蔣道智(甘肅省卓尼縣畜牧工作站,甘肅 卓尼 747600)
奶牛乳房炎的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)探討
蔣道智
(甘肅省卓尼縣畜牧工作站,甘肅 卓尼 747600)
摘要:奶牛乳房炎是威脅奶牛產(chǎn)奶率及奶品質(zhì)的重要原因之一。通過(guò)對(duì)奶牛乳房炎的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)進(jìn)行實(shí)踐,掌握診斷牛隱性乳房炎的一些常用實(shí)驗(yàn)室診斷方法,比較各種方法的準(zhǔn)確性及各自的優(yōu)缺點(diǎn),為臨床診斷打好基礎(chǔ)。
關(guān)鍵詞:奶牛乳房炎;診斷技術(shù);討論
目前較為常用的奶牛乳房炎診斷技術(shù)是檢測(cè)乳汁中的乳細(xì)胞,根據(jù)乳細(xì)胞的含量對(duì)奶牛乳房炎進(jìn)行診斷,加利福尼亞乳房炎檢測(cè)法、H2O2玻片法和苛性鈉乳檢驗(yàn)法是公認(rèn)的乳細(xì)胞檢測(cè)方法。
1.1CMT(加利福尼亞乳房炎檢測(cè)法)
此法簡(jiǎn)易,效果準(zhǔn)確,可以定量?;驹硎怯靡环N陰離子表面活性物質(zhì)——烷基或羥基硫酸鹽破壞乳中體細(xì)胞,釋放其中的蛋白質(zhì),蛋白質(zhì)與試劑結(jié)合沉淀或凝膠。細(xì)胞中聚合的脫氧核糖核酸(DNA)是CMT產(chǎn)生陽(yáng)性反應(yīng)的主要成分。乳中體細(xì)胞數(shù)越多,釋放的DNA越多,產(chǎn)生的凝膠就越多,凝膠越緊密。
診斷方法:先將2 ml的被檢乳置于塑料乳房炎檢驗(yàn)盤(pán)中,再加入2 ml試劑,緩慢做同心圓狀攪拌10 s,觀察判定,標(biāo)準(zhǔn)如表1。
1.2 H2O2玻片法(過(guò)氧化氫酶法)
此法為間接測(cè)定乳中白細(xì)胞的方法,即測(cè)定乳中白細(xì)胞的過(guò)氧化氫酶,以推斷白細(xì)胞的含量。
診斷方法:將載玻片置于白色襯墊物上,滴被檢乳1滴,再加H2O21滴,混合均勻后,靜置2 min后觀察。判定標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)表2。
表2 H2O2診斷乳房炎的判斷標(biāo)準(zhǔn)
表1CMT法判斷標(biāo)準(zhǔn)
1.3苛性鈉乳檢驗(yàn)法
這種方法操作比較簡(jiǎn)單,但不適用于檢驗(yàn)泌乳初期幾接近干乳期的牛乳。
將載玻片置于黑色襯墊物上,加入被檢乳5滴,再加入4%苛性鈉溶液2滴(冷藏2 d以?xún)?nèi)的乳樣加一滴
即可),用細(xì)玻棒或火柴梗迅速攪拌,使其擴(kuò)展成直徑2.5 cm的圓形,并繼續(xù)攪拌20~25 s,觀察判定如表3。
表3苛性鈉凝乳判斷檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)
1.4乳汁pH檢驗(yàn)法——溴香草酚藍(lán)(BTB)檢驗(yàn)法
將載玻片置于白色襯墊物上,滴被檢乳1滴,再加BTB試劑1滴,混合觀察。判定標(biāo)準(zhǔn)如表4。
表4 BTB試驗(yàn)判定標(biāo)準(zhǔn)
用CMT法,除右前乳房是強(qiáng)陽(yáng)性外,其余都是隱性型。而H2O2玻片法檢查乳汁時(shí),四個(gè)乳房均呈陰性,NaOH法檢測(cè)結(jié)果是弱陽(yáng)性和可疑,BTB法檢測(cè)結(jié)果都為陰性。不同檢測(cè)方法對(duì)同一乳房的檢測(cè)結(jié)果不同,可能是因?yàn)槊糠N檢測(cè)方法的判斷標(biāo)準(zhǔn)不同。綜合分析,右前乳房乳房炎判為強(qiáng)陽(yáng)性,其余都判為可疑。
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中一定要把握好用量,檢測(cè)量的多少及試劑的用量均能影響檢測(cè)的結(jié)果。在檢測(cè)過(guò)程中,要注意在規(guī)定時(shí)間內(nèi)觀察乳液變化,不同時(shí)間乳液的變化程度不一樣,影響判斷。攪拌時(shí)間要遵守實(shí)驗(yàn)要求,時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短均會(huì)影響判斷分析。最后要根據(jù)判斷標(biāo)準(zhǔn)表及時(shí)判斷乳液情況并做好記錄,記錄時(shí)要有條不紊。注意不要把不同乳房的檢測(cè)結(jié)果混亂。
(編輯:高真貞)
中圖分類(lèi)號(hào):S283
文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A
文章編號(hào):1006-799X(2016)04-0075-01
作者簡(jiǎn)介:蔣道智(1983-),男,甘肅卓尼人,助理畜牧師,主要從事畜牧獸醫(yī)方面工作。