李明霞,左麗娟,趙軼峰,王俊芳,張　斌,李秀娟,張志英,任衛(wèi)東

(河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院，河北 張家口 075000)

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丹紅注射液對(duì)不同病情嚴(yán)重程度糖尿病患者血小板活化功能和腎功能的影響

李明霞,左麗娟,趙軼峰,王俊芳,張斌,李秀娟,張志英,任衛(wèi)東

(河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院，河北 張家口 075000)

[摘要]目的探討丹紅注射液對(duì)不同嚴(yán)重程度糖尿病患者血小板活化功能及腎功能的影響。方法根據(jù)24h尿蛋白排泄率(UAER)將符合條件的170例2型糖尿病患者分為正常蛋白尿組55例、微量尿蛋白組50例、臨床蛋白尿組65例，每組再隨機(jī)分為觀察組和對(duì)照組。對(duì)照組給予常規(guī)降糖、降壓、降脂藥物治療，觀察組在對(duì)照組治療基礎(chǔ)上給予丹紅注射液靜滴，連用2周。觀察各組治療前后血糖、血脂及血小板活化依賴性顆粒表面膜蛋白(GMP140)、血小板溶酶體顆粒膜蛋白(CD63)的表達(dá)和UAER、SCr的變化。結(jié)果觀察組和對(duì)照組治療前血糖、血脂、GMP-140、CD63 、UAER、SCr比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。正常蛋白尿組和微量尿蛋白組中觀察組治療后FBG、TG、TC、LDL-C水平均明顯低于治療前(P均<0.05)，HDL-C水平均明顯高于治療前(P均<0.05)，而對(duì)照組僅FBG明顯低于治療前，且觀察組治療后各指標(biāo)改善情況均明顯優(yōu)于對(duì)照組(P均<0.05)；臨床蛋白尿組中觀察組和對(duì)照組治療后FBG、TG、TC、LDL-C、HDL-C均明顯改善(P均<0.05)，且觀察組改善情況均明顯優(yōu)于對(duì)照組(P均<0.05)。正常蛋白尿組中觀察組和對(duì)照組治療后GMP-140、CD63 、UAER、SCr均明顯低于治療前(P均<0.05)，但觀察組和對(duì)照組治療后上述指標(biāo)比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)；微量尿蛋白組和臨床蛋白尿組中觀察組和對(duì)照組治療后GMP-140、CD63、UAER、SCr均明顯低于治療前(P均<0.05)，且觀察組改善情況明顯優(yōu)于對(duì)照組(P均<0.05)。結(jié)論丹紅注射液可明顯降低不同病情嚴(yán)重程度糖尿病患者GMP-140、CD63的表達(dá)，抑制血小板活化，減少尿蛋白，改善腎功能，尤其對(duì)糖尿病腎病患者療效更好。

[關(guān)鍵詞]丹紅注射液; 糖尿?。谎“寤罨?；腎功能

近年來(lái)，隨著人民生活水平的提高和飲食結(jié)構(gòu)的變化，糖尿病的發(fā)病率和患病率正逐年提高，其已成為威脅人民生活健康的重大社會(huì)問(wèn)題[1-2]。在糖尿病的發(fā)展過(guò)程中，一旦出現(xiàn)腎損害、持續(xù)性蛋白尿，則病情難以逆轉(zhuǎn)，因而及早干預(yù)治療對(duì)于抑制病情發(fā)展、改善腎功能具有非常重要的作用。糖尿病腎病(DN)是指糖尿病微血管病變而導(dǎo)致的腎小球硬化、腎功能受損，繼而可發(fā)展為慢性腎衰竭甚至死亡，主要表現(xiàn)為尿白蛋白排泄率增加(UAER>20 μg/min)[3]。近年來(lái)，血小板活化依賴性顆粒表面膜蛋白(GMP140)和血小板溶酶體顆粒膜蛋白(CD63)在糖尿病發(fā)生發(fā)展中的作用越來(lái)越受到臨床醫(yī)師重視。本研究通過(guò)觀察丹紅注射液對(duì)不同病情嚴(yán)重程度2型糖尿病患者血糖、血脂、腎功能及血GMP-140、CD63表達(dá)的影響，旨在探討丹紅注射液在糾正糖脂代謝紊亂、抑制血小板活化、改善腎功能方面的作用，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1臨床資料

1.1一般資料選取2014年12月—2015年12月河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院內(nèi)分泌科診治的病程10年以上的2型糖尿病患者170例，均符合2006年WHO規(guī)定的2型糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]：空腹血糖(FBG)>7.0 mmol/L，OGTT試驗(yàn)2 h血糖≥11.1 mmol/L。排除慢性心力衰竭、心肌梗死、急性腦血管病、嚴(yán)重肝功能異常、尿毒癥、庫(kù)欣綜合征、惡性腫瘤等疾病者。根據(jù)24 h UAER將患者分為正常蛋白尿組55例(UAER<20 μg/min)、微量尿蛋白組50例(UAER 20～200 μg/min)、臨床蛋白尿組65例(UAER >200 μg/min)，每組再隨機(jī)分為觀察組和對(duì)照組，每組中觀察組和對(duì)照組年齡、性別、收縮壓、舒張壓、病程比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)，見表1。本研究患者均對(duì)治療方案知情同意。

1.2治療方法對(duì)照組給予常規(guī)降糖(二甲雙胍0.5 g 3次/d口服)、降壓(卡托普利25 mg 2次/d口服)、降脂(阿托伐他汀鈣片20 mg 1次/d口服)藥物治療；觀察組在此基礎(chǔ)上給予丹紅注射液(菏澤步長(zhǎng)制藥有限公司)30 mL溶入生理鹽水250 mL中靜脈滴注，1次/d，連續(xù)應(yīng)用2周。

1.3觀察指標(biāo)

1.3.1血糖、血脂水平分別于治療前及治療2周后晨起抽取患者空腹靜脈全血3 mL，采用肝素抗凝，室溫下密封保存，應(yīng)用AU5400日立全自動(dòng)生化分析儀，3 000 r/min離心后檢測(cè)FBG、三酰甘油 (TG)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)，試劑盒購(gòu)于寧波亞太生物技術(shù)有限責(zé)任公司。

1.3.2血GMP-140、CD63表達(dá)水平分別于治療前及治療2周后空腹采血3 mL，置于2%二乙胺四乙酸(EDTA)抗凝試管，首先進(jìn)行單克隆抗體標(biāo)記，后采用FACsCantoI型流式細(xì)胞儀(美國(guó)BD公司)嚴(yán)格按照說(shuō)明書檢測(cè)GMP-140、CD63表達(dá)水平，GMP-140、CD63相關(guān)抗體均購(gòu)于美國(guó)Becton dickion公司。

1.3.3血肌酐(SCr)及UAER水平分別于治療前及治療2周后晨起抽取患者空腹靜脈全血3 mL，采用AU5400全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)SCr水平；留取24 h尿液，采用免疫法進(jìn)行尿微量白蛋白檢測(cè)(試劑盒購(gòu)于上?？迫A生物工程股份有限公司)，計(jì)算UAER。

2結(jié)果

2.1各組治療前后FBG、血脂水平比較各組中觀察組和對(duì)照組治療前FBG、TG、TC、HDL-C和LDL-C比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。正常蛋白尿組和微量尿蛋白組中觀察組治療后FBG、TG、TC、LDL-C水平均明顯低于治療前(P均<0.05)，HDL-C水平均明顯高于治療前(P均<0.05)，而對(duì)照組僅FBG明顯低于治療前，且觀察組治療后各指標(biāo)改善情況均明顯優(yōu)于對(duì)照組(P均<0.05)；臨床蛋白尿組中觀察組和對(duì)照組治療后FBG、TG、TC、LDL-C、HDL-C均明顯改善(P均<0.05)，且觀察組改善情況均明顯優(yōu)于對(duì)照組(P均<0.05)。見表2。

2.2各組治療前后血小板化功能及腎功能比較各組中觀察組和對(duì)照組治療前GMP-140、CD63 、UAER、SCr比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)；正常蛋白尿組中觀察組和對(duì)照組治療后GMP-140、CD63 、UAER、SCr均明顯低于治療前(P均<0.05)，但觀察組和對(duì)照組治療后上述指標(biāo)比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)；微量尿蛋白組和臨床蛋白尿組中觀察組和對(duì)照組治療后GMP-140、CD63 、UAER、SCr均明顯低于治療前(P均<0.05)，且觀察組改善情況明顯優(yōu)于對(duì)照組(P均<0.05)。見表3。

3討論

糖尿病腎病的發(fā)生、發(fā)展與多種因素有關(guān)，其中血小板活化和內(nèi)皮細(xì)胞損傷引起的微血栓形成是重要因素[5]。GMP140系選擇素家族黏附分子，表達(dá)于血小板-ɑ顆粒膜表面，當(dāng)血小板活化時(shí)，ɑ顆粒可迅速與血小板膜融合而表達(dá)[6]。CD63活化時(shí)經(jīng)一系列脫粒反應(yīng)表達(dá)于血小板膜表面，介導(dǎo)中性粒細(xì)胞對(duì)活化內(nèi)皮的黏附[7]。近年研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)機(jī)體長(zhǎng)期處于高血糖狀態(tài)時(shí)，GMP-140和CD63快速、大量、穩(wěn)定地表達(dá)在血小板膜表面，通過(guò)凝集素等細(xì)胞表面糖復(fù)合物相互作用，使細(xì)胞黏附力增大，介導(dǎo)活化的內(nèi)皮細(xì)胞與中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞及T淋巴細(xì)胞亞群的黏附功能，參與血栓形成和炎癥反應(yīng)，因而二者表達(dá)增加成為血小板活化的特異性標(biāo)志物[8-9]。

表1　各組一般情況比較

注：1 mmHg=0.133 kPa。

表2　各組治療前后FBG、血脂水平比較

注：①與對(duì)照組比較，P<0.05。

表3　各組治療前后血小板活化功能及腎功能比較±s)

注：① 與對(duì)照組比較，P<0.05。

丹紅注射液是從丹參、紅花中提取有效成分制成的中藥制劑，主要功能為活血化瘀、通絡(luò)止痛。其中丹參有肝素樣作用，能抑制血小板聚集，激活纖溶，抑制微血栓形成，改善微循環(huán)，促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞修復(fù)；能糾正脂代謝紊亂，降低內(nèi)皮素水平，升高NO含量，有效改善血流變各指標(biāo)[10]；紅花有效成分為紅花黃素，能通過(guò)抑制由二磷酸腺苷(ADP)誘導(dǎo)的血小板聚集而抑制凝血，通過(guò)增加纖溶酶的活性促進(jìn)已經(jīng)形成的纖維蛋白原溶解而發(fā)揮抗血栓的功效，因而被稱為活血化瘀之要藥[11]。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，丹紅注射液可通過(guò)抑制核因子κB(NF-κB)、下調(diào)腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)等炎性因子水平而減緩糖尿病腎病的發(fā)展演進(jìn)，保護(hù)腎臟功能；還可降低糖尿病腎病患者血漿AngⅡ水平，減輕腎血管張力，增加腎血流量，減少尿白蛋白排泄率[11-12]。

本研究結(jié)果顯示，丹紅注射液能明顯降低正常蛋白尿組、微量蛋白尿組和臨床蛋白尿組FBG、TG、TC、LDL-C及GMP-140、CD63、 UAER、SCr水平，提高HDL-C水平，且對(duì)于糖尿病腎病患者作用更加明顯。提示丹紅注射液能有效改善不同病情嚴(yán)重程度糖尿病患者的脂代謝紊亂，有效降低尿微量白蛋白排泄率，延緩腎損害，抑制血小板活化，保護(hù)腎功能，建議臨床推廣應(yīng)用。

[參考文獻(xiàn)]

[1]Collins AJ,Foley RN,Herzog C,et al. US Renal Data System 2012 Annual Data Report[J]. Am J Kidney Dis,2013,61(1 suppl1):A7；e1-476

[2]Yang W,Lu J,Weng J,et al. China National Diabetes and Metabolic Disorders Study Group prevalence of diabetes among men and women in China[J]. N Engl J Med,2010,362(12):1090-1101

[3]Arora MK,Singh UK. Molecular mechanisms in the pathogenesis of diabetic nephropathy:An update[J]. Vascul Pharmacol,2013,58(4): 259-271

[4]Kim SH,Chunawala L,Linde R,et al. Comparison of the 1997 and 2003 American Diabetes Association classification of impaired fasting glucose：Impact on prevalence of impaired fasting glucose,coronary heart disease risk factors，and coronary heart disease in a community-based medical practice[J]. J Am Coll Cardiol,2006,48(2):293-297

[5]Niewczas MA,Gohda T,Skupien J,et al. Circulating TNF receptors1 and 2 predict ESRD in type 2 diabetes[J]. J Am Soc Nephrol， 2012,23(3):507-515

[6]Derosa G，Maffioli P. Efficacy and safety profile evaluation of acarbose alone andin association with other antidiabetic drugs:a systematic review[J]. Clin Ther,2012,34(6):1221-1236

[7]李云婷,張雷雷,張巧麗. 血小板活化標(biāo)志物CD62P、CD63在糖尿病患者早期腎臟微血管病變中的表達(dá)[J]. 河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2015,36(5):551-553

[8]李云婷,趙建宏,付潔,等. 血小板活化標(biāo)志物CD62 CD63與血清胱抑素C聯(lián)合檢測(cè)在糖尿病腎病早期診斷的臨床研究[J]. 現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2013,28(1):53-56

[9]李穎,黃偉. 糖尿病腎病患者血清細(xì)胞黏附分子、CDllb、CD62P、CD63的表達(dá)及其臨床意義[J]. 國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2014,35(9):1207-1209

[10] 沙樹偉,王銳,唐南,等. 丹紅注射液對(duì)2型糖尿病血液流變學(xué)的影響[J]. 中國(guó)老年學(xué)雜志,2013,33(16):4070-4071

[11] 高金霞. 丹紅注射液對(duì)2型糖尿病腎病炎癥學(xué)指標(biāo)的影響[J]. 陜西中醫(yī),2013,34(6):708-710

[12] Woolf AS,Gnudil,Long DA. Roles of angiopoietins in kidney development and disease[J]. J Am Soc NAephrol,2009,20(2):239-244

Effect of Danhong injection on platelet activation and renal function in patients with diabetic nephropathy at different severity degree

LI Mingxia,ZUO Lijuan,ZHAO Yifeng,WANG Junfang,ZHANG Bin,LI Xiujuan,ZHANG Zhiying,REN Weidong

(The First Affiliated Hospital of Hebei North College, Zhangjiakou 075000)

Abstract:Objective It is to explore the effect of Danhong injection on platelet activation and renal function in patients with diabetic nephropathy at different severity degree. Methods One hundred and seventy patients with type 2 diabetes (T2DM) were selected in the study. All patients were divided into normal proteinuria (Nor-upor) (55 cases), micro protein urine (Mic-upor) (50 cases) and clinical protein urine (Cli-upor) (65 cases) according to 24h urinary albumin (UAER). All types were divided randomly into observation group and control group,the control group was treated by conventional hypoglycemic and antihypertensive drugs and the observation group was added with Danhong injection by intravenous drip for 2 weeks. The changes of blood glucose, blood lipid, GMP-140, CD63, UAER and SCR were observed before and after treatment. Results There was no significant differences in the level of blood glucose, blood lipid ,UAER, SCR, GMP-140 and CD63 between the two groups before treatment(P>0.05). The level of FBG, HbA1C, TG, TC and LDL-C significantly decreased and the level of HDL-C increased significantly in the observation groups of Nor-upor and Mic-upor, while only the level of FBG decreased significantly in the control group. All the improvements of indicators in the observation group were better than those in the control group (P<0.05). The index significantly improved in two groups of Cli-upor after treatment, but all the indicators in the observation group were significantly higher than those in the control group,and there was statistical significance (P<0.05). The levels of UAER, SCr, GMP-140 and CD63 in the two groups of Nor-upor significantly decreased after treatment, but there was no significant differences. The level of UAER, SCr, GMP-140 and CD63 in two groups of Mic-upor and Cli-upor significantly decreased after the treatment, but the indicators in the observation group were significantly higher than those in the control group,there was statistical significance (P<0.05). Conclusion Danhong injection could significantly decrease the expression of GMP-140 and CD63, inhibit platelet activation,reduce urinary protein and improve renal function in patients with diabetic nephropathy.

Key words:Danhong injection；diabetic nephropathy；platelet activation；renal function

[作者簡(jiǎn)介]李明霞，女，主治醫(yī)師，在職碩士，研究方向?yàn)閮?nèi)分泌疾病臨床診療與基礎(chǔ)研究。 [通信作者]任衛(wèi)東，E-mail:yfynfmsl@163.com

[基金項(xiàng)目]河北省衛(wèi)計(jì)委醫(yī)學(xué)科學(xué)研究重點(diǎn)課題計(jì)劃(20150055)

doi:10.3969/j.issn.1008-8849.2016.20.003

[中圖分類號(hào)]R587.1

[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A

[文章編號(hào)]1008-8849(2016)20-2173-05

[收稿日期]2016-01-25