)胞CD64指數(shù)、CRP水平明顯高于病毒感染組和健康對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；病毒感染組和健康對照組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。細(xì)菌感染組經(jīng)抗感染治療7 d后，CD64指數(shù)、CRP水平較治療前明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，但與健康對照組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1　　各組CD64指數(shù)、CRP水平比較

注：與健康對照組比較，△P<0.05；與病毒感染組比較，○P<0.05；與治療7 d后比較,◇P<0.05。

2.2各組CD64指數(shù)、CRP 陽性率比較以CD64指數(shù)≥3.5 MFI、CRP≥8 mg/L為陽性標(biāo)準(zhǔn)，細(xì)菌感染組CD64指數(shù)、CRP陽性率明顯高于病毒感染組和健康對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，且CD64指數(shù)陽性率高于CRP陽性率；病毒感染組和健康對照組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表2　　各組CD64指數(shù)和CRP陽性率比較

注：與健康對照組比較，△P<0.05；與病毒感染組比較，○P<0.05。

表3　　CD64指數(shù)和CRP水平對新生兒細(xì)菌感染診斷效能比較[%(n/n)]

2.3CD64指數(shù)、CRP水平對新生兒細(xì)菌感染診斷效能比較以CD64指數(shù)≥3.5 MFI、CRP≥8 mg/L為陽性標(biāo)準(zhǔn)，χ2檢驗(yàn)結(jié)果顯示，CD64指數(shù)診斷新生兒細(xì)菌感染的敏感度、特異度、陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值均明顯高于CRP，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。Pearson相關(guān)分析顯示，72例細(xì)菌感染新生兒CD64指數(shù)與CRP水平呈直線正相關(guān)(r=0.781，P<0.01)。見表3。

3討論

細(xì)菌感染性疾病在臨床中發(fā)病率高，且各種疾病均易繼發(fā)細(xì)菌性感染，由于抗菌藥物的濫用，耐藥菌株的不斷出現(xiàn)，使細(xì)菌感染的發(fā)病率有持續(xù)增長的趨勢。目前實(shí)驗(yàn)室傳統(tǒng)的細(xì)菌感染檢測指標(biāo)主要是白細(xì)胞計(jì)數(shù)(WBC)、CRP、血培養(yǎng)，WBC檢測方法簡便、快捷，被認(rèn)為是鑒別細(xì)菌感染的常規(guī)項(xiàng)目，但用于診斷小兒細(xì)菌感染的準(zhǔn)確性很低，特別是新生兒，由于新生兒應(yīng)激反應(yīng)及免疫系統(tǒng)尚未發(fā)育完善，外周血WBC不能準(zhǔn)確反映其嚴(yán)重程度。CRP特異性低，很多非感染性疾病均會(huì)升高。血培養(yǎng)雖然是細(xì)菌感染的金標(biāo)準(zhǔn)，但陽性率不高，且培養(yǎng)所需時(shí)間長(需要3～7 d)，不能達(dá)到早期診斷的目的[2]。近年來，應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測外周血中性粒細(xì)胞表面CD64分子的表達(dá)，在診斷細(xì)菌感染中的研究日益增多，并證實(shí)其是一個(gè)準(zhǔn)確、客觀的新指標(biāo)，且升高程度與感染的嚴(yán)重程度成正比[3]。

CD64是相對分子質(zhì)量為72 000的跨膜糖蛋白，能識(shí)別免疫球蛋白的Fc段，表達(dá)受細(xì)胞因子的調(diào)控，起到連接體液免疫和細(xì)胞免疫的橋梁作用?？赏ㄟ^抗體依賴性細(xì)胞毒作用、細(xì)胞吞噬作用、免疫復(fù)合物清除作用實(shí)現(xiàn)對病原微生物的清除。當(dāng)機(jī)體受到細(xì)菌感染時(shí)中性粒細(xì)胞CD64表達(dá)在4～6 h內(nèi)就會(huì)增高，在新生兒感染時(shí)顯著升高，在全身細(xì)菌感染時(shí)升高尤為明顯[4]。大量表達(dá)的CD64與其配體結(jié)合后，啟動(dòng)并放大免疫反應(yīng)，將細(xì)胞外信號(hào)傳遞到細(xì)胞內(nèi)，導(dǎo)致細(xì)胞活化，產(chǎn)生吞噬作用、抗體依賴細(xì)胞介導(dǎo)細(xì)胞毒作用、細(xì)胞因子的釋放，從而清除病原菌[5]。CRP是一種急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，是非特異性炎癥指標(biāo)。正常情況下僅少量存在于人體體液中。健康人的血清CRP參考區(qū)間為0.057～8.200 mg/L[6]，但在組織損傷、炎癥、手術(shù)后CRP濃度顯著升高，甚至可達(dá)到上千倍，對于感染、各種炎癥過程、組織損傷與壞死的判斷、監(jiān)測及病情評估與療效考核，都具有重要的臨床價(jià)值。本研究結(jié)果顯示，CD64指數(shù)和CRP水平在細(xì)菌感染組呈現(xiàn)高表達(dá)，在病毒感染組和健康對照組不增高，細(xì)菌感染組與健康對照組、病毒感染組比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，可以作為新生兒細(xì)菌感染診斷和鑒別診斷的重要指標(biāo)。細(xì)菌感染組經(jīng)抗菌藥物治療7 d后，CD64指數(shù)和CRP水平有明顯下降，與治療前比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，表明CD64指數(shù)和CRP水平可以作為抗菌藥物治療有效性的指標(biāo)，用于衡量和指導(dǎo)臨床判斷抗生素治療和停藥的時(shí)機(jī)，為選擇有效藥物和撤除治療提供重要的依據(jù)[7]。有文獻(xiàn)報(bào)道，CD64作為一種敏感的監(jiān)測感染狀態(tài)的指標(biāo)，可用于監(jiān)測抗菌藥物的療效，抗菌藥物治療有效時(shí)下降至正常水平，無效時(shí)沒有明顯變化[8]。

本研究結(jié)果表明，細(xì)菌感染組外周血中性粒細(xì)胞CD64指數(shù)和CRP的陽性率分別為91.7%和73.6%，明顯高于病毒感染組和健康對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，且CD64指數(shù)的陽性率高于CRP；病毒感染組和健康對照組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。有文獻(xiàn)報(bào)道，CD64診斷感染性疾病時(shí)敏感度和特異度都比較高(90%～100%)，是診斷感染的早期敏感指標(biāo)[9]。但由于新生兒免疫系統(tǒng)、肝臟發(fā)育不完善，在受到感染或嚴(yán)重感染后產(chǎn)生的CRP量較少，且升高較緩慢，所以當(dāng)受細(xì)菌性感染時(shí)陽性率較低，敏感度較差。本研究結(jié)果顯示，CD64指數(shù)診斷新生兒細(xì)菌感染的敏感度、特異度、陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值分別為91.7%、92.5%、93.0%和91.2%，均明顯高于CRP ，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。說明CD64指數(shù)對診斷新生兒細(xì)菌感染，判斷病情、評價(jià)預(yù)后具有很高的臨床價(jià)值。CRP是臨床常用的診斷細(xì)菌感染的指標(biāo)，但其敏感度、特異度、陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值均較低，本研究中分別為73.6%、74.6%、75.7%和72.5%，其診斷價(jià)值均低于CD64[10]。另外，CD64的表達(dá)與性別和年齡無關(guān)，僅在細(xì)胞激活時(shí)表達(dá)，并且檢測快速(<1 h)，樣本需要量少。Pearson相關(guān)分析顯示，72例細(xì)菌感染患新生兒CD64指數(shù)與CRP水平呈直線正相關(guān)(r=0.781，P<0.01)，提示在急性炎性反應(yīng)早期兩者可能由相似的機(jī)制觸發(fā)[11]，其具體機(jī)制尚有待進(jìn)一步的確定，作為炎癥指標(biāo)用于感染性疾病的診斷有臨床價(jià)值。

綜上所述， CD64指數(shù)和CRP的測定對診斷新生兒細(xì)菌感染性疾病均有一定的幫助，聯(lián)合檢測CD64指數(shù)和CRP對新生兒細(xì)菌感染的早期診斷、療效評估和避免濫用抗菌藥物等有較好的指導(dǎo)意義，在鑒別細(xì)菌性感染和病毒性感染時(shí)可作參考。通過比較認(rèn)為，CD64指數(shù)具有較高的陽性率、敏感度、特異度、陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值，是一項(xiàng)高敏感、高特異的診斷感染性疾病的早期標(biāo)志物，在新生兒感染性疾病中具有較高價(jià)值，動(dòng)態(tài)監(jiān)測其水平，對治療效果的評價(jià)具有較高的臨床實(shí)用價(jià)值，值得推廣。

參考文獻(xiàn)

[1]徐家新,李娟,王磊.降鈣素原在新生兒細(xì)菌感染性疾病早期診斷中的意義[J].中華全科醫(yī)學(xué),2013,11(11):1690-1691.

[2]許文芳.CD64、CRP在重癥細(xì)菌感染中的診斷價(jià)值[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2011,26(2):127-129.

[3]武超.CD64在感染性疾病中診斷價(jià)值的研究[J].安徽預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志,2013,19(2):117-119.

[4]汪盈,楊祖欽,孫忠敏,等.血清淀粉酶A蛋白、中性粒細(xì)胞表面抗原CD64在新生兒敗血癥中的診斷價(jià)值[J].臨床兒科雜志,2013，31(6):526-529.

[5]李德紅,居軍.診斷感染性疾病的新指標(biāo):中性粒細(xì)胞CD64[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2012,27(1):67-70.

[6]曹艷林,劉德貝,夏先考.新生兒肺炎合并膿毒癥患兒檢測血清降鈣素原和高敏C反應(yīng)蛋白的臨床價(jià)值[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2014,29(10):1000-1003.

[7]夏敏,戎群芳,張泓,等.重癥監(jiān)護(hù)室感染患兒CD64表達(dá)的臨床研究[J].中華急診醫(yī)學(xué)雜志,2011,20(5):473-476.

[8]郝麗紅,麻慶榮,張文雙,等.中性粒細(xì)胞黏附因子CD11b與CD64表達(dá)對新生兒感染的早期診斷價(jià)值[J].天津醫(yī)藥,2011,39(4):325-328.

[9]阮莉莉,杜俊君,林艷,等.CD64指數(shù)在新生兒膿毒癥早期診斷中的意義[J].上海交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2014,34(10):1503-1510.

[10]郝玲,任常軍,王炳輝,等.CD64、降鈣素原在新生兒敗血癥診斷中的價(jià)值[J].臨床兒科雜志,2011,29(3):216-218.

[11]楊曉春,袁玉芳,張榮榮,等.新生兒感染性疾病中性粒細(xì)胞表面CD64表達(dá)及其臨床意義[J].南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版,2009，29(10):1469-1470.

作者簡介：吳金斌，男，副主任檢驗(yàn)技師，主要從事急診檢驗(yàn)與管理研究。

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.14.008

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1673-4130(2016)14-1920-03

(收稿日期：2016-01-05修回日期：2016-03-18)

Clinical diagnostic value of CD64 index and CRP in newborn bacterial infectious diseases

WUJinbin，ZOUDexue，ZHOUKui，YANYaoming

(DepartmentofClinicalLaboratory,ShenzhenHospitalofPekingUniversity,Shenzhen,Guangdong518036，China)

Abstract:ObjectiveTo investigate the diagnostic value of combined detection of neutrophil CD64 index and C reactive protein (CRP) levels in newborn bacterial infectious diseases.MethodsThe retrospective analysis was performed on 139 neonates admitted to the neonatal department of our hospital from January to December 2015， including 72 cases in the bacterial infection group and 67 cases in the viral infection group， and 50 healthy neonates were selected as the control group.The levels of CD64 and CRP and the positive rates were compared among 3 groups and analyzed.The sensitivity,specificity,positive predictive value and negative predictive value of CD64 and CRP in the diagnosis of bacterial infection were analyzed.ResultsThe CD64 index and CRP levels had statistical difference between the bacterial infection with the viral infection group and normal control group (P<0.05)，the CD64 index and CRP levels after treatment in the bacterial infection group were significantly decreased,the differences were statistieally significant(P<0.05).The sensitivity,specificity,positive predictive value and negative predictive value of CD64 index in the diagnosis of bacterial infection were 91.7%,92.5%,93.0% and 91.2% respectively，which were significantly higher than those of CRP， the differences were statistically significant (P<0.05)。CD64 index was positively correlated with CRP (r=0.781，P<0.01).ConclusionThe combined detection of CD64 index and CRP level helps to early diagnosis,differential diagnosis and the therapeutic effect evaluation of bacterial infection in neonates， moreover the diagnostic efficiency of CD64 is obviously better than that of CRP.

Key words:CD64；C reactive protein；newborn；Bacterial infection