潘翔　全晶　金露　桂耀庭　楊尚琪　毛向明　來永慶

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·實驗研究·

miR-195-3p在腎癌中的表達及其臨床意義研究

潘翔全晶金露桂耀庭楊尚琪毛向明來永慶

230032 合肥，安徽醫(yī)科大學(潘翔、全晶、金露)；北京大學深圳醫(yī)院男性生殖實驗室(桂耀庭)；北京大學深圳醫(yī)院泌尿外科(楊尚琪、毛向明、來永慶)

【摘要】目的研究miR-195-3p在腎癌與癌旁組織及腎癌細胞與正常細胞系中的表達差異，分析差異表達與患者臨床病理特征間的關(guān)系，探究其臨床意義。 方法提取27例配對標本(組織及細胞系)的總RNA，經(jīng)過逆轉(zhuǎn)錄、實時熒光定量PCR(qRT-PCR)檢測標本中miR-195-3p標本中的表達量，統(tǒng)計分析miR-195-3p在不同組織、細胞系間的表達差異及其與臨床病理特征間的相關(guān)性。通過轉(zhuǎn)染上調(diào)和下調(diào)miR-195-3p，并進行細胞增殖實驗(MTT)，評估m(xù)iR-195-3p對腎癌細胞增殖的影響。結(jié)果miR-195-3p在腎癌組織(18例，66.67%)及腎癌細胞系中的表達較癌旁組織及正常細胞系明顯上調(diào)(P<0.05)，miR-195-3p在腎癌中的表達量與患者的年齡、性別、癌組織類型、TNM分期、AJCC分期無明顯相關(guān)性(P>0.05)。miR-195-3p在腎癌細胞系(ACHN、786-O)表達上調(diào)后促進腎癌細胞增殖，表達下調(diào)后抑制腎癌細胞增殖。結(jié)論miR-195-3p在腎癌組織中明顯升高，并且促進腎癌細胞增殖，提示其可能與腎癌的發(fā)生發(fā)展有一定關(guān)系。

【關(guān)鍵詞】腎癌；miR-195-3p

腎細胞癌(renal cell carcinoma,RCC)是腎臟惡性腫瘤中最為常見的一種，世界范圍內(nèi)，RCC是排名第14位的常見惡性腫瘤，其在北美和歐洲的發(fā)病率和死亡率遠高于發(fā)展中國家，且發(fā)展中國家的發(fā)病率仍在不斷上升[1-2]。研究發(fā)現(xiàn)早期RCC的5年存活率顯著高于晚期，因此早期發(fā)現(xiàn)、早期治療對腎癌的治療有著至關(guān)重要的作用[3]。但是，目前腎癌的發(fā)生、發(fā)展機制尚不明確，臨床也未曾應用一些生物標志物對腎癌進行診斷、治療或評估其預后，腎癌的早期發(fā)現(xiàn)十分困難。因此，以腎癌的發(fā)生機制為基礎去尋找可用于腎癌早期診斷或者靶向治療或判斷其預后的生物標志物是有必要的[4]。

miRNA是一種短鏈非編碼RNA，只有大約22個核苷酸。miRNA能夠非特異性地結(jié)合mRNA上的靶基因, 通過降解或抑制其轉(zhuǎn)錄來調(diào)控基因的表達[5]。miRNA在多種生物進程的轉(zhuǎn)錄后調(diào)控中起著至關(guān)重要的作用[6]。它不但在腫瘤的發(fā)生發(fā)展和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮作用，而且在腫瘤的治療上也起著十分重要的作用，miRNA或?qū)⒊蔀橐环N治療腫瘤的潛在的藥物[7]。研究表明，miR-195在某些類型的腫瘤中起抑制作用，在癌細胞過度表達之后，miR-195 能夠抑制細胞周期進程和腫瘤細胞的入侵[8-9]。miR-195有兩個成熟序列，分別是miR-195-5p和miR-195-3p。miR-195-3p位于17號染色體p13.1，且與其他miRNA(如miR-497)形成集群組成miR-15家族[10]。在前期測序的基礎上，本研究對腎癌及其癌旁組織中有表達差異的miR-195-3p進行了qRT-PCR驗證比較，分析miR-195-3p的表達量與患者臨床病理特征間的關(guān)系，以期為miR-195-3p在腎癌發(fā)生發(fā)展中的作用機制以及對腎癌的診斷價值等后續(xù)臨床研究奠定良好的基礎。

材料與方法

一、組織標本

采集27例RCC和配對癌旁正常組織(取自可見RCC 病灶外約2.0 cm 處)標本，RCC組織均由北京大學深圳醫(yī)院病理科確診，癌旁正常組織均由該病理科經(jīng)顯微鏡確認不含腎癌組織。本研究經(jīng)北京大學深圳醫(yī)院倫理委員會審查并批準，參與研究的患者均已簽署知情同意書。臨床分期采用2009年國際抗癌組織(UICC)/美國癌癥聯(lián)合會(AJCC)臨床分期標準，組織學分類采用WHO 2004年RCC病理分類標準。研究中所有標本供者均具有完整的臨床病理資料。見表1。

表1　miR-195-3p表達水平與臨床病理特征間的關(guān)系

二、細胞培養(yǎng)

人胚腎細胞系：HEK-293T。人腎癌組織細胞系：ACHN、786-O、769P。細胞于含有DMEM(含10%胎牛血清、1%抗生素、1%谷氨酰胺)的培養(yǎng)液中，37 ℃、5% CO2恒溫箱中培養(yǎng)。

三、總RNA 的提取

Trizol試劑提取液氮下碾磨后標本中的總RNA，測定總RNA 濃度(使用NanoDrop2000c紫外分光光度計，Thermo Scientific，USA)。

四、總RNA 反轉(zhuǎn)錄為cDNA

在反應體系中加入1 μg 總RNA，在普通PCR 儀(BIO-RAD，USA)上進行逆轉(zhuǎn)錄。使用microRNA專用反轉(zhuǎn)錄試劑盒miScript Reverse Transcription Kit (Qiagen，Germany)，反應條件：37 ℃ 60 min，95 ℃ 5 min。

五、qRT-PCR 檢測miR-195-3p的表達量

miR-195-3p上游引物為：5’-CCAATATTGGCTGTGCTGCTCC-3’，下游引物為Qiagen 公司提供的通用引物。內(nèi)參基因采用U6 snRNA，其上游引物為:5’-CTCGCTTCGGCAGCACA-3’，下游引物為：5’-ACGCTTCACGAATTTGCGT-3’。反應體系:模板cDNA l μl，miR-195上游引物1 μl, 10*miScript通用引物2 μl, 2*Quanti TectS YBR Green PCR Master Mix 10 μl，加無酶水至總反應體積20 μl。使用儀器：LC480 熒光定量PCR 儀(Applied Biosystems，USA)。反應條件：95 ℃ 15 min，94 ℃ 15 s，55 ℃ 30 s，70 ℃ 30 s，共計40個循環(huán)。

六、細胞轉(zhuǎn)染

使用lip2000對miR-195-3p的mimic，inhibitor進行轉(zhuǎn)染，對照為mimic NC(negative control)和inhibitor NC。miR-195-3p mimic正義鏈：5’-CCAAUAUUGGCUGUGCUGCUCC-3’，反義鏈：5’-AGCAGCACAGCCAAUAUUGGUU-3’。Mimic NC 正義鏈：5’-UUCUCCGAACGUGUCACGUTT-3’，反義鏈：5’-ACGUGACACGUUCGGAGAATT-3’。miR-195-3p inhibitor 序列：5’-GGAGCAGCACAGCCAAUAUUGG-3’。Inhibitor NC序列：5’-CAGUACUUUUGUGUAGUACAA-3’。

七、細胞增殖實驗(MTT)

使用MTT檢測細胞增殖水平，鋪96孔板中，使每孔細胞大約為3 000個，約24 h后進行轉(zhuǎn)染，在0、24、48、72 h加入20 μl MTT在37 ℃溫箱孵育4 h 后，換成150 μl DMSO, 在酶標儀(Bio-Rad, Hercules, CA, USA)上檢測OD值。

八、統(tǒng)計學方法

腎癌及其癌旁組織中miR-195-3p表達水平采用配對t檢驗進行比較，miR-195-3p表達水平與患者臨床病理特征的關(guān)系采用χ2檢驗或Fisher確切概率分析，取P<0.05為具有統(tǒng)計學意義。統(tǒng)計軟件為SPSS 23.0。標準化處理將U6作為內(nèi)參，在qRT-PCR中所得數(shù)據(jù)使用ΔΔCT 法進行分析：ΔCT= CT正常/癌組織-CTU6，ΔΔCT=ΔCT癌組織-ΔCT正常。通過計算2-ΔΔCT得到癌組織中miR-195-3p相對于其配對的癌旁組織中表達量的倍數(shù)。計算OD值，分析經(jīng)過轉(zhuǎn)染后腎癌細胞增殖水平變化。

結(jié)果

一、miR-195-3p在腎癌及其癌旁組織的表達量

通過2-ΔΔCT計算miR-195-3p在腎癌組織中相對癌旁組織的表達倍數(shù)并作圖，發(fā)現(xiàn) miR-195-3p在腎癌組織中的表達量明顯高于其癌旁組織(P<0.05)。見圖1。計算2-ΔΔCT可得到miR-195-3p在腎癌組織中相對其癌旁組織中表達量的倍數(shù)的平均值±標準誤，其大小為4.344±0.482，最小值為0.002 5，最大值為556.4。miR-195-3p在腎癌及其相應的癌旁組織中的相對表達量比值經(jīng)過對數(shù)轉(zhuǎn)換后，表達上調(diào)的例數(shù)為18例(66.67%)，表達下調(diào)的為9例(33.33%)。見圖2。

二、miR-195-3p表達水平與臨床病理特征的相關(guān)性

以腎癌組織中miR-195-3p的相對表達量的平均值4.344為界，經(jīng)四格表χ2檢驗分析，將所研究的病例分為高表達組、低表達組，其中低表達15例，高表達12例。結(jié)果發(fā)現(xiàn)腎癌組織中miR-195-3p表達水平與患者年齡、腎癌組織類型、性別、AJCC 臨床分期、TNM 分期無明顯相關(guān)性(P>0.05)。見表1。

三、miR-195-3p在不同腎癌細胞系與正常細胞系中的表達水平

miR-195-3p在腎癌細胞系相對于正常細胞系的表達量為：ACHN 3.24±0.94；786-O 32.33±10.71；769P 3.88±0.57；293T 1.00±0.13。miR-195-3p在腎癌細胞系中的表達明顯高于正常細胞系，以786-O細胞系最為顯著。見圖3。

四、轉(zhuǎn)染效率驗證

經(jīng)qRT-PCR驗證，轉(zhuǎn)染miR-195-3p mimic后 miR-195-3p的表達水平在ACHN細胞系中提高328.37倍，在786-O細胞系中提高424.58倍。轉(zhuǎn)染miR-195-3p inhibitor后miR-195-3p的表達水平在ACHN細胞系與786-O細胞系中分別被敲低了71.79%和74.59%。見圖4。

五、miR-195-3p提高腎癌細胞增殖水平

在786-O細胞系中，與轉(zhuǎn)染mimic NC相比，轉(zhuǎn)染miR-195-3p mimic于24、48、72 h的增殖水平提高了3.65%(P<0.05)、10.37%(P<0.05)、25.34%(P<0.01)；與轉(zhuǎn)染inhibitor NC相比，轉(zhuǎn)染miR-195-3p inhibitor于24、48、72 h的增殖水平下降了4.38%(P<0.01)、 9.83%(P<0.01)、8.29%(P<0.01)。見圖5。

在ACHN細胞系中，與轉(zhuǎn)染mimic NC相比，轉(zhuǎn)染miR-195-3p mimic于24、48、72 h的增殖水平提高了5.42%(P<0.01)、10.88%(P<0.01) 和17.78%(P<0.01)，與轉(zhuǎn)染 inhibitor NC相比，轉(zhuǎn)染miR-195-3p inhibitor于24、48、72 h的增殖水平下降了5.69%(P<0.05)、9.21%(P<0.01) 和 6.41%(P<0.01)。見圖6?？梢?，miR-195-3p可以提高腎癌細胞的增殖水平，故miR-195-3p可促進腎癌細胞生長。

圖1　miR-195-3p在腎癌及相應的癌旁組織中的相對表達倍數(shù)分析(X軸Normal代表正常組織，Cancer代表腎癌組織，Y軸代表腎癌組織相對癌旁組織的表達倍數(shù))圖2　miR-195-3p在腎癌和相應的癌旁組織中的相對表達量比值經(jīng)對數(shù)轉(zhuǎn)換后結(jié)果(X軸代表組織例數(shù)，Y軸代表腎癌與相應的癌旁組織中的相對表達量比值經(jīng)對數(shù)轉(zhuǎn)換后結(jié)果)圖3　miR-195-3p在ACHN、786-O、769P、293T中的相對表達量(X軸為4種細胞系，Y軸是miR-195-3p在ACHN、786-O、769P、293T相對于293T的表達量)圖4　轉(zhuǎn)染后miR-195-3p在ACHN與786-O細胞系表達水平圖5　786-O細胞系中轉(zhuǎn)染后細胞增殖水平的OD值變化(X軸表示時間，Y軸表示OD值大小)圖6　ACHN細胞系中轉(zhuǎn)染后細胞增殖水平的OD值變化(X軸表示時間，Y軸表示OD值大小)

討論

RCC是最常見的泌尿系統(tǒng)惡性腫瘤之一，約占成人惡性腫瘤的2%[11]?；赗CC的臨床結(jié)果和生物特性，RCC主要分為透明細胞癌、乳頭狀癌、嫌色細胞癌等幾種病理類型[12]。而透明細胞癌是最常見的RCC病理類型，約占RCC的80%[4]。與大多數(shù)腫瘤相同，腎癌發(fā)生發(fā)展的具體機制暫不明確，手術(shù)切除依然是RCC唯一確定的治療措施，但是仍然有20%～40%的患者在行腎切除術(shù)后面臨著復發(fā)的可能[13]。故而尋找可用于腎癌早期診斷或治療的藥物顯得更為重要。

據(jù)近期文獻報道，miR-195在許多類型的癌癥中發(fā)揮著十分重要的作用，包括神經(jīng)膠質(zhì)瘤、結(jié)直腸癌、乳腺癌等[14-16]。推測，miR-195可能是癌癥發(fā)展的關(guān)鍵。實驗研究證實miR-195通過直接針對細胞周期蛋白D1和E1的3’UTRs來抑制人類神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞增殖[14]。miR-195通過bcl-2(23) 促進細胞凋亡和抑制結(jié)腸、直腸的致瘤性[15]。在乳腺癌組織中miR-195表達下調(diào)，誘導miR-195的表達能促進細胞凋亡并能抑制乳腺癌的生存細胞，數(shù)據(jù)顯示miR-195能夠結(jié)合Raf-1 mRNA 的3’UTR從而抑制Raf-1的表達[16]。Subramanian等[17]的研究表明miR-195是Raf-1表達的直接負調(diào)節(jié)物并且同時抑制Raf-1和MEK激酶使結(jié)腸癌細胞凋亡增加。在肝細胞癌和胰腺癌中miR-195的表達也是下調(diào)的[18-19]。

有關(guān)miR-195作為結(jié)腸癌生物標志物的研究表明[17]， miR-195表達下調(diào)與結(jié)腸癌預后差、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)聯(lián)。miR-195在子宮頸癌、骨肉瘤、腎上腺皮質(zhì)癌和乳腺癌中也被描述為生物標志物[20-24]。有研究發(fā)現(xiàn)miR-195對乳腺癌檢測具有更高的靈敏度[25]。低表達水平的miR-195可以顯著預測HER2陽性乳腺癌患者的生存率[23]。也有文獻報道血清中miRNA(miR-16-2*，miR-195，miR-2861，miR-497)可用于高精度辨別宮頸上皮內(nèi)瘤變[23]。而下調(diào)的miR-195可以預測預后不良的骨肉瘤或腎上腺皮質(zhì)癌[20-21]。由上可見，miR-195可作為診斷、靶向治療或預后多種癌癥的潛在的生物標志物。

本研究發(fā)現(xiàn)miR-195-3p在腎癌中表達上調(diào)，提示其在腎癌中的作用機制與其他腫瘤有所不同。qRT-PCR實驗結(jié)果顯示miR-195-3p在腎癌中明顯高表達，其表達水平為癌旁正常組織的(4.344±0.482)倍，提示其可能在腎癌發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著促癌基因的作用。統(tǒng)計學分析未發(fā)現(xiàn)miR-195-3p的表達水平與患者年齡、性別、臨床病理特征、TNM分期、AJCC臨床分期之間的聯(lián)系，但這不能排除其與臨床病例數(shù)偏少所造成的偏倚誤差有關(guān)，需要更大的樣本量才能進一步對實驗進行驗證。細胞增殖實驗中，在786-O及ACHN細胞系中miR-195-3p可提高腎癌細胞增殖水平。

現(xiàn)通過實驗已明確miR-195-3p在腎癌及其癌旁組織中的表達存在差異，下一步將收集更多的實驗標本，以驗證miR-195-3p的表達水平與患者年齡、性別、臨床病理特征、TNM分期、AJCC臨床分期之間是否存在一定的聯(lián)系。并用體外轉(zhuǎn)染的實驗方法對miR-195進行其他的功能方面的研究，主要包括腎癌細胞的轉(zhuǎn)染后侵襲、凋亡等。這些研究將有助于闡明腎癌發(fā)生發(fā)展的分子機制，并對腎癌的早期診斷及其治療與判斷預后起到至關(guān)重要的作用。

參考文獻

[1]Ridge CA, Pua BB, Madoff DC. Epidemiology and staging of renal cell carcinoma[J]. Semin Intervent Radiol,2014,31(1):3-8.

[2]Ferlay J, Shin HR, Bray F, et al. Estimates of worldwide burden of cancer in 2008: GLOBOCAN 2008[J]. Int J Cancer,2010,127(12):2893-2917.

[3]Rini BI, Campbell SC, Escudier B. Renal cell carcinoma[J]. Lancet,2009,373(9669):1119-1132.

[4]Ljungberg B, Cowan NC, Hanbury DC， et al. EAU guidelines on renal cell carcinoma: the 2010 update[J]. Eur Urol,2010,58(3):398-406.

[5]Coskun M, Bjerrum JT, Seidelin JB, et al. miR-20b, miR-98, miR-125b-1*, and let-7e* as new potential diagnostic biomarkers in ulcerative colitis[J]. World J Gastroenterol,2013,19(27):4289-4299.

[6]Shao Y, Zhang SQ, Quan F, et al. MicroRNA-145 inhibits the proliferation, migration and invasion of the human TCA8113 oral cancer line[J]. Oncol Lett,2013,6(6):1636-1640.

[7]Chen D, Zhang Y, Wang J, et al. MicroRNA-200c overexpression inhibits tumorigenicity and metastasis of CD117+CD44+ ovarian cancer stem cells by regulating epithelial-mesenchymal transition[J]. J Ovarian Res,2013,6(1):50.

[8]Zhang QQ, Xu H, Huang MB, et al. MicroRNA-195 plays a tumor-suppressor role in human glioblastoma cells by targeting signaling pathways involved in cellular proliferation and invasion[J]. Neuro Oncol,2012,14(3):278-287.

[9]Fei X, Qi M, Wu B, et al. MicroRNA-195-5p suppresses glucose uptake and proliferation of human bladder cancer T24 cells by regulating GLUT3 expression[J]. FEBS Lett,2012,586(4):392-397.

[10]Iorio MV, Casalini P, Tagliabue E, et al. MicroRNA profiling as a tool to understand prognosis, therapy response and resistance in breast cancer[J]. Eur J Cancer,2008,44(18):2753-2759.

[11]Grange C, Collino F, Tapparo M, et al. Oncogenic micro-RNAs and renal cell carcinoma[J]. Front Oncol,2014,4:49.

[12]Lopez-Beltran A, Carrasco JC, Cheng L, et al. 2009 update on the classification of renal epithelial tumors in adults[J]. Int J Urol，2009,16(5):432-443.

[13]Janzen NK, Kim HL, Figlin RA, et al. Surveillance after radical or partial nephrectomy for localized renal cell carcinoma and management of recurrent disease[J]. Urol Clinics North Am,2003,30(4):843-852.

[14]Hui W, Yuntao L, Lun L, et al. MicroRNA-195 inhibits the proliferation of human glioma cells by directly targeting cyclin D1 and cyclin E1[J]. PloS One,2013,8(1):e54932.

[15]Liu L, Chen L, Xu Y, et al. microRNA-195 promotes apoptosis and suppresses tumorigenicity of human colorectal cancer cells[J]. Biochem Biophys Res Commun,2010,400(2):236-240.

[16]Yang G, Wu D, Zhu J, et al. Upregulation of miR-195 increases the sensitivity of breast cancer cells to Adriamycin treatment through inhibition of Raf-1[J]. Oncol Rep,2013,30(2):877-889.

[17]Subramanian RR, Yamakawa A. Combination therapy targeting Raf-1 and MEK causes apoptosis of HCT116 colon cancer cells[J]. Int J Oncol,2012,41(5):1855-1862.

[18]Yang Y, Li M, Chang S, et al. MicroRNA-195 acts as a tumor suppressor by directly targeting Wnt3a in HepG2 hepatocellular carcinoma cells[J]. Mol Med Rep,2014,10(5):2643-2648.

[19]Du J, Zheng X, Cai S, et al. MicroRNA506 participates in pancreatic cancer Rthogenesis by targeting PIM3[J]. Mol Med Rep,2015,12(4):5121-5126.

[20]Cai H, Zhao H, Tang J, et al. Serum miR-195 is a diagnostic and prognostic marker for osteosarcoma[J]. J Surg Res,2015,194(2):505-510.

[21]Soon PS, Tacon LJ, Gill AJ, et al. miR-195 and miR-483-5p identified as predictors of poor prognosis in adrenocortical cancer[J]. Clin Cancer Res,2009,15(24):7684-7692.

[22]Tashkandi H, Shah N, Patel Y, et al. Identification of new miRNA biomarkers associated with HER2-positive breast cancers[J]. Oncoscience,2015,2(11):924-929.

[23]Zhang Y, Zhang D, Wang F, et al. Serum miRNAs panel (miR-16-2*, miR-195, miR-2861, miR-497) as novel non-invasive biomarkers for detection of cervical cancer[J]. Sci Rep,2015,5:17942.

[24]Zhao FL, Dou YC, Wang XF, et al. Serum microRNA-195 is down-regulated in breast cancer: a potential marker for the diagnosis of breast cancer[J]. Mol Biol Rep,2014,41(9):5913-5922.

(本文編輯：徐漢玲)

基金項目：國家自然科學基金(81101922)；深圳市科技研發(fā)資金知識創(chuàng)新計劃基礎研究項目(JCYJ20130402114702124、JCYJ20150403091443329)；廣東省重點醫(yī)學?？平?jīng)費

通信作者：來永慶，E-mail:yqlord@163.com

doi:10.3870/j.issn.1674-4624.2016.02.009

Corresponding author:LAI Yong-qing,E-mail:yqlord@163.com

(收稿日期：2016-01-08)

The expression and clinical significance of miR-195-3p in renal cell carcinoma

PANXiang*,QUANJing,JINLu,GUIYao-ting,YANGShang-qi,MAOXiang-ming,LAIYong-qing.

*AnhuiMedicalUniversity,Hefei230032,China

【Abstract】ObjectiveTo detect the expression level of miR-195-3p in the renal cell carcinoma(RCC)， paired normal tissues, RCC cell lines and normal kidney cell line, and analyze the relationships between the expression level of miR-195-3p and clinicopathologic of patients and explore its clinical significance.MethodsTotal RNA was isolated from 27 RCC tissues and paired adjacent normal tissues. Reverse transcription and real time quantitative PCR (qRT-PCR) were used to detect the expression of miR-195-3p. The relationships between the expression of miR-195-3p in tissues and cell lines with clinicopathologic characteristics was analyzed. To assess the function of miR-195-3p in RCC cell lines, cell proliferation assay (MTT) were performed on cells after up-regulating or down-regulating miR-195-3p.ResultsThe expressionof miR-195 in RCC tissues and cells was significantly higher than paired adjacent normal tissues and cells (P<0.05), and 18 (66.67%) RCC tissues showed up-regulation in all tissues which had detected miR-195-3P. The results showed that there were no relationships between the expression of miR-195-3P with patients’gender, age, histology, TNM stage and AJCC stage (P>0.05).Over-expression of miR-195-3p could promote RCC cell (786-O and ACHN) proliferation, while down-regulation of miR-195-3p could suppress cell proliferation. ConclusionsmiR-195-3P is up-regulated in RCC tissue, and promotes the proliferation of RCC cells. It is indicated that miR-195-3P might be involved in the tumorigenesis and development of RCC.

【Key words】Kidney neoplasms;miR-195-3p