耿亞 馬月香

摘要：冠心?。╟oronary artery heart disease，CHD）是心血管疾病常見病種。CHD動物模型是現(xiàn)代醫(yī)學研究疾病發(fā)展轉(zhuǎn)歸及評價藥物作用療效必不可少的工具，而針對于中醫(yī)證候的動物模型是在中醫(yī)基本思想的指導下在動物身上模擬出人類疾病的某些特征，制備出與人類疾病癥狀和病理變化相似或相同的動物模型。目前，建立CHD中醫(yī)證候動物模型的方法多種多樣，本文從痰瘀互結、心脾陽虛、寒凝血瘀、痰濁血瘀、心氣虛、氣虛血瘀方面綜述了這幾類模型的研究進展，以期為冠心病的研究提供參考。

關鍵詞：冠心?。恢嗅t(yī)證候；動物模型；綜述

DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2016.08.035

中圖分類號：R259.414 文獻標識碼：A 文章編號：1005-5304（2016）08-0129-04

冠心?。╟oronary artery heart disease，CHD）是指冠狀動脈粥樣硬化使管腔狹窄或阻塞，或/和冠狀動脈痙攣導致心肌缺血缺氧而引起的心臟病，又稱缺血性心臟病（IHD）。根據(jù)CHD臨床致病特點，可歸屬中醫(yī)學“胸痹”“真心痛”等范疇。在CHD研究中，動物模型的建立是主要研究方法之一，近年許多研究者在冠心病中醫(yī)證候動物模型研究中取得一定成效，但也存在諸多與中醫(yī)基本思想不協(xié)調(diào)的問題。筆者通過檢索中國知識資源總庫2005-2015年文獻，對有關CHD中醫(yī)證候動物模型文獻做一梳理，現(xiàn)總結如下。

1 痰瘀互結證小型豬模型

林氏等[1]以高脂飼料（每100 kg飼料含膽固醇2 kg，膽鹽0.5 kg，豬油10 kg）每日每只900 g喂養(yǎng)

小型豬2周，并以介入法對冠狀動脈血管內(nèi)皮進行損傷，術后繼續(xù)以高脂飼料每日每只900 g喂養(yǎng)8周。觀察測量并分別記錄小型豬高脂2、6、10周的體質(zhì)指數(shù)、舌象、心電圖，以及無創(chuàng)血流動力學參數(shù)，包括心輸出量、每搏輸出量、外周血管阻力、左心做功。

在實驗動物中，因小型豬的生理解剖、血脂指標和人類非常相近[2]。生理生化方面，豬的血液學、血流動力學、血液生化指標方面已被證實與人類相似，而且品種純正、體質(zhì)量較小、生長緩慢，近年來，在中醫(yī)證候動物模型研究中應用越來越突出[3-4]。有學者以《中藥新藥治療冠心病心絞痛的臨床研究指導原則》為參照，對小型豬冠心病模型痰瘀互結證候進行診斷與評分，制定了CHD痰瘀互結證小型豬模型的評分標準，對主癥、兼癥、舌象、脈象進行評分，根據(jù)評分標準判斷CHD痰瘀互結證小型豬模型是否建立[1，5]。

動物實驗意在模擬中醫(yī)過食肥甘厚味而引起脾運失健，痰濕壅盛，進而導致血脈痹阻的痰瘀互結的中醫(yī)證候，以高脂飲食和冠狀動脈血管內(nèi)皮損傷術復制出CHD痰瘀互結證動物模型。

2 心脾陽虛證大鼠模型

韋氏等[6]先適應性飼養(yǎng)大鼠1周，然后對大鼠施行肩胛骨間棕色脂肪組織（brown adipose tissue，BAT）切除，術后在19 ℃環(huán)境下以高脂飼料（83%基本飼料，15%三酰甘油，2%膽固醇）飼養(yǎng)21 d，第22日皮下多點注射垂體后葉素（10 U/kg），第29日對大鼠施以中藥。觀察測量并分別記錄大鼠行為（活動度、攝食行為、毛發(fā)改變、體質(zhì)量變化等）、肛溫、體溫、心電圖、心肌單相動作電位，以及心率、動作電位時程、動作電位0相幅值、動作電位50%復極化時程、90%復極化時程。因心脾陽虛包括陽虛癥狀（畏寒喜溫、形寒肢冷等）和脾虛癥狀（消瘦、乏力、納少、便溏及腹瀉、脘腹脹痛等）兩大癥狀群，可在實驗中根據(jù)大鼠模型組行為、心電圖、心臟指數(shù)、肛溫，以及體質(zhì)量與對照組比較，對差異指標進行數(shù)理統(tǒng)計學分析[6]，依差異是否有統(tǒng)計學意義，評價CHD心脾陽虛證動物模型是否建立。在CHD中醫(yī)證候中，單純心陽虛證在臨床上較少見，多為混合陽虛證，如心脾陽虛等[7]。中醫(yī)認為，心脾陽虛多因飲食不節(jié)、寒邪傷陽等，致脾胃運化失健，遂聚濕生痰，上犯心胸，阻遏心陽。本實驗通過BAT切除術、注射垂體后葉素、高脂飲食、寒冷刺激的方式，模擬“飲食不節(jié)，寒邪傷陽”，使CHD心脾陽虛大鼠動物模型在病因病機上更加符合心脾陽虛證型。

3 寒凝血瘀證大鼠模型

王氏等[8]先用20%烏拉坦5 mL/kg對大鼠腹腔注射進行麻醉，并將大鼠仰臥固定于鼠臺，連接生理記錄儀并記錄大鼠標準Ⅱ?qū)?lián)心電圖，然后經(jīng)口對大鼠氣管插管，連接動物呼吸機，解剖并分離出股靜脈進行靜脈置管，5 s恒速注射注入垂體后葉素（6 U/kg，濃度為2 U/mL），造模30 min后進行各項指標觀測。觀察測量并分別記錄大鼠體溫、體征（唇周、爪子、耳朵、尾巴的顏色，大便形態(tài)）、心電圖、微靜脈管徑、紅細胞流速、6-酮-前列腺素F1α、血漿血栓素B2。將模型組與正常組檢測指標比較，根據(jù)差異是否具有統(tǒng)計學意義判斷CHD寒凝血瘀證大鼠模型是否建立。

中醫(yī)認為，寒主收引，可抑遏陽氣，使血行瘀滯?！端貑枴ふ{(diào)經(jīng)論篇》曰：“厥氣上逆，寒氣積于胸中而不瀉，不瀉則溫氣去，寒獨留，則血凝泣，凝則脈不通?！毖芯勘砻?，造模大劑量注射垂體后葉素具有寒邪致病特點，提示大鼠因寒邪內(nèi)侵而復制出的動物模型為寒凝血瘀動物模型[9]。

4 痰濁血瘀證兔模型

張氏等[10]首先對雄性家兔以高脂飼料（膽固醇1%、蛋黃粉15%、豬油15%、基礎飼料79%）飼養(yǎng)35 d，第36日采取冠狀動脈結扎術，以30 mg/kg戊巴比妥腹腔注射，剪毛，常規(guī)消毒，開胸，對冠狀動脈左前降支完全結扎，心電圖監(jiān)測。觀察測量并分別記錄實驗前后全血黏度高切變率、全血黏度低切變率、血漿黏度、纖維蛋白原、血清白細胞介素-6。將模型組與正常組檢測指標比較，根據(jù)差異是否具有統(tǒng)計學意義判斷CHD痰濁血瘀證兔模型是否建立。中醫(yī)認為，過食肥甘厚味可使脾運失健，津液不布，遂聚為痰，痰上擾心胸，致心脈痹阻。本實驗中對家兔冠狀動脈左前降支完全結扎及高脂喂養(yǎng)，旨在模擬痰阻心胸，血行失暢，脈絡不利，心脈痹阻，以復制出痰濁血瘀證動物模型。

5 心氣虛證大鼠模型

唐氏等[11]使用近交系Wistar大鼠采取游泳法建模，大鼠靜息狀態(tài)下喂養(yǎng)精飼料5 g/100 g，在水溫25～28 ℃條件下以強迫負重（大鼠自身質(zhì)量5%）方式游泳至力竭（頭沒入水下10 s不上?。?，進行2次，前后間隔10 min，第18日起在游泳基礎上連續(xù)4 d灌服心得安溶液2.4 mg/100 g。觀察測量并分別記錄實驗前后大鼠行為狀態(tài)、精神狀態(tài)、體征、左心室動力學指標、心臟功能。將模型組與正常組檢測指標比較，根據(jù)數(shù)據(jù)差異是否具有統(tǒng)計學意義，判斷CHD心氣虛證大鼠模型是否建立。

心氣虛證是心血管病系統(tǒng)中尤為常見的證型[12]，而且在動物模型的構建中很難建立無兼證的心氣虛證模型[13]?！端貑枴ご讨菊撈酚小肮仁馐?，谷虛氣虛”。 “氣為血之帥，血為氣之母”，“氣能行血”，血的正常運行有賴于氣的推動及谷氣的充盈，而心臟的正常搏動在于氣血的正常運行。本實驗在飲食方面只給予大鼠每日基礎需要量，并增加其消耗量，意在模擬“谷虛氣虛”“勞則氣虛”；心得安溶液具有抑制心肌細胞鈣離子和鈉離子內(nèi)流的作用，也是非選擇性β受體阻斷劑，大劑量或長期使用可引起心肌缺氧等，實驗中在大鼠力竭運動后灌服心得安溶液，加重心氣耗損，以復制出CHD心氣虛證動物模型。

6 氣虛血瘀證小型豬模型

在CHD中醫(yī)證候中，氣虛和血瘀證候最為常見[14-16]。該模型首先對小型豬進行麻醉，無菌條件下肋間開胸，于左回旋支冠狀動脈放置Ameroid收縮環(huán)，縫合，建立慢性心肌缺血模型[17]。郭氏等[18]在此基礎上觀察并采集術前正常狀態(tài)及術后4周的四診信息、心電圖、冠狀動脈造影、頸部前腔靜脈血5 mL、超聲心動圖，并以此評價小型豬血瘀證模型的建立情況。經(jīng)過觀察，該模型4～8周由血瘀證向氣虛血瘀證證型轉(zhuǎn)變，在8～12周該模型表現(xiàn)為氣虛血瘀證[18-19]。

首先建立慢性心肌缺血小型豬模型，在造模第4周對小型豬進行冠狀動脈造影、毒理學、微球流量、病理組織學、磁共振掃描檢查，以檢查結果評價是否建立心肌缺血模型[17]；然后參照血瘀證診斷標準[20]進行診斷，通過對比模型組與正常組的四診信息、冠狀動脈造影、心電圖、血液流變學等指標進行評價[18]，通過數(shù)理統(tǒng)計分析差異是否具有統(tǒng)計學意義，判斷血瘀證模型是否建立；8～12周詳細記錄小型豬動態(tài)，采集詳細四診信息，借助心臟超聲、冠狀動脈造影，根據(jù)血瘀證診斷標準[20]、中醫(yī)虛證辨證參考標準[21]及中獸醫(yī)臨床診斷經(jīng)驗[22]進行評價，根據(jù)統(tǒng)計分析差異是否具有統(tǒng)計學意義判斷CHD氣虛血瘀證小型豬模型是否建立。

《難經(jīng)·二十二難》曰：“氣主煦之，血主濡之?！敝嗅t(yī)學有“氣為血之帥，血為氣之母”與“因?qū)嵵绿摗钡睦碚摚瑲饽苌?、行血、攝血，血能養(yǎng)氣、載氣。本實驗首先采用結扎左回旋支冠狀動脈復制出血瘀證型，然后因脈絡瘀阻，血行凝滯，瘀血不去，新血不生，留瘀日久，遂心氣痹阻，以致心氣虛損，意在中醫(yī)因?qū)嵵绿摾碚撝笇聫椭瞥鯟HD氣虛血瘀證動物模型。此模型雖造模時間較長，但基本符合中醫(yī)理論中病的發(fā)展傳變規(guī)律，對臨床實驗研究具有指導意義。

7 小結與展望

《難經(jīng)·六十難》說：“心之病，有厥痛，有真痛，何謂也……其五臟氣相干，名厥心痛……其痛甚，但在心，手足青者，即名真心痛?！薄督饏T要略·胸痹心痛短氣病脈證治》：“胸痹，心中痞氣，氣結在胸，胸滿，脅下逆搶心?！逼渲饕C為心脈痹阻，臨床主要表現(xiàn)為本虛標實，本虛責之氣虛、氣陰兩虛及陽氣虛，標實責之寒凝、氣滯、痰濁、血瘀，且可相兼為病。CHD中醫(yī)證候表現(xiàn)很多，在研究過程中需要根據(jù)不同要求建立不同的動物模型。

目前較為提倡病證結合動物模型，一般先建立疾病模型，再根據(jù)所需的中醫(yī)證候施予干預因素，以獲得病證結合模型[23]。而在中醫(yī)臨床診療中，“證”隨“病”的發(fā)展轉(zhuǎn)歸不斷變化，很難確定所建立的模型是否為所需要的動物模型。由于“證”是中醫(yī)特色，與“病”緊密聯(lián)系，因此，在建立中醫(yī)證候動物模型過程中應同時考慮病證結合，使動物模型更加符合臨床實際。這樣才更符合臨床需要，實驗的準確性和穩(wěn)定性也才能得到保障。

目前CHD中醫(yī)證候動物模型建立尚存在一些問題：①動物與人及動物間的生理機能方面均存在差異，且性別不同、品系不同的實驗動物對造模刺激因素的反應不同，相同的處理手段對不同種類、不同年齡的動物產(chǎn)生的生理影響也不盡相同。因此，在造模的動物選擇上，應更注重選擇與人體病理生理特點相近的動物，以增加實驗在臨床應用上的可靠性。②在中醫(yī)證候動物的模型建立評價中，缺少符合中醫(yī)特色的評價體系，應建立規(guī)范的冠心病中醫(yī)證候動物模型的評價體系，使CHD中醫(yī)證候動物模型的建立更加統(tǒng)一化、規(guī)范化、合理化、穩(wěn)定化。③人和動物之間必然存在著差異，動物模型只是在一定程度上對人的病理現(xiàn)象進行模擬，不能完全對等，具體的CHD中醫(yī)證候動物模型與臨床實踐存在一定差距，今后應當對CHD中醫(yī)證候動物模型做進一步深入研究，使CHD中醫(yī)證候動物模型更符合中醫(yī)病因病機要求，接近人體生理病理特點，符合臨床需要，為臨床應用打好基礎。

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