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        MicroRNA、TIF1γ和乙肝病毒-DNA在乙肝相關(guān)肝細(xì)胞癌復(fù)發(fā)中的作用

        2016-08-02 01:37:08崔大偉
        中國老年學(xué)雜志 2016年12期

        臧 唯 崔大偉

        (吉林市中心醫(yī)院基本外科診治中心肝膽外科,吉林 吉林 132001)

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        MicroRNA、TIF1γ和乙肝病毒-DNA在乙肝相關(guān)肝細(xì)胞癌復(fù)發(fā)中的作用

        臧唯崔大偉

        (吉林市中心醫(yī)院基本外科診治中心肝膽外科,吉林吉林132001)

        〔摘要〕目的探討乙肝相關(guān)肝細(xì)胞癌(HCC)復(fù)發(fā)患者中MicroRNA、TIF1γ和乙肝病毒(HBV)-DNA的影響。方法采用 PCR 技術(shù)檢測HCC肝臟組織、血液樣本中MicroRNA、TIF1γ和HBV-DNA的表達(dá);72例均為復(fù)發(fā)HCC患者為實驗組(其中40例為復(fù)發(fā)不能夠接受手術(shù)組,32例為HCC復(fù)發(fā)行二次或多次手術(shù)治療),72例非復(fù)發(fā)HCC人群為對照組,觀察對比MicroRNA、TIF1γ和HBV-DNA的變化。結(jié)果實驗組肝臟組織、血液樣本中MicroRNA、TIF1γ呈低表達(dá),HBV-DNA水平明顯升高(P<0.01),對照組變化無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05),但與實驗組比較有明顯差異(P<0.05),實驗組術(shù)后下降明顯(P<0.05)。結(jié)論HCC患者中MicroRNA、TIF1γ的低表達(dá)和HBV-DNA陽性高表達(dá)是影響HCC復(fù)發(fā)的因素,并影響HCC患者的預(yù)后。

        〔關(guān)鍵詞〕乙肝相關(guān)肝細(xì)胞癌;MicroRNA;TIF1γ;HBV-DNA

        我國乙肝相關(guān)性肝癌(HCC)發(fā)生率較高。已知乙肝病毒(HBV)-DNA陽性在HCC復(fù)發(fā)中有重要的意義,MicroRNA、TIF1γ在腫瘤免疫中的作用功能雖然已有了許多的研究〔1〕,但三者的相互聯(lián)系在HCC中的表達(dá)和作用機(jī)制尚不明確。本研究旨在探討三者的關(guān)系及其對HCC復(fù)發(fā)的影響。

        1資料與方法

        1.1對象我院2010年1月至2015年12月收治的72例HCC患者為實驗組,男31例,女41例;平均年齡65.5歲。其中32例為HCC復(fù)發(fā)行二次或多次手術(shù)治療,40例為復(fù)發(fā)不能夠接受手術(shù)組。HBV-DNA陽性非HCC患者為對照組。

        1.2檢測項目及方法利用realtime PCR檢測肝臟組織細(xì)胞、血漿中MicroRNA的表達(dá)程度;HBV-DNA測定采用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR),操作步驟和結(jié)果判斷按試劑盒說明進(jìn)行,測定采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA);TIF1γ 利用PCR檢測(PCR產(chǎn)物連接入線性化表達(dá)載體,反應(yīng)條件為25℃ 30 min,42℃15 min。

        實驗儀器主要使用2720 thermal cycler PCR儀,ABI3730型positive clone測序儀,穩(wěn)壓DNA電泳儀,凝膠成像儀等;TIF1γ(16G9):轉(zhuǎn)錄中介因子TIF1γ抗體為上海創(chuàng)高,適應(yīng)物種為鼠和人。檢測MicroRNA組織血液中的表達(dá)、TIF1γ質(zhì)粒表達(dá)檢測和HBV-DNA水平陽性率,分析術(shù)前與術(shù)后的改變情況。全組均為影像學(xué)及手術(shù)病理已明確的HCC病例。

        1.3統(tǒng)計學(xué)處理利用SPSS16.0軟件進(jìn)行t檢驗。

        2結(jié)果

        2.1HCC患者復(fù)發(fā)非手術(shù)組與復(fù)發(fā)手術(shù)組的均衡性比較見表1。兩組MicroRNA、TIF1γ、HBV-DNA的變化及平均年齡無顯著差異(P>0.05)。對照組為非HCC不進(jìn)行比較。

        表1 復(fù)發(fā)非手術(shù)組、復(fù)發(fā)手術(shù)組的均衡性檢驗±s)

        2.2MicroRNA表達(dá)水平、TIF1γ質(zhì)粒表達(dá)檢測實驗組與對照組MicroRNA、TIF1γ低表達(dá)水平差異顯著(P<0.05)。復(fù)發(fā)非手術(shù)組與復(fù)發(fā)手術(shù)組相比,MicroRNA、TIF1γ高表達(dá)水平無顯著差異(P>0.05),MicroRNA、TIF1γ低表達(dá)水平差異顯著(P<0.05,P<0.001)。見表2。

        2.3HBV-DNA水平陽性率術(shù)前、術(shù)后不同時間對照組與復(fù)發(fā)手術(shù)組HBV-DNA陽性率比較差異顯著,且實驗組術(shù)后下降明顯(P<0.01),見表3。

        表2 MicroRNA、TIF1γ表達(dá)水平檢測檢測結(jié)果

        與復(fù)發(fā)手術(shù)組比較:1)P<0.05,2)P<0.001;與對照組相比:3)P<0.05

        表3 復(fù)發(fā)手術(shù)組與對照組手術(shù)前后陽性率比較(%)

        3討論

        MicroRNA、TIF1γ的異常水平表達(dá)是影響HCC復(fù)發(fā)的因素,有數(shù)據(jù)充分證明MicroRNA不但在其他直腸腫瘤中表達(dá)水平低〔2〕,而且在HCC中呈現(xiàn)低水平表達(dá),顯示MicroRNA可能是一種HCC的抑制因子。在HCC肝細(xì)胞中,轉(zhuǎn)化生長因子(TGF)-β1通路橋架的功能是繁瑣的,有實驗已證實TGF-β1通路在HCC中的激活是普遍的,且證明TIF1γ可調(diào)控TGF-p/Smad激活的通路功能〔3,4〕。實驗證明肝臟癌細(xì)胞通過低水平表達(dá)的TGF-β1來增強(qiáng)其對TGF-β1促癌效應(yīng)的敏感性從而使腫瘤復(fù)發(fā)侵襲〔5〕。而HBV-DNA在HCC復(fù)發(fā)中擔(dān)任主要角色,多項研究已證實,HBV- DNA陽性高表達(dá)與HCC的復(fù)發(fā)病死率相關(guān),且具有顯著的量效關(guān)系〔6,7〕,手術(shù)后HBV- DNA的高量效是影響術(shù)后HCC復(fù)發(fā)的主要因素。

        HCC復(fù)發(fā)時MicroRNA、TGF-β1的水平與機(jī)體免疫功能以及信號通路的功能機(jī)制尚未完全闡明,但通過免疫指標(biāo)的測定,已證實MicroRNA、TGF-β1存在于復(fù)發(fā)型HCC中〔8〕。MicroRNA、TGF-β1作為一種媒介參與了HCC的復(fù)發(fā)。

        本文結(jié)果顯示,MicroRNA、TIF1γ 低水平表達(dá) HBV-DNA的高度復(fù)制增加腫瘤對機(jī)體的復(fù)發(fā)侵犯率,嚴(yán)重影響HCC的預(yù)后。因此,對于HCC復(fù)發(fā)的患者,以上3種因子對評價HCC早期的診斷及治療具有重要的意義。

        4參考文獻(xiàn)

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        3Hsu YC,Chen MJ,Yu YM.Suppression of TGF-β1/SMAD pathway and extracellular matrix production in primary keloid fibroblasts by curcuminoids:its potential therapeutic use in the chemoprevention of keloid〔J〕.Arch Dermatol Res,2010;302(10):717-24.

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        〔2016-03-17修回〕

        (編輯曲莉/滕欣航)

        基金項目:吉林省衛(wèi)生計生委科研課題(2014Q002)

        〔中圖分類號〕R604

        〔文獻(xiàn)標(biāo)識碼〕A

        〔文章編號〕1005-9202(2016)12-2937-02;

        doi:10.3969/j.issn.1005-9202.2016.12.054

        第一作者:臧唯(1981-),男,主治醫(yī)師,主要從事肝膽外科腫瘤診治研究。

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