王 剛(中航工業(yè)三六三醫(yī)院,四川 成都 610041)
紅景天總黃酮對小鼠急性肝損傷保護(hù)作用研究
王 剛
(中航工業(yè)三六三醫(yī)院,四川 成都 610041)
[摘 要]目的:觀察紅景天總黃酮對小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用。方法:用四氯化碳制作小鼠肝損傷模型,分別灌胃給予小鼠不同劑量的紅景天總黃酮,連續(xù)7d,末次給藥1h后測定小鼠血清ALT、AST含量,以及肝臟、脾、胰腺指數(shù),肝臟組織中SOD、MDA含量。結(jié)果:紅景天總黃酮可明顯降低急性肝損傷小鼠血清ALT、AST 及肝組織勻漿中MDA 含量,提高SOD活性。結(jié)論:紅景天總黃酮對小鼠急性肝損傷具有保護(hù)作用。
[關(guān)鍵詞]紅景天;總黃酮;小鼠;急性肝損傷
紅景天(Rhodiola sachalimemsis A.Bor.)是景天科紅景天屬多年生草本植物,具有補(bǔ)氣清肺、益智養(yǎng)心、收澀止血、散瘀消腫的功效,臨床上用于刺激神經(jīng)興奮、治療抑郁癥、增加體能、清除疲勞、預(yù)防高原病等[1]?,F(xiàn)代藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn),紅景天提取物具有保護(hù)心血管、肝臟功能及抗疲勞、抗氧化、消炎、抗菌、抗病毒、抗抑郁等廣泛的藥理作用[2]。
目前,關(guān)于紅景天對肝損傷的保護(hù)作用的報(bào)道多見于紅景天苷類,而關(guān)于紅景天總黃酮對急性肝損傷的研究鮮有報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)采取四氯化碳制作小鼠急性肝損傷模型,以探討紅景天總黃酮護(hù)肝作用。
1.1 藥物與試劑
紅景天總黃酮提取物(由本院制劑室提取純化而得,經(jīng)定量檢驗(yàn)證實(shí)總黃酮含量為25.7%),聯(lián)苯雙酯(Biphenyldimethylesterate,DDB,華北制藥股份有限公司,國藥準(zhǔn)字H13023912),四氯化碳(成都市科龍化工試劑廠,批號20140609),甲醛(成都市科龍化工試劑廠,批號20120927),Evans Blue(Sigma公司,批號1001699862),λ-角叉菜膠(Sigma公司,批號17H1148),ALT、AST、SOD、MDA試劑盒(南京建成生物科技有限公司)。
1.2 動物
KM小鼠,SPF級,雄性,體質(zhì)量18~22g,由成都達(dá)碩生物科技有限公司提供[合格證號scxk(川)2013-24]。動物飼養(yǎng)于標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境:溫度(23±1)℃,相對濕度(60±5)%,人工光照,12h明暗周期交替,標(biāo)準(zhǔn)飼料喂養(yǎng)。
1.3 儀器
Sorvall ST-16R離心機(jī)(美國Thermo公司),VARIOSKAN FLASH 2.4.3全波長多功能讀數(shù)儀(美國Thermo公司),BS323S電子天平(Sartorius公司),101C-2電熱鼓風(fēng)干燥箱(上海實(shí)驗(yàn)儀器廠有限公司)。
1.4 實(shí)驗(yàn)方法
取健康雄性KM小鼠60只,按體質(zhì)量隨機(jī)分為5組,每組12只,分別為模型組、空白對照組、聯(lián)苯雙酯組(150mg/kg)、紅景天總黃酮高、中、低劑量組(200mg/kg、100 mg/kg、50mg/kg)。連續(xù)灌胃給藥7d,每天1次,模型組給予等量蒸餾水。各組小鼠末次給藥1h后,除空白對照組外,將其余各組小鼠腹腔注射0.1% CCL4花生油(0.1mL/10g),禁食不禁水24h后取血及臟器進(jìn)行測定。摘小鼠眼球取血,將凝固的血液于3000r/ min離心10min,4℃離心分離血清,取血清于-20℃保存,用于ALT、AST的測定。取血后快速取出肝臟、脾臟和胸腺,冰生理鹽水漂洗拭凈后稱重并記錄,計(jì)算肝臟、脾臟和胸腺指數(shù)。選肝臟右葉肝組織,加適量冰生理鹽水,制備10%濃度勻漿后于-80℃冰箱保存,用于SOD、MDA含量測定。
紅景天總黃酮對急性肝損傷小鼠臟器指數(shù)的影響見表1。
表1 紅景天總黃酮對急性肝損傷小鼠臟器指數(shù)的影響 (±s)
表1 紅景天總黃酮對急性肝損傷小鼠臟器指數(shù)的影響 (±s)
注:與模型組比較,*P<0.05,**P<0.01;與空白組比較,△P<0.01。
(mg/kg) 胸腺指數(shù)(mg/kg) 脾臟指數(shù)(mg/kg) 肝臟指數(shù)(%)空白組 12 — 2.15±0.26 4.34±0.35 4.72±0.45模型組 12 — 3.57±0.62△5.47±0.51△5.71±0.81△聯(lián)苯雙酯組 12 150 2.53±0.37**4.48±0.32**4.93±0.63**紅景天總黃酮高劑量組 12 200 2.75±0.53**4.57±0.49**5.17±0.68**紅景天總黃酮中劑量組 12 100 2.73±0.42*4.82±0.53*5.33±0.46*紅景天總黃酮低劑量組 12 50 3.05±0.71 4.96±0.45 5.56±0.55組別 n 劑量
紅景天總黃酮對急性肝損傷小鼠血清ALT、AST含量的影響見表2。
表2 紅景天總黃酮對急性肝損傷小鼠ALT、AST含量的影響 (±s)
表2 紅景天總黃酮對急性肝損傷小鼠ALT、AST含量的影響 (±s)
注:與模型組比較,*P<0.05,**P<0.01;與正常組比較,△P<0.01。
組別 n劑量(mg/kg) AST(mg/kg) ALT(mg/kg)空白組 12 — 24.05±3.46 65.34±15.47模型組 12 — 66.87±11.62△173.27±17.62△聯(lián)苯雙酯組 12 150 33.53±12.38**83.49±12.57**紅景天總黃酮高劑量組 12 200 38.15±11.33**98.63±22.13**紅景天總黃酮中劑量組 12 100 49.73±10.36*109.92±12.46*紅景天總黃酮低劑量組 12 50 54.85±11.24 148.76±17.45
紅景天總黃酮對急性肝損傷小鼠肝組織SOD、MDA含量的影響見表3。
表3 紅景天總黃酮對急性肝損傷小鼠肝組織SOD、MDA的影響 (±s)
表3 紅景天總黃酮對急性肝損傷小鼠肝組織SOD、MDA的影響 (±s)
MDA (nmol/mg)空白組 12 — 94.05±13.46 5.42±1.94模型組 12 — 66.87±11.62△ 7.68±1.99△聯(lián)苯雙酯組 12 150 83.53±12.38** 5.64±1.01*紅景天總黃酮高劑量組 12 200 88.15±22.33** 5.97±1.28*紅景天總黃酮中劑量組 12 100 79.73±12.36* 5.77±1.83*紅景天總黃酮低劑量組 12 50 74.85±17.24 6.62±1.35組別 n 劑量(mg/kg)SOD (mg/kg)
注:與模型組比較,*P<0.05,**P<0.01;與正常組比較,△P<0.01。
《本草綱目》中紅景天被注為“草本上品”,具有明顯的抗缺氧、抗寒冷、抗輻射、抗腫瘤、抗肝纖維化、抗疲勞等多方面藥理作用。國內(nèi)外臨床資料及相關(guān)文獻(xiàn)統(tǒng)計(jì)己表明紅景天對肝纖維化的干預(yù)有良好的效果[3-4]。
本研究通過四氯化碳致小鼠急性肝損傷實(shí)驗(yàn),小鼠血清生化指標(biāo)檢測結(jié)果表明。四氯化碳使小鼠血清中AST、ALT顯著升高,肝組織中MDA含量顯著升高,提示肝損傷很大可能是由于脂質(zhì)過氧化作用。而紅景天總黃酮高、中劑量能使小鼠血清AST、 ALT含量顯著降低,說明紅景天總黃酮具有一定的保肝作用。紅景天總黃酮高、中劑量能使小鼠血清MDA含量顯著降低,SOD活力顯著升高,紅景天總黃酮對四氯化碳誘導(dǎo)的小鼠急性肝損傷的保護(hù)途徑之一為增強(qiáng)機(jī)體抗自由基的能力。
綜上所述,紅景天總黃酮對小鼠急性化學(xué)性肝損傷具有一定的預(yù)防保護(hù)作用,該作用可能與其抗氧化損傷作用有關(guān)。
[參考文獻(xiàn)]
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[中圖分類號]R285.5
[文獻(xiàn)標(biāo)識碼]B
[文章編號]1004-2814(2016)06-0518-02
[收稿日期]2016-01-14
[Abstract]Objective:To observe the protective effect of total flavonoids of Rhodiola on acute liver injury of mice. Method:The mice models of acute liver injury were induced by CCl4.The mice were performed by intragastric administration with different dose of total flavonoids of Rhodiola and the serum levels of ALT and AST, the index of the liver, the spleen and the pancreas, the content of MDA and SOD in liver of the mice were measured at the time point of 1 hour after the last administration of drugs after 7 consecutive days. Result:The total flavonoids of Rhodiola significantly reduced the level of serum ALT and AST and the content of MDA and enhanced the activity of SOD in liver significantly .Conclusion:The total flavonoids of Rhodiola has protective effect on acute hepatic injury of mice.
[Key Words]Rhodiola;Total flavonoids;Mice;Acute liver injury