王靈紅，廣家權(quán)，王少磊，倪永培（安徽迎駕貢酒股份有限公司，安徽霍山237200）

品紅亞硫酸法測定甲醇顯色反應(yīng)溫度的確定

王靈紅，廣家權(quán)，王少磊，倪永培
（安徽迎駕貢酒股份有限公司，安徽霍山237200）

摘要：品紅亞硫酸法是國標(biāo)中測定白酒中甲醇的方法之一，但由于國標(biāo)并未對該法中顯色溫度作出具體規(guī)定，只要求在20℃以上，導(dǎo)致不同溫度條件下甲醇測試含量存在差異。通過對顯色反應(yīng)溫度20～35℃共16個溫度進行篩選比較，得到30℃最適合進行顯色反應(yīng)。該法標(biāo)準曲線線性關(guān)系、重復(fù)性、穩(wěn)定性和回收率都比較理想，并且簡單易行，結(jié)果可靠。

關(guān)鍵詞：測定方法； 品紅亞硫酸法； 甲醇； 溫度

作為世界知名的蒸餾酒，中國白酒源遠流長，它的質(zhì)量和消費者的生命健康密切相關(guān)［1-3］。GB 2757—2012《食品安全國家標(biāo)準蒸餾酒及其配制酒》對蒸餾酒及其配制酒中甲醇的定義、標(biāo)簽標(biāo)示以及技術(shù)指標(biāo)都進行了明確規(guī)定。甲醇是一種麻醉性較強的無色液體，它經(jīng)呼吸道和消化道吸收，也可部分被皮膚吸收，分布于腦脊髓、血、膽汁和尿中且含量較高。甲醇在體內(nèi)氧化和排泄均緩慢，有明顯的蓄積作用，對神經(jīng)系統(tǒng)有麻醉作用，可導(dǎo)致機體代謝障礙，引起視網(wǎng)膜細胞、視神經(jīng)損害及視神經(jīng)脫髓鞘等［4-6］。白酒中的甲醇主要由釀酒原料和輔料中的果膠分解產(chǎn)生，發(fā)酵過程中甲醇含量都較低，不會對人體產(chǎn)生危害，但當(dāng)以薯干、谷糠、野生植物等含果膠較多的原料代替谷物作為主要釀酒原料時，白酒中甲醇含量會升高［7］。GB/T 5009.48—2003《蒸餾酒與配制酒衛(wèi)生標(biāo)準的分析方法》規(guī)定了白酒中甲醇的測定方法，包括氣相色譜法和品紅亞硫酸法。品紅亞硫酸法具有操作簡單、省時等優(yōu)點，應(yīng)用廣泛，但由于其影響因素較多，導(dǎo)致標(biāo)準曲線、回收率和精密度不是很理想。品紅亞硫酸法中甲醇被氧化成甲醛后，在與品紅-亞硫酸溶液反應(yīng)形成醌類化合物的過程中，國標(biāo)只規(guī)定了“于20℃以上靜置0.5 h”，并未對“20℃以上”給出具體定值。本文通過把“20℃以上”這個模糊概念具體化，探討了不同反應(yīng)溫度對甲醇標(biāo)準曲線、回收率和精密度的影響，為采用品紅亞硫酸法測定白酒中甲醇提供實驗依據(jù)。

1　材料與方法

1.1材料

1.1.1樣品

迎駕貢酒系列。

1.1.2儀器設(shè)備

TU1901紫外可見分光光度計，數(shù)顯恒溫水浴鍋，酒精比重計，電子分析天平。

1.1.3試劑

甲醇純度標(biāo)準物質(zhì)（中國計量科學(xué)院）；高錳酸鉀，磷酸（85%），結(jié)晶水草酸（H2C2O4·2H2O），硫酸，堿性品紅，亞硫酸鈉，鹽酸，無水乙醇，硝酸銀，氫氧化鈉等均為分析純。

1.2實驗方法

根據(jù)試樣中乙醇濃度適當(dāng)取樣（乙醇濃度：30%vol，取1.0 mL；40%vol，取0.8 mL；50%vol，取0.6 mL；60%vol，取0.5 mL），置于25 mL具塞比色管中。

吸取0、0.10 mL、0.20 mL、0.40 mL、0.60 mL、0.80 mL、1.00 mL甲醇標(biāo)準使用液（相當(dāng)于0、0.05 mg、0.10 mg、0.20 mg、0.30 mg、0.40 mg、0.50 mg甲醇）分別置于25 mL具塞比色管中，并加入0.5 mL無甲醇的乙醇（60%vol）。

于試管及標(biāo)準管中各加水至5 mL，再依次各加2 mL高錳酸鉀-磷酸溶液，混勻，放置10 min，各加2 mL草酸-硫酸溶液，混勻使之褪色，再各加5 mL品紅-亞硫酸溶液，混勻，于20℃以上溫度下靜置0.5 h，于590 nm處測吸光度，繪制標(biāo)準曲線比較。方法檢出下限為0.02 g/100 mL。

2　結(jié)果與分析

2.1溫度篩選實驗

此實驗測定了20～35℃共16個溫度對甲醇標(biāo)準曲線和精密度的影響，所用樣品均為42%vol迎駕貢酒加標(biāo)樣，加入0.5 mg/mL甲醇標(biāo)準溶液0.6 mL。結(jié)果見表1。由表1可知，30℃時甲醇標(biāo)準曲線線性關(guān)系和標(biāo)準差都優(yōu)于其他溫度，表明30℃最適合進行顯色反應(yīng)。圖1 為30℃時用品紅亞硫酸法測定甲醇標(biāo)準溶液的線性回歸圖。

表1　不同溫度對品紅亞硫酸法測定結(jié)果的影響（x±s，n=3）

圖1　甲醇溶液標(biāo)準曲線

2.2不同酒精度對測定結(jié)果的影響

用30℃作為顯色反應(yīng)溫度，分別測定了38%vol、40%vol、42%vol、45%vol、50%vol和60%vol迎駕貢酒加標(biāo)樣，分別加入0.5 mg/mL甲醇標(biāo)準溶液0.6 mL，平行測定3次，數(shù)據(jù)見表2。由表2可知，用30℃作為顯色反應(yīng)溫度，適合不同酒度白酒中甲醇的測定，標(biāo)準曲線線性關(guān)系良好，精密度較高。

表2　不同酒精度對測定結(jié)果的影響（x±s，n=3）

2.3穩(wěn)定性實驗

取42%vol迎駕貢酒0.8 mL，分別加0.5 mg/mL甲醇標(biāo)準溶液0.6 mL和0.8 mL，按樣品測定方法，連續(xù)1 h內(nèi)每隔10 min測1次吸光度值，將測定結(jié)果帶入標(biāo)準曲線計算出所得甲醇質(zhì)量，檢測其穩(wěn)定性。結(jié)果顯示，在顯色30 min內(nèi)結(jié)果穩(wěn)定性較好，數(shù)據(jù)見表3。

表3穩(wěn)定性實驗結(jié)果（x±s，n=3）甲醇檢測值（mg）加入甲醇（mg）0.3000 0.4000 0（min）0.3240 0.4100 10 0.3220 0.4080 20 0.3190 0.4110 30 0.3160 0.4040 40 0.2700 0.3680 50 0.2570 0.3560 60 0.2530 0.3380甲醇檢測值（mg）前30 min 0.3200±0.0035 0.4080±0.0029 后30 min 0.2600±0.0093 0.3540±0.0150

甲醇標(biāo)準溶液0.4 mL、0.6 mL、0.8 mL，按樣品測定方法，分別測定吸光度值，計算回收率，結(jié)果見表5。

表5　回收率實驗結(jié)果（x±s，n=3）

3　結(jié)論

本研究基于國標(biāo)中測定白酒甲醇含量的品紅亞硫酸法中存在對顯色溫度沒有作出具體規(guī)定，而顯色溫度對于檢測的準確度存在影響的問題，通過線性擬合優(yōu)度、穩(wěn)定性、重復(fù)性和回收率等指標(biāo)，研究確定30℃是品紅亞硫酸法測定甲醇的適宜顯色溫度，提高了國標(biāo)品紅亞硫酸法測定白酒中甲醇的精確度，操作方法可靠。

參考文獻：

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優(yōu)先數(shù)字出版時間：2016-04-01；地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/52.1051.TS.20160401.1325.002.html。

中圖分類號：TS262.3；TS261.4；TS261.7

文獻標(biāo)識碼：A

文章編號：1001-9286（2016）07-0070-02

DOI：10.13746/j.njkj.2016037

收稿日期：2016-02-02

作者簡介：王靈紅（1987-），女，安徽黃山人，碩士研究生，主要從事食品檢測和白酒釀造技術(shù)研究工作。

Determination of Chromogenic Reaction Temperature for the Detection of Methanol by Sulfurous-Acid-Magenta Method

WANG Linghong，GUANG Jiaquan，WANG Shaolei and NI Yongpei
（Anhui Yingjia Gongjiu Co.Ltd.，Huoshan，Anhui 237200，China）

Abstract:Sulfurous acid-magenta method is one of the methods for the detection of methanol in liquor.However，there are no specific provisions for chromogenic reaction temperature in national standards（only 20℃above required），different temperature will result in certain difference in the detection methanol content.In this study，a screening test for chromogenic reaction temperature（16 temperature values selected）at 20℃to 35℃was carried out and temperature at 30℃was the best choice for chromogenic reaction.The standard curve linearity，reproducibility，stability and recovery of the method was ideal and simple，and the results were reliable.

Key words:detection method；sulfurous-acid-magenta method；methanol；temperature