魏　清　李光華　金愛花　宋英蘭　崔松彪　尤　昕

(延邊大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，吉林　延吉　133000)

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升高的血清Nexilin是缺血性腦卒中的獨(dú)立危險因素

魏清1李光華金愛花宋英蘭崔松彪2尤昕

(延邊大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，吉林延吉133000)

〔摘要〕目的探討缺血性腦卒中患者檢測血清Nexilin水平的臨床價值。方法連續(xù)收集急性缺血性腦卒中患者185例〔男120例，女65例，平均年齡(64.6±9.3)歲〕，對照組215例〔男120例，女95例，平均年齡(64.7±9.0)歲〕。采用ELISA方法檢測血清Nexilin含量。結(jié)果與對照組比較，急性缺血性腦卒中患者血清Nexilin含量明顯升高〔0.81(0.51～1.33)ng/ml vs.0.15(0.11～0.26)ng/ml,P<0.001〕，以Nexilin≥0.80 ng/ml(對照組95百分位數(shù))作為升高標(biāo)準(zhǔn)，缺血性腦卒中患者高血清Nexilin比率明顯高于對照組(50.81% vs.5.58%，P<0.001)。多因素回歸分析顯示升高的血清Nexilin水平是缺血性腦卒中的獨(dú)立危險因素。結(jié)論急性缺血性腦卒中患者血清Nexilin水平明顯升高，升高的血清Nexilin是缺血性腦卒中的獨(dú)立危險因素。

〔關(guān)鍵詞〕Nexilin；缺血性腦卒中

顱外、顱內(nèi)血栓形成或栓塞是引起缺血性腦卒中的主要原因〔1〕。腦卒中診斷依賴醫(yī)師的臨床檢查和各種影像學(xué)技術(shù)作為補(bǔ)充。有一些潛在的生物學(xué)標(biāo)志物有望應(yīng)用于缺血性腦卒中診斷、病情監(jiān)測、預(yù)后評估、風(fēng)險預(yù)測，如N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受體的抗體、S-100B蛋白、基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)9、脂蛋白相關(guān)磷酸酶A2(Lp-PLA2)等〔2～5〕。然而，由于應(yīng)用生物學(xué)標(biāo)志物鑒別腦卒中缺乏足夠的靈敏度和特異性，目前還沒有一個生物學(xué)標(biāo)志物應(yīng)用于臨床實(shí)踐。

Nexilin(NEXN)具有肌動蛋白結(jié)合特性。大鼠穿通性彈道樣腦外傷(PBBI)后，腦組織Nexilin在6、24 h上調(diào)，48、72 h下調(diào)〔6〕，提示Nexilin可能是一個腦損傷潛在的血液標(biāo)志物。本研究初步探討血清Nexilin含量與缺血性腦卒中的相關(guān)性。

1對象與方法

1.1對象2012年6月至2013年5月來延邊大學(xué)附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院的急性缺血性腦卒中患者共185例，男120例，女65例，平均年齡(64.6±9.3)歲，所有患者均符合全國第四屆腦血管病學(xué)術(shù)會議制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)，經(jīng)頭部CT或MRI證實(shí)。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)均為首次發(fā)??；(2)病程12～72 h。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)出血性腦卒中；(2)短暫性腦缺血發(fā)作(TIA)；(3) 心臟疾?。?4)有嚴(yán)重感染和癲癇者。所有入選者均記錄是否存在高血壓、糖尿病、吸煙史和腦卒中家族史等腦血管病的危險因素。根據(jù)急性卒中治療低分子肝素試驗(yàn)(TOAST)亞型分類標(biāo)準(zhǔn)，將缺血性腦卒中分為大動脈粥樣硬化性卒中(LAA)、心源性腦栓塞(CE)、小動脈閉塞性卒中(SAO)、其他原因所致的缺血性卒中(SOE)、原因不明的缺血性卒中(SUE)〔7〕。腦卒中的嚴(yán)重程度采用美國國立衛(wèi)生研究院卒中量表(NIHSS)進(jìn)行評分〔8〕。對照組隨機(jī)選取相同時期來延邊大學(xué)附屬醫(yī)院體檢的個體，經(jīng)詢問病史、心電圖、實(shí)驗(yàn)室檢查等排除血栓、TIA、心臟疾病，共215例，男120例，女95例，平均年齡(64.7±9.0)歲。本研究經(jīng)延邊大學(xué)附屬醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)，研究對象均簽署知情同意書。

1.2樣本采集與處理健康受試者早晨空腹采集外周靜脈血3 ml，加入速凝管內(nèi)，室溫放置不超過2 h，以1 000 r/min離心20 min，取血清-20℃保存，用于血清Nexilin含量檢測。

1.3實(shí)驗(yàn)方法血清Nexilin檢測采用雙抗體夾心法ELISA商品試劑盒(Uscn Life Science Inc)，試劑檢測范圍0.156～10 ng/ml，最低檢測限為0.053 ng/ml，批內(nèi)精密度<10%，批間精密度<12%。實(shí)驗(yàn)前將待測標(biāo)本和所有試劑緩慢均衡至室溫，嚴(yán)格按說明書的操作步驟完成實(shí)驗(yàn)。血清總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、甘油三酯(TG)、空腹血糖(FBG)、尿酸(UA)、肌酐(Cr)等采用Roche PPI自動檢測系統(tǒng)按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程檢測。

2結(jié)果

2.1兩組臨床特征比較缺血性腦卒中患者血清Nexilin含量較對照組明顯升高(P<0.001)，以Nexilin≥0.80 ng/ml(對照組95百分位數(shù))作為升高標(biāo)準(zhǔn)，缺血性腦卒中患者高血清Nexilin比例〔94例(50.81%)〕同樣明顯高于對照組〔12例(5.58%)〕(P<0.001)；腦卒中組高血壓、糖尿病、吸煙史、腦卒中家族史比率明顯高于對照組(P<0.05)。見表1。

表1　研究對象的臨床和生化指標(biāo)比較±s)

2.2年齡和性別對卒中患者血清Nexilin的影響腦卒中患者和對照組血清Nexilin含量均與年齡不相關(guān)(缺血性腦卒中患者：r=0.118，P=0.109；對照組：r=0.010，P=0.887)。

缺血性腦卒中患者男性與女性血清Nexilin含量無明顯差異(P=0.062)，但對照組男性血清Nexilin含量明顯高于女性(P<0.001)，見表2。

2.3多因素回歸分析選取單因素分析有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的參數(shù)進(jìn)行多因素Logistic回歸分析，結(jié)果顯示高血清Nexilin比例、高血壓和糖尿病是缺血性腦卒中的獨(dú)立危險因素。見表3。

與對照組女性比較:1)P<0.001

表3　缺血性腦卒中多因素回歸分析結(jié)果

3討論

Nexilin cDNA全長為3 405 bp，染色體定位1p31.1，編碼一個675個氨基酸的蛋白質(zhì)。大鼠的Nexilin有兩個剪切變異體，為b-Nexilin和s-Nexilin，其中b-Nexilin是從大鼠腦組織中純化得到的一個新的肌動蛋白結(jié)合蛋白，主要在大鼠腦和睪丸表達(dá)〔6〕。研究表明Nexilin突變可破壞心臟的Z-線和引發(fā)擴(kuò)張型心肌病〔9〕，Nexilin突變和肥厚性心肌病相關(guān)〔10〕。Nexilin參與肝細(xì)胞生長因子(HGF)和胰島素信號調(diào)節(jié)〔11〕，通過結(jié)合并調(diào)節(jié)IRS1信號影響骨骼肌細(xì)胞的葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)。

本研究結(jié)果表明缺血性腦卒中患者血清Nexilin含量升高，高血清Nexilin比例是缺血性腦卒中的獨(dú)立危險因素，為缺血性腦卒中的預(yù)防和診治研究提供了一個新的潛在標(biāo)志物。

血清Nexilin含量是一個受年齡和性別影響的指標(biāo)〔12〕。本研究腦卒中患者和對照組血清Nexilin含量均與年齡不相關(guān)。但對照組男性血清Nexilin含量明顯高于女性，提示性別可能對血清Nexilin含量有一定影響。

綜上所述，本研究提示Nexilin是一個潛在的缺血性腦卒中風(fēng)險預(yù)測的標(biāo)志物。

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〔2015-12-03修回〕

(編輯袁左鳴)

基金項(xiàng)目：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.81260263)

通訊作者：尤昕(1969-)，男，主任技師，博士，碩士生導(dǎo)師，主要從事臨床生物化學(xué)與分子生物學(xué)研究。

〔中圖分類號〕R743

〔文獻(xiàn)標(biāo)識碼〕A

〔文章編號〕1005-9202(2016)12-2904-03；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.12.036

High serum Nexilin level is an independent risk factor for ischemic stroke

WEI Qing,LI Guang-Hua,JIN Ai-Hua,et al.

Department of Laboratory Medicine,the Affiliated Hospital of Yanbian University,Yanji 133000,Jilin,China

【Abstract】Objective To detect serum Nexilin concentrations and to explore the potential clinical value in patients with ischemic stroke.MethodsA total of 185 patients with acute ischemic stroke and 215 control subjects were involved.Serum Nexilin concentration was detected by enzyme-linked immunosorbent assay.ResultsCompared with controls,ischemic stroke patients had significantly higher nexilin concentration 〔0.81 (0.51～1.33)ng/ml vs.0.15 (0.11～0.26)ng/ml,P<0.001〕.When Nexilin 0.80 ng/ml (95% of controls) was defined as elevation,the percentage of subjects with elevated Nexilin level was significantly higher in ischemic stroke group compared to that in control group (50.81% vs.5.58%,P<0.001).High serum level of Nexilin was an independent risk factor for ischemic stroke.ConclusionsIschemic stroke patients have significantly elevated serum Nexilin levels,and serum Nexilin is a potential useful biomarker for ischemic stroke.

【Key words】Nexilin;Ischemic stroke

1吉林大學(xué)口腔醫(yī)院檢驗(yàn)科2延邊大學(xué)附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科

第一作者：魏清(1970-)，女，副主任技師，碩士，主要從事臨床生物化學(xué)與分子生物學(xué)研究。