首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京天壇醫(yī)院中醫(yī)科

賈春蓉　王文娟△(北京 100051)

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益腎法對(duì)原發(fā)性高血壓患者血管內(nèi)皮細(xì)胞NO-NOS系統(tǒng)的影響*

首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京天壇醫(yī)院中醫(yī)科

賈春蓉王文娟△(北京 100051)

提要目的：探討益腎中藥對(duì)原發(fā)性高血壓患者血管內(nèi)皮細(xì)胞一氧化氮—氧化氮合成酶(NO-NOS)系統(tǒng)的影響。方法：觀察30例原發(fā)性高血壓患者采用益腎法治療前后血清一氧化氮(NO)含量、一氧化氮合成酶(NOS)活力及NOS含量的變化。結(jié)果：益腎法治療后，患者NO含量、NOS活力及NOS含量明顯提高(P<0.05)。結(jié)論：益腎法通過對(duì)NO-NOS系統(tǒng)的調(diào)控，從而降低高血壓對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞(VEC)的損傷。

關(guān)鍵詞益腎法；杞菊地黃丸；右歸丸；原發(fā)性高血壓；血管內(nèi)皮細(xì)胞；NO-NOS系統(tǒng)

研究表明，高血壓、高血脂、高血糖等心血管危險(xiǎn)因素均可導(dǎo)致血管內(nèi)皮細(xì)胞(VEC)受損。[1]VEC受損后，其內(nèi)分泌功能失調(diào)，導(dǎo)致其分泌的活性物質(zhì)與其相關(guān)的其他物質(zhì)之間的平衡被打破，從而導(dǎo)致心血管系統(tǒng)功能障礙。[2]因此，如何保護(hù)和修復(fù)VEC損傷，延緩心腦血管疾病的發(fā)展，是臨床急需解決的課題。本課題組前期研究結(jié)果顯示，益腎法能明顯促進(jìn)受損VEC增殖，有效保護(hù)其形態(tài)和超微結(jié)構(gòu)。為進(jìn)一步明確益腎法保護(hù)VEC的作用機(jī)制，本研究從一氧化氮(NO)一氧化氮合成酶(NOS)系統(tǒng)入手，觀察益腎中藥對(duì)原發(fā)性高血壓患者血管內(nèi)皮的影響。

1資料與方法

1.1病例選擇

1.1.1診斷標(biāo)準(zhǔn)及辨證標(biāo)準(zhǔn)：⑴西醫(yī)診斷，參照1999年WHO/ISH四次高血壓指南中的高血壓診斷標(biāo)準(zhǔn)和臨床分期標(biāo)準(zhǔn)；⑵中醫(yī)辨證，參照1995年中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部制定發(fā)布的《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》第二輯中腎陰虛證、腎陽虛證及腎陰陽兩虛證的辨證標(biāo)準(zhǔn)。

1.1.2病例納入標(biāo)準(zhǔn)及排除標(biāo)準(zhǔn)：參照2002年中國(guó)醫(yī)藥科技出版社《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》中“中藥新藥治療高血壓病的臨床研究指導(dǎo)原則”的納入及排除標(biāo)準(zhǔn)。⑴納入標(biāo)準(zhǔn)：符合高血壓病西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)及中醫(yī)辨證標(biāo)準(zhǔn)；年齡在18～65歲之間；以II期高血壓為主要觀察對(duì)象。⑵排除標(biāo)準(zhǔn)：年齡在18歲以下或65歲以上；妊娠或哺乳期婦女；繼發(fā)性高血壓；合并有心、腦、肝、腎和造血系統(tǒng)等嚴(yán)重原發(fā)疾病、精神病患者；過敏體質(zhì)或?qū)Χ喾N藥物過敏者。

符合以上納入標(biāo)準(zhǔn)的患者30例，男17例，女13例，年齡(46.8±11.2)歲。

1.2治療方法采用益腎中藥治療前后自身對(duì)照，治療觀察原發(fā)性高血壓30例。偏腎陰虛證以杞菊地黃丸(枸杞子、菊花、熟地黃、山茱萸、生山藥、牡丹皮、茯苓、澤瀉)為基礎(chǔ)方，偏腎陽虛證以右歸丸(熟地黃、附子、肉桂、山藥、山茱萸、菟絲子、鹿角膠、枸杞子、當(dāng)歸、杜仲)為基礎(chǔ)方，偏腎陰陽兩虛證以二者合方為基礎(chǔ)方。頭暈頭痛甚者加天麻、川芎；惡心嘔吐者加清半夏、生赭石；眠差者加珍珠母、夜交藤；便干者加酒大黃、檳榔。隨證加減。每日1劑，水煎，早晚分2次溫服，治療4周為1個(gè)療程。要求患者治療期間按時(shí)服藥。

1.3觀察指標(biāo)

1.3.1血壓：于治療前、治療第1、2、3、4周分別檢測(cè)血壓。采用臺(tái)式水銀柱血壓計(jì)測(cè)定坐位右上臂血壓，測(cè)前休息10 min，SBP(收縮壓)取Korotkoff第1音，DBP(舒張壓)取第5音，共測(cè)3次，重復(fù)測(cè)量時(shí)間間隔2 min，取平均值。

1.3.2中醫(yī)證候：參照《中藥新藥治療高血壓病的臨床研究指導(dǎo)原則》中的癥狀分級(jí)量化標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)患者治療前后眩暈、頭痛、急躁易怒、腰酸、膝軟、五心煩熱、畏寒肢冷、面赤、目赤、口干、口苦、便秘、溲赤、心悸、失眠、耳鳴、健忘、舌淡、食少、氣短、夜尿頻等中醫(yī)證候進(jìn)行分級(jí)量化評(píng)分。

1.3.3血樣檢測(cè)：治療前后抽取患者靜脈3 mL，室溫靜置2～4 h，2 500 r/min離心20 min分離血清，分別檢測(cè)NO含量、NOS活力及NOS含量。⑴NO含量檢測(cè)：采用南京建成NO試劑盒(硝酸還原酶法)檢測(cè)血清中NO含量。⑵NOS活力檢測(cè)：采用南京建成NOS測(cè)定試劑盒(分光光度法)檢測(cè)血清中NOS活力。⑶NOS含量檢測(cè)：采用ELISA法檢測(cè)血清中NOS含量。

2結(jié)果

2.1血壓治療前后的比較患者血壓治療后降低，與治療前比較，差異有非常顯著性(P<0.001)。詳見表1。

2.2臨床癥狀積分值治療前后的比較患者臨床癥狀積分值(分)治療后降低，與治療前比較，差異有顯著性(P<0.05)。詳見表1。

表1　血壓、臨床癥狀積分值治療前后比較

注：與治療前比較,* P<0.05，**P<0.001

2.3血清NO含量、NOS活力及NOS含量治療前后的比較血清NO含量、NOS活力及NOS含量治療后均有不同程度的升高，與治療前比較，差異有顯著性(P<0.05)。詳見表2。

表2 血清NO含量、NOS活力及NOS含量治療前后濃度比較

時(shí)間NO/μmol·L-1NOS/U·mL-1NOS3/U·mL-1治療前53.60±21.80 25.28±6.26 12.35±3.15 治療后65.00±23.90*31.42±4.32*17.98±5.06*

注：與治療前比較，* P<0.05

3討論

高血壓是臨床常見病、多發(fā)病，長(zhǎng)期的高血壓狀態(tài)會(huì)引起血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷，最終導(dǎo)致一系列心血管疾病的發(fā)生，甚至危及生命，因此減少VEC損傷也是治療高血壓的一項(xiàng)重要任務(wù)。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為高血壓的形成與肝腎陰虛，虛火上擾有關(guān)，同時(shí)又可因腎陽不足，無以鼓動(dòng)陽氣，清竅失養(yǎng)而成。杞菊地黃丸是在大補(bǔ)腎陰的六味地黃丸的基礎(chǔ)上加用補(bǔ)養(yǎng)腎陰的枸杞子與清利頭目的菊花而成，整方補(bǔ)腎陰而清虛火，從而達(dá)到清降血壓之功。右歸丸則以附子、肉桂、鹿角膠為君藥，溫補(bǔ)腎陽，填精補(bǔ)髓；臣以熟地黃、枸杞子、山茱萸、山藥滋陰益腎，養(yǎng)肝補(bǔ)脾，取自陰中求陽之意；佐以菟絲子補(bǔ)陽益陰，固精縮尿；杜仲補(bǔ)益肝腎，強(qiáng)筋壯骨；當(dāng)歸補(bǔ)血養(yǎng)肝。諸藥配合，共奏溫補(bǔ)腎陽，填精益髓，充降血壓之力。本課題組前期研究結(jié)果顯示，益腎法在降壓的同時(shí)，還能明顯促進(jìn)受損VEC增殖，有效保護(hù)其形態(tài)和超微結(jié)構(gòu)，從而可延緩心腦血管疾病的發(fā)生。為了進(jìn)一步明確益腎法保護(hù)VEC的作用機(jī)制，本研究從NO-NOS系統(tǒng)入手，觀察益腎中藥對(duì)原發(fā)性高血壓病患者血管內(nèi)皮的影響，從而明確其保護(hù)作用機(jī)制。

近20年來，西藥在改善VEC功能方面的研究進(jìn)展迅速。血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑、血管緊張素Ⅱ受體阻斷劑、他汀類藥物、抗血小板藥、內(nèi)皮素受體拮抗藥、血栓素A2( TXA2) 拮抗藥等藥物的作用的發(fā)揮是通過不同途徑，如抑制氧化應(yīng)激減少活性氧類(ROS) 的產(chǎn)生，減緩NO 的滅活失效，改善一氧化氮合成酶mRNA 的穩(wěn)定性，減少血漿內(nèi)皮素-1( ET-1) 的合成以及ET-1mRNA 的表達(dá)等，來預(yù)防、改善、修復(fù)血管內(nèi)皮功能的失調(diào)。[3]但相關(guān)的諸多藥物都是兼具該作用，并無專門防治VEC損傷、改善內(nèi)皮功能失調(diào)的藥物。

益腎法是中醫(yī)臨床常用的一種治法。臨床研究表明，該法在治療心血管疾病方面療效確切，如益腎法治療冠心病，可消除癥狀，明顯改善心電圖，同時(shí)不影響患者心率、血壓，無明顯副作用；[4-5]治療動(dòng)脈粥樣硬化，能提高血管彈性，降低患者頸動(dòng)脈厚度，縮小其動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的面積和厚度；[6]治療高脂血癥，能明顯降低總膽固醇水平，并可升高高密度脂蛋白水平。[7]實(shí)驗(yàn)研究表明，益腎法治療動(dòng)脈粥樣硬化，可通過抑制血管細(xì)胞黏附分子表達(dá)、發(fā)揮抗氧化作用、直接促進(jìn)VEC的增殖調(diào)控等方面而對(duì)VEC起保護(hù)作用；[8-10]治療高脂血癥，可通過調(diào)節(jié)凝血、纖溶系統(tǒng)的平衡，調(diào)節(jié)血管收縮與舒張因子的平衡，抗氧化作用等來改善血管內(nèi)皮功能；[11-13]治療冠心病，可通過調(diào)節(jié)血管舒縮物質(zhì)來改善內(nèi)皮功能障礙；[14-15]治療高血壓，可調(diào)節(jié)血管活性物質(zhì)之間的協(xié)調(diào)平衡，逆轉(zhuǎn)高血壓心室重塑。本研究結(jié)果顯示益腎法可降低血壓，改善癥狀，并提高NO含量、NOS活力及NOS含量，說明益腎法通過對(duì)NO-NOS系統(tǒng)的調(diào)控，從而降低高血壓對(duì)VEC的損傷，可為臨床應(yīng)用益腎法防治心血管疾病血管內(nèi)皮損傷提供科學(xué)的依據(jù)。

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(2015-10-16收稿)

Effect of Kidney-tonifying Therapy on VEC NO-NOS System inPatient with Primary Hypertension

TCM Department in Beijing Tiantan Hospital of Capital Medical University

JIAChun-rongWANGWen-juan(Beijing 100051)

AbstractObjective: to explore the effect of Chinese medicine of kidney-tonifying on VEC (vascular endothelial cell) NO-NOS system in patients with primary hypertension. Methods: Observe the changes of NO level, NOS activity and NOS level in 30 cases with primary hypertension before and after treatment with kidney-tonifying therapy. Results: After treatment, NO level, NOS activity and NOS level increased significantly (P<0.05). Conclusion: Kidney-tonifying therapy can reduce the damage on VEC through regulating NO-NOS system.

Key wordskidney-tonifying therapy； Qi Ju Di Huang Wan (Lycii and Chrysanthemi and Rehmanniae Bolus)； You Gui Wan (youguipill)； primary hypertension； VEC (vascular endothelial cell)； NO-NOS system

通訊作者：王文娟，女，副教授，醫(yī)學(xué)博士。

中圖分類號(hào)：R259.441

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1007-5615(2016)02-0009-03

*首都醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)-臨床科研合作項(xiàng)目：No.10JL19

△首都醫(yī)科大學(xué)中醫(yī)藥學(xué)院