田小蕓，尤金煒，董　敏，方　天，劉　捷，惲?xí)r鋒

(南京軍區(qū)南京總醫(yī)院比較醫(yī)學(xué)科，南京　210002)

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先天性白內(nèi)障大鼠的血壓與體溫基礎(chǔ)數(shù)據(jù)分析

田小蕓，尤金煒，董敏，方天，劉捷，惲?xí)r鋒

(南京軍區(qū)南京總醫(yī)院比較醫(yī)學(xué)科，南京210002)

【摘要】目的為了完善先天性白內(nèi)障大鼠的背景資料，對該大鼠的血壓與體重及體溫進(jìn)行了測定，并進(jìn)行相關(guān)性分析。方法分別取三個體重段的正常瞼裂白內(nèi)障大鼠、小眼白內(nèi)障大鼠和正常對照SD大鼠各30只，雌雄各半，用多道生理信號采集系統(tǒng)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。結(jié)果三個體重段雌雄大鼠的血壓間無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，但隨著體重的增加，血壓與體重之間逐漸形成相關(guān)關(guān)系；同品系雄性大鼠標(biāo)準(zhǔn)體重與老齡大鼠血壓間有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。各體重段雌雄大鼠體溫有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，且雄性體溫均低于雌性。結(jié)論白內(nèi)障大鼠的血壓、體重和體溫的變化符合大鼠的生理特性，為今后該鼠的使用提供理論基礎(chǔ)。

【關(guān)鍵詞】先天性白內(nèi)障；大鼠；血壓；體溫；相關(guān)分析

隨著生命科學(xué)的發(fā)展，實(shí)驗(yàn)動物的質(zhì)量也越來越受到人們的重視，動物質(zhì)量的好壞直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，良好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果應(yīng)該具有可比性、可重復(fù)性；除了疾病的預(yù)防與控制外，實(shí)驗(yàn)動物正常的生理數(shù)據(jù)是反映該動物健康狀況的重要生理指標(biāo)。正常瞼裂白內(nèi)障大鼠是2007年由我科屏障環(huán)境SD 繁殖大鼠離乳仔鼠中發(fā)現(xiàn)，后將正常瞼裂白內(nèi)障大鼠按封閉群進(jìn)行繁殖傳代，后代中有正常瞼裂白內(nèi)障大鼠，小眼白內(nèi)障大鼠和無白內(nèi)障大鼠三種表型，將小眼白內(nèi)障大鼠按近交系進(jìn)行繁殖傳代，后代中前5代均為小眼白內(nèi)障，第6代開始出現(xiàn)分化，第7代出現(xiàn)1只長牙大鼠，后代中有小眼白內(nèi)障大鼠(表現(xiàn)雙眼和單眼白內(nèi)障大鼠二種表型)，也有小眼無白內(nèi)障大鼠，留下雙小眼白內(nèi)障大鼠進(jìn)行繁殖傳代，后代中還是小眼(雙、單眼)白內(nèi)障和小眼無白內(nèi)障大鼠二種表型，且小眼白內(nèi)障的比例越來越少，經(jīng)過多種方式不斷選育及回交，現(xiàn)小眼白內(nèi)障已近交傳至23代，后代均為小眼白內(nèi)障大鼠，為了完善該品系大鼠的背景資料，我們?nèi)〔煌w重和性別的大鼠進(jìn)行了血壓和體溫的測定，報導(dǎo)如下：

1材料和方法

1.1實(shí)驗(yàn)動物

清潔級瞼裂白內(nèi)障大鼠、小眼白內(nèi)障大鼠和SD大鼠各30只，周齡為7～8周、10～11周和1年，體重為199.2～217.8 g、253.9～270.1 g、387.1～600.9 g，雌雄各半，由南京軍區(qū)南京總醫(yī)院比較醫(yī)學(xué)科自繁【SCXK(軍)2012-0014】，實(shí)驗(yàn)在南京軍區(qū)南京總醫(yī)院比較醫(yī)學(xué)科的動物實(shí)驗(yàn)環(huán)境中進(jìn)行【SYXK(軍)2012-0047】。并按使用的3R原則給予人道的關(guān)懷。

1.2飼養(yǎng)管理及環(huán)境

實(shí)驗(yàn)大鼠均飼養(yǎng)在屏障環(huán)境中，室內(nèi)的溫、濕度均由中央空調(diào)控制，溫度為20℃～26℃，相對濕度為50%～70%，光照明暗交替12 h/d，大鼠所食飼料為60Co輻射飼料，營養(yǎng)成份為粗蛋白21.8%，粗脂肪為4.0%，粗灰份為7.8%，粗纖維3.0%，水份10.1%，鈣1.7%，磷1.08%。另每周加喂一次葵花籽。飲水為消毒的酸化水，使用的墊料、盒子等一切用具均進(jìn)行131℃ 5 min高壓預(yù)真空滅菌。

1.3方法

分別取體重為199.2～217.8 g、253.9～270.1 g、387.1～600.9 g的大鼠各30只，雌雄各半進(jìn)行分組實(shí)驗(yàn)，血壓、體溫的測定用成都儀器廠生產(chǎn)的多道生理信號采集處理系統(tǒng)進(jìn)行測定。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法

2結(jié)果

2.1不同體重大鼠的血壓及與體重相關(guān)性比較

表1　標(biāo)準(zhǔn)體重大鼠的血壓與體溫表

注：1-正常瞼裂白內(nèi)障雄性;2-正常瞼裂白內(nèi)障雌性;3-小眼白內(nèi)障雄性;4-小眼白內(nèi)障雌性;5-正常對照SD雄性;6-正常對照SD雌性;*：雌雄間的差異顯著性，*P< 0.05，**P<0.01;△：同性別間的差異顯著性，△P<0.05。

Note：1-cataract male rat with normal fissura palpebrae；2- cataract female rat with normal fissura palpebrae；3- microphthalmos cataracts male rat；4- microphthalmos cataracts female rat； 5-normal male rat；6- normal female rat；*：compare male with female,*P<0.05，**P<0.01；△：compare with the same sex,△P<0.05.

經(jīng)統(tǒng)計分析表1，各組間血壓無差異(P>0.05)，經(jīng)體重與血壓的相關(guān)性分析r=0.131,P=0.172,表示此時體重與血壓間不存在相關(guān)性。正常瞼裂白內(nèi)障大鼠和正常對照SD大鼠雌雄間直腸溫度差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),小眼白內(nèi)障大鼠雌雄間差異無統(tǒng)計學(xué)意義；小眼白內(nèi)障大鼠與正常瞼裂白內(nèi)障大鼠和正常大鼠雌性間直腸溫度間有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

經(jīng)統(tǒng)計分析表2，各組間血壓無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，經(jīng)體重與血壓的相關(guān)性分析r=0.246,P=0.03,表示此時體重與血壓間存在一定的相關(guān)性。此階段大鼠的直腸溫度雌雄間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，小眼白內(nèi)障大鼠與正常瞼裂白內(nèi)障大鼠和正常對照SD大鼠同性別間直腸溫度差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。

表2　體重在260 g左右時大鼠的血壓與體溫表

注：1-正常瞼裂白內(nèi)障雄性；2-正常瞼裂白內(nèi)障雌性；3-小眼白內(nèi)障雄性；4-小眼白內(nèi)障雌性；5-正常對照SD雄性；6-正常對照SD雌性；*：雌雄間的差異顯著性，**P<0.01，△：同性別間的差異顯著性，△△P<0.01。

Note：1-cataract male rat with normal fissura palpebrae；2-cataract female rat with normal fissura palpebrae；3-microphthalmos cataracts male rat；4-microphthalmos cataracts female rat；5-normal male rat,6-normal female rat；*：compare male with female,**P<0.01；△：compare with the same sex,△△P<0.01.

表3　老年大鼠的血壓與體溫表

注：1-正常瞼裂白內(nèi)障雄性;2-正常瞼裂白內(nèi)障雌性;3-小眼白內(nèi)障雄性;4-小眼白內(nèi)障雌性;5-正常對照SD雄性;6-正常對照SD雌性;*：雌雄間的差異顯著性，*P< 0.05，**P<0.01;△：同性別間的差異顯著性，△P<0.05。

Note：1-cataract male rat with normal fissura palpebrae；2- cataract female rat with normal fissura palpebrae；3- microphthalmos cataracts male rat；4- microphthalmos cataracts female rat； 5-normal male rat；6- normal female rat；*：compare male with female,*P<0.05，**P<0.01；△：compare with the same sex,△P<0.05.

經(jīng)統(tǒng)計分析，表3白內(nèi)障和小眼白內(nèi)障組間血壓無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，正常對照組雄雌間有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，經(jīng)體重與血壓的相關(guān)性分析r=0.246,P=0.007,表示此時體重與血壓間存在相關(guān)關(guān)系。各組大鼠雌雄間直腸溫度差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，正常瞼裂白內(nèi)障大鼠與小眼白內(nèi)障大鼠雄性間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

2.2血壓隨體重的變化

隨著體重的增加，同一品系雄性大鼠的血壓變化見圖1。

注：a:正常瞼裂白內(nèi)障大鼠;b:小眼白內(nèi)障大鼠;c:正常大鼠。圖1　同一品系雄性大鼠血壓隨體重的變化Note: a: cataract rat of normalfissura palpebrae;b: microphthalmos cataracts rat;c: normal rat.Fig.1　The change of blood pressure with the different body weight in same strain male rats

經(jīng)統(tǒng)計分析，三個體重段雄性大鼠隨著體重增加，血壓間有差異，正常瞼裂白內(nèi)障大鼠的1體重血壓與2、3體重血壓間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；小眼白內(nèi)障大鼠2與1、3體重血壓間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，1與3體重血壓間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；正常對照SD大鼠3與1，2體重血壓間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；三個品系的雌鼠隨著體重的增加血壓間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

2.3應(yīng)用多道生理信號采集系統(tǒng)測量血壓時的圖截屏

注：A：血壓線；B：脈搏線；C：體溫線。圖2　大鼠血壓和體溫采集圖Note:A: line of blood pressure；B: line of sphygmus；C: line of body temperature.Fig.2　Picture of the blood pressure and body temperature in rats

圖2最底下的線是體溫線，中間的是脈搏，當(dāng)大鼠在暗袋中平靜時，脈搏顯示均勻，此時加壓，脈搏阻斷，然后緩慢放氣，脈搏逐漸恢復(fù)，如圖2，重復(fù)3次，取均值。

3討論

實(shí)驗(yàn)動物種類繁多，雖然各實(shí)驗(yàn)動物彼此間有一定的相似性，但它們畢竟在解剖和生理上存在著差異，各有特點(diǎn)。動物實(shí)驗(yàn)必須具有可重復(fù)性或再現(xiàn)性，研究人員才能依據(jù)結(jié)果做出正確的估計與評價。所以，在選擇實(shí)驗(yàn)動物時要盡量選用符合實(shí)驗(yàn)要求的標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)動物。自發(fā)性疾病動物模型的最大優(yōu)點(diǎn)是：疾病的發(fā)生、發(fā)展與人類對應(yīng)的疾病很相似，即疾病均是在自然條件下發(fā)生，因而這類模型應(yīng)用價值較高，但這類模型來源相對困難。白內(nèi)障大鼠是我科室進(jìn)行多年培育的一個新品系，實(shí)驗(yàn)動物要求來源清楚，背景明確；大鼠的血壓和體溫的測定對完善該品系大鼠的背景資料具有重要的意義。

在2007年屏障離乳SD 仔鼠中發(fā)現(xiàn)5只先天性白內(nèi)障大鼠，后培育傳代，為了將白內(nèi)障大鼠培育成為一個新品系，我們對各生理指標(biāo)作了相應(yīng)的檢測與分析，已經(jīng)做了大鼠的繁殖試驗(yàn)、生長測定、血液血指標(biāo)、臟器重量及系數(shù)和白內(nèi)障晶狀體的病理學(xué)研究[1-5]，還有下頜骨測定，毛色基因及生化標(biāo)記基因位點(diǎn)、皮膚移植和突變基因等的檢測。

本實(shí)驗(yàn)中的大鼠血壓與體重在標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)無相關(guān)性，但隨著體重的增加，血壓與體重存在一定的相關(guān)關(guān)系。對于人類的研究也顯示肥胖或超重者患高血壓的風(fēng)險是正常人群的2～6倍，隨著年齡的增長和體重的增加，血壓呈上升趨勢[6-7]。血壓是指血管內(nèi)的血液對于單位面積血管的測壓力。正常大鼠的血壓范圍是收縮壓82.35～119.925 mmHg,舒張壓59.925～89.925 mmHg，該實(shí)驗(yàn)鼠不同體重段的收縮壓均在正常范圍內(nèi)。我們采用的是成都儀器廠制造的多道生理儀，有一個不銹鋼的實(shí)驗(yàn)平臺，在測大鼠尾壓時先要打開恒溫浴槽，將水溫調(diào)至38.5℃，溫水由水管流經(jīng)實(shí)驗(yàn)平臺，這樣不會因外界溫度的變化對大鼠產(chǎn)生應(yīng)急干擾，大鼠裝入黑色袖套放在實(shí)驗(yàn)平臺上，待大鼠安靜后進(jìn)行加壓測血壓，從而獲得尾動脈壓。表中的脈搏數(shù)是指在測大鼠血壓時，隨著血壓球的放氣，脈搏逐漸恢復(fù)至加壓前，我們?nèi)偦謴?fù)時的脈搏測定血壓時的值就是表中的脈搏數(shù)。

在測大鼠血壓的同時也測了直腸溫度。恒溫動物能維持機(jī)體體溫的恒定，具有體溫調(diào)節(jié)功能；溫度對實(shí)驗(yàn)動物的影響表現(xiàn)在生殖、泌乳、機(jī)體抵抗力、生長、形態(tài)、新陳代謝和實(shí)驗(yàn)反應(yīng)性等方面。各組大鼠雌雄間的直腸溫度間有差異顯著性，并且是雄性大鼠的體溫稍低于雌性大鼠，這也附合雄雌性的生理特點(diǎn)。以前測大鼠體溫有用水銀溫度計直接測肛門溫度，容易挫傷腸壁或折斷體溫計[8]，或是在麻醉狀態(tài)下有創(chuàng)手術(shù)中進(jìn)行血壓測定，麻醉和有創(chuàng)自身就會干擾動物的血壓[9]，我們是采用無創(chuàng)無麻醉且在大鼠安靜狀態(tài)下進(jìn)行，避免了各種干擾，確保動物的各生理指標(biāo)采集的準(zhǔn)確性。

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〔修回日期〕2015-12-25

[基金項(xiàng)目]南京總醫(yī)院基金(2011001)。

[作者簡介]田小蕓(1965-)，女，碩士，副主任技師，研究方向：實(shí)驗(yàn)動物疾病模型。 [通訊作者]惲?xí)r鋒(1965-)，男，獸醫(yī)學(xué)博士，主任技師，研究方向：實(shí)驗(yàn)動物管理。

【中圖分類號】R-332

【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A

【文章編號】1671-7856(2016) 01-0054-04

doi:10.3969.j.issn.1671.7856. 2016.001.010

Correlation analysis on the blood pressure and body temperature of congenital cataract rat

TIAN Xiao-yun, YOU Jin-wei,DONG-Min,FANG-Tian, Liu Jie, YUN Shi-feng

(Department of Comparative Medicine, Nanjing General Hospital of Nanjing Military Region, PLA,Nanjing 210002,China)

【Abstract】ObjectiveTo optimize the background of the congenital cataract in rats, the blood pressure, body temperature and weight of rats were measured and correlation analysis. MethodsWe took three kinds of rats(cataracts rat,microphthalmos cataracts rat and normal rat)as subjects, each kind with half males and females was divided into three groups by weight, each of which contains 30 rats. We used the Multi-channel physiological signal acquisition system for test. ResultsBlood pressure has no significant difference among the three segments of male and female rats(P >0.05). With the increase of body weight,blood pressure and body weight formed a relevant relationship gradually.In the same male strain,there was significant difference between the standard weight(207 g) and the aging weight(494 g)(P < 0.01). In the same body weight range, the temperature difference between male and female rats was significant(P < 0.01),and the male’s temperature was lower than the female. ConclusionsThe changes in blood pressure,body weight and temperature of cataract rats conformed to the physiological characteristics of rats，which provide a theoretical basis for the use of catatacts rats in the future

【Key words】Congenital cataract; Rat; Blood pressure; Body temperature; Correlation analysis