李劍，曲芃芃

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HPV E6/E7 mRNA與HPV DNA檢測(cè)在宮頸癌早期篩查中的臨床價(jià)值

李劍1，2，曲芃芃2

摘要：目的分析不同病變程度的宮頸病變患者高危型人乳頭瘤病毒（HPV）DNA和高危型HPV E6/E7 mRNA表達(dá)陽(yáng)性率及拷貝數(shù)的差異，評(píng)估兩者對(duì)宮頸癌早期篩查的臨床價(jià)值。方法收集天津市中心婦產(chǎn)科醫(yī)院2014年因?qū)m頸疾患行陰道鏡下宮頸活檢的154例患者資料和因其他良性婦科疾患行全子宮切除術(shù)的32例患者資料（對(duì)照組），154例根據(jù)宮頸活檢病理結(jié)果分為宮頸上皮內(nèi)瘤變低級(jí)別組（51例）、高級(jí)別組（71例）及宮頸浸潤(rùn)癌組（32例）。應(yīng)用雜交捕獲技術(shù)（HC2）HPV DNA檢測(cè)和熒光定量雜交捕獲技術(shù)HPV E6/E7 mRNA檢測(cè)進(jìn)行定量測(cè)定，并對(duì)全部患者的術(shù)后或?qū)m頸活檢石蠟標(biāo)本進(jìn)行E6/E7蛋白免疫組化檢測(cè)。結(jié)果HC2 HPV DNA檢測(cè)和HPV E6/E7 mRNA檢測(cè)顯示對(duì)照組陽(yáng)性率低于各級(jí)別病變組（P＜0.05），高危型HPV E6/E7 mRNA檢測(cè)的拷貝數(shù)隨著病變級(jí)別的加重而明顯增高，而HC2 HPV DNA檢測(cè)的拷貝數(shù)不隨病變級(jí)別的加重而改變。高級(jí)別組及宮頸浸潤(rùn)癌組患者中，高危型HPV E6/E7 mRNA檢測(cè)拷貝數(shù)＞10 000的患者比例明顯增多。免疫組化結(jié)果顯示對(duì)照組E6/E7陽(yáng)性率低于各級(jí)別病變組，高級(jí)別組、宮頸浸潤(rùn)癌組的E6/E7陽(yáng)性率高于低級(jí)別組（均P＜0.05）。結(jié)論HPV E6/E7 mRNA的表達(dá)及拷貝數(shù)的測(cè)定與宮頸病變程度密切相關(guān)，是宮頸癌早期篩查的有效措施之一，HPV DNA檢測(cè)結(jié)果為陰性時(shí)，其排除疾病意義更高，而mRNA檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性時(shí)，其預(yù)測(cè)疾病發(fā)生及進(jìn)展的價(jià)值更好，兩者結(jié)合使用有利于綜合評(píng)價(jià)發(fā)生宮頸病變的風(fēng)險(xiǎn)。

關(guān)鍵詞：宮頸腫瘤；乳頭瘤病毒；HPV E6/E7 mRNA檢測(cè)；HPV DNA檢測(cè)；宮頸癌早期篩查

宮頸癌是婦科最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，全球每年約有23萬(wàn)女性死于宮頸癌［1］。目前普遍認(rèn)為高危型人乳頭瘤病毒（human papillomavirus，HPV）的持續(xù)感染是發(fā)展成宮頸癌的主要因素，而基因E6、E7 是HPV致癌機(jī)制研究中的重點(diǎn)［2-3］。目前美國(guó)食品和藥品管理局（FDA）已批準(zhǔn)了Aptima HPV作為唯一針對(duì)高危型HPV E6/E7 mRNA的檢測(cè)方法，屬于新一代的檢測(cè)技術(shù)，但在國(guó)內(nèi)尚處于起步階段。本研究應(yīng)用雜交捕獲技術(shù)（HC2）HPV DNA檢測(cè)和熒光定量雜交捕獲技術(shù)HPV E6/E7 mRNA檢測(cè)對(duì)186例患者宮頸脫落細(xì)胞標(biāo)本進(jìn)行測(cè)定，并對(duì)全部患者術(shù)后或?qū)m頸活檢石蠟標(biāo)本進(jìn)行E6/E7蛋白免疫組化檢測(cè)，探討HPV E6/E7 mRNA檢測(cè)與HPV DNA檢測(cè)在宮頸癌早期篩查中的臨床價(jià)值及意義。

1　資料與方法

1.1一般資料收集2014年2月—11月我院門(mén)診因?qū)m頸疾患行陰道鏡下宮頸活檢的154例患者資料，根據(jù)病理活檢結(jié)果分為3組，包括低級(jí)別宮頸上皮內(nèi)瘤變患者（低級(jí)別組）51例，年齡22～64歲，平均（40.6±9.3）歲；高級(jí)別宮頸上皮內(nèi)瘤變患者（高級(jí)別組）71例，年齡25～62歲，平均（41.9±9.0）歲；宮頸浸潤(rùn)癌患者（宮頸浸潤(rùn)癌組）32例，F(xiàn)IGO分期為Ⅰa1～Ⅲb期，年齡32～64歲，平均（42.3±9.1）歲；因其他良性婦科疾患行全子宮切除術(shù)的32例患者作為對(duì)照組，年齡35～68歲，平均（42.8±8.9）歲。4組患者年齡差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=1.317，P＞0.05）。4組既往均無(wú)盆腔放療史、急性生殖道炎癥及宮頸物理治療史。

1.2試劑及設(shè)備高危型HPV E6/E7 mRNA檢測(cè)：96孔檢測(cè)板及宮頸穩(wěn)態(tài)試劑盒購(gòu)自河南科帝亞生物技術(shù)有限公司。HPV DNA檢測(cè)：檢測(cè)板及采樣工具包購(gòu)自美國(guó)Digene公司。兩實(shí)驗(yàn)均使用美國(guó)Diacarta公司臺(tái)式冷光儀及QS071型恒溫箱；DAB顯色試劑盒及免疫組織化學(xué)SP試劑盒購(gòu)自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司；抗HPV16/18 E6單抗購(gòu)自美國(guó)Miltenyi-Biotec公司；HPV16 E7鼠抗人單克隆抗體購(gòu)自美國(guó)Invitrogen公司。

1.3方法

1.3.1高危型HPV E6/E7 mRNA檢測(cè)標(biāo)本采集：使用新柏氏液基細(xì)胞學(xué)（TCT）檢測(cè)專用刷插入患者宮頸管旋轉(zhuǎn)8～10周，收集宮頸口及宮頸管脫落的上皮細(xì)胞，將刷頭置入CytoRich保存液瓶中待檢。實(shí)驗(yàn)步驟：將待檢標(biāo)本液經(jīng)2次水平離心（3 000 r/min）5 min后，倒掉上清液，加入裂解液及蛋白酶K，放入恒溫箱65℃約1.5 h，中間每隔30 min取出標(biāo)本振蕩搖勻，加入96孔檢測(cè)板，同時(shí)設(shè)立空白對(duì)照2孔及陽(yáng)性質(zhì)控2孔。通過(guò)2種捕獲探針捕獲目的mRNA，經(jīng)3級(jí)信號(hào)放大，添加底物及底物催化劑，使連接了堿性磷酸酶的標(biāo)記探針雜交結(jié)合放大分子，添加底物，再使其與底物結(jié)合，從而產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光信號(hào)，信號(hào)強(qiáng)度與mRNA數(shù)量呈正相關(guān)，經(jīng)冷光儀檢測(cè)出目的mRNA數(shù)量，以拷貝數(shù)為單位計(jì)算。拷貝數(shù)＞0為陽(yáng)性；拷貝數(shù)＜4 000為低危風(fēng)險(xiǎn)；4 000～10 000為中危風(fēng)險(xiǎn)；拷貝數(shù)＞10 000為高危風(fēng)險(xiǎn)。

1.3.2HPV DNA檢測(cè)標(biāo)本采集：使用采樣工具包檢測(cè)專用刷插入患者宮頸管旋轉(zhuǎn)8～10周，收集宮頸口及宮頸管脫落的上皮細(xì)胞，將刷頭置入CytoRich保存液瓶中待檢。將待檢標(biāo)本首先溶解，解鏈和變性核酸，釋放HPV DNA單鏈；再將全長(zhǎng)病毒RNA探針與HPV病毒靶DNA結(jié)合，形成RNA/ DNA復(fù)合物，該復(fù)合物被包被在微孔板上的抗體捕獲，抗體特異性結(jié)合RNA/DNA復(fù)合物；最后用二抗結(jié)合捕獲后的復(fù)合物，二抗偶聯(lián)有堿性磷酸酶，加入堿性磷酸酶的底物，產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光信號(hào)，經(jīng)冷光儀檢測(cè)出目的DNA的數(shù)量，以拷貝數(shù)為單位計(jì)算，拷貝數(shù)＞0者為陽(yáng)性。

1.3.3E6/E7蛋白免疫組織化學(xué)SP法檢測(cè)對(duì)全部186例患者術(shù)后或?qū)m頸活檢石蠟標(biāo)本進(jìn)行切片，本實(shí)驗(yàn)使用的SP法，采用生物素標(biāo)記的二抗與鏈霉素抗生素蛋白鏈接的過(guò)氧化物酶及底物色素相混合，測(cè)定細(xì)胞或組織中的抗原。實(shí)驗(yàn)結(jié)果以細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒作為陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 17.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，組間比較采用方差分析，組間多重比較采用Dunnett's T3法。計(jì)數(shù)資料采用例（%）表示，組間比較用Χ2檢驗(yàn)，多組比較檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05，進(jìn)一步4組兩兩比較時(shí)檢驗(yàn)水準(zhǔn)進(jìn)行Bonferroni校正α′=0.008 3。

2　結(jié)果

2.1高危型HPV E6/E7 mRNA檢測(cè)結(jié)果低級(jí)別組、高級(jí)別組和宮頸浸潤(rùn)癌組HPV E6/E7 mRNA陽(yáng)性率及拷貝數(shù)均高于對(duì)照組，且后2組HPV E6/E7 mRNA陽(yáng)性率（90.1%、93.8%）高于低級(jí)別組（72.5%）和對(duì)照組（21.9%）。HPV E6/E7 mRNA檢測(cè)的拷貝數(shù)隨病變級(jí)別的加重而增多，高級(jí)別組與宮頸浸潤(rùn)癌組mRNA拷貝數(shù)多＞10 000，對(duì)照組和低級(jí)別組mRNA拷貝數(shù)多＜4 000。見(jiàn)表1。

2.2HPV DNA檢測(cè)結(jié)果低級(jí)別組、高級(jí)別組和宮頸浸潤(rùn)癌組DNA陽(yáng)性率及拷貝數(shù)均高于對(duì)照組，但3個(gè)病變組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見(jiàn)表2。

Tab.1　Results of HPV E6/E7 mRNA test in four groups of patients表1　4組患者HPV E6/E7 mRNA檢測(cè)結(jié)果

Tab.2　Results of HPV DNA test in four groups of patients表2　4組患者HPV DNA檢測(cè)結(jié)果

2.3HPV病毒E6/E7蛋白的表達(dá)結(jié)果4組患者E6/E7陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。低級(jí)別組、高級(jí)別組與宮頸浸潤(rùn)癌組均高于對(duì)照組，且后2組蛋白陽(yáng)性率均高于低級(jí)別組，但該2組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見(jiàn)表3，圖1、2。

Tab.3　Results of HPV E6/E7 protein expression in four groups of patients表3　4組患者HPV病毒E6/E7蛋白表達(dá)結(jié)果　例（%）

Fig.1　Expression of E6/E7 by immunohistochemistry（SP，×100）圖1　E6/E7免疫組織化學(xué)染色結(jié)果（SP，×100）

3　討論

3.1高危型HPV E6/E7 mRNA檢測(cè)的研究現(xiàn)狀研究預(yù)計(jì)宮頸癌的死亡人數(shù)將在近十年內(nèi)上升25%，發(fā)達(dá)國(guó)家因?qū)m頸癌篩查防治措施逐步完善，發(fā)病率已逐年減低，但大多數(shù)發(fā)展中國(guó)家的宮頸癌發(fā)病率卻呈上升趨勢(shì)［3］。目前普遍認(rèn)為高危型HPV的持續(xù)感染是發(fā)展成宮頸癌的主要因素［4］，而早期基因E6、E7是HPV致癌機(jī)制研究中的重點(diǎn)。當(dāng)其表達(dá)失去抑制后將逐步導(dǎo)致宮頸癌。E6結(jié)合并滅活腫瘤抑制因子P53，E7結(jié)合并降解抑制蛋白pRb，最終導(dǎo)致細(xì)胞無(wú)限分裂而不發(fā)生凋亡［5］。早診斷、早治療是提高子宮頸癌患者生存率及改善其生存質(zhì)量的關(guān)鍵。目前美國(guó)FDA相繼批準(zhǔn)了4個(gè)宮頸癌相關(guān)高危型HPV檢測(cè)，前3種屬于第一代的高危型HPV DNA檢測(cè)方法，而AptimaHPV屬新一代唯一針對(duì)高危型HPV E6/E7 mRNA的檢測(cè)方法。本研究顯示，低級(jí)別組與高級(jí)別組及宮頸浸潤(rùn)癌組HPV DNA陽(yáng)性率相似，且HPV DNA檢測(cè)的拷貝數(shù)并未隨著病變級(jí)別的加重而增加；而高危型HPV E6/E7 mRNA檢測(cè)中，低級(jí)別組陽(yáng)性率低于高級(jí)別組及宮頸浸潤(rùn)癌組，且高危型HPV E6/E7 mRNA檢測(cè)的拷貝數(shù)隨著病變級(jí)別的加重而明顯增多。提示HPV E6/E7 mRNA檢測(cè)可能敏感度較高。

3.2高危型HPV E6/E7 mRNA檢測(cè)的臨床價(jià)值高危型HPV E6/E7 mRNA檢測(cè)中危風(fēng)險(xiǎn)以上（拷貝數(shù)＞4 000）的陽(yáng)性表達(dá)提示：宮頸上皮細(xì)胞有高危型HPV病毒的感染，癌基因E6/E7處于復(fù)制活動(dòng)期，病變處于轉(zhuǎn)化活躍期，患者癌變風(fēng)險(xiǎn)逐漸增加；在病毒感染的早期，病毒基因在細(xì)胞內(nèi)為游離狀態(tài)，此時(shí)E6/E7基因處于靜默期，不表達(dá)或低表達(dá)mRNA，一過(guò)性感染大多數(shù)處于這個(gè)階段［6］。有研究指出HPV DNA檢測(cè)敏感度約為95%，而mRNA檢測(cè)的敏感度為75%～91%；但特異度mRNA檢測(cè)為56%～97%，而DNA僅為40%～47%［7-8］。HPV DNA檢測(cè)陽(yáng)性似然比為1.1～1.9，而mRNA檢測(cè)陽(yáng)性似然比為2.0～5.8。也就是說(shuō)，當(dāng)mRNA檢測(cè)陽(yáng)性時(shí)，患者有宮頸病變的可能性更高。HPV DNA檢測(cè)陰性似然比為0.03～0.20，mRNA檢測(cè)陰性似然比為0.16～0.29，提示DNA陰性時(shí)，患者無(wú)宮頸病變的可能性更大?？傊?，宮頸癌篩查時(shí)，HPV DNA檢測(cè)結(jié)果為陰性時(shí)排除疾患的價(jià)值更高，而mRNA檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性時(shí)預(yù)測(cè)疾患的價(jià)值更好［9］。評(píng)價(jià)一個(gè)好的篩查方法，雖然難以要求其確診功能，但其應(yīng)該既不遺漏真正患病的患者，也能較好地排除非患病人群，不給隨訪者帶來(lái)較大的心理負(fù)擔(dān)。根據(jù)美國(guó)癌癥協(xié)會(huì)（American Cancer Society，ACS）、美國(guó)陰道鏡和宮頸病理學(xué)會(huì)（American Society for Colposcopy and Cervical Pathology，ASCCP）發(fā)布的宮頸癌篩查指南，不建議對(duì)30歲以下人群采取常規(guī)HPV DNA檢測(cè)，因約70%～80%的女性在一生中有可能感染HPV，90%感染者可在8～24個(gè)月內(nèi)自然清除，只有少數(shù)持續(xù)性、高危型HPV感染有可能導(dǎo)致宮頸病變或?qū)m頸癌［10-11］。由于宮頸癌患者有年輕化趨勢(shì)，而HPV E6/ E7 mRNA檢測(cè)具有良好的陽(yáng)性預(yù)測(cè)功能，應(yīng)用該指標(biāo)進(jìn)行30歲以下人群的篩查，找出高危人群，對(duì)宮頸癌的早期發(fā)現(xiàn)具有一定的臨床意義［12］。聯(lián)合細(xì)胞學(xué)檢測(cè)，有效分流意義未明的不典型鱗狀細(xì)胞（ASCUS）及低度鱗狀上皮內(nèi)病變（LSIL）者，可以減輕患者的心理負(fù)擔(dān)，節(jié)約寶貴的醫(yī)療資源，具有極大的社會(huì)經(jīng)濟(jì)學(xué)效益。此外，對(duì)于宮頸上皮內(nèi)瘤變患者治療后的隨訪，利用HPV E6/E7 mRNA檢測(cè)可有效評(píng)估復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)。

總之，對(duì)于HPV DNA檢測(cè)已日趨成熟，HPV E6/E7 mRNA檢測(cè)方興未艾，兩者結(jié)合使用有利于綜合評(píng)估患者發(fā)生宮頸病變的風(fēng)險(xiǎn)。

參考文獻(xiàn)

［1］Li HL，Yin LR，Sun JJ.Association between hTERT gene amplification and high-risk HPV infection in cervical lesions［J］.Tianjin Med J，2014，42（2）：127-130.［李洪林，尹利榮，孫俊杰.宮頸病變中hTERT基因擴(kuò)增與高危型HPV感染的關(guān)系［J］.天津醫(yī)藥，2014，42（2）：127-130］.doi：10.3969/j.issn.0253-9896.2014.02.009.

［2］Liu SJ，Yin LR，Li HL.E6/E7 mRNA expression level in cervical lesions with high-risk HPV infection［J］.Tianjin Med J，2015，43（2）：186-188.［劉甚佳，尹利榮，李洪林.高危型HPV感染宮頸病變中E6/E7 mRNA的表達(dá)水平［J］.天津醫(yī)藥，2015，43（2）：186-188］.doi：10.3969/j.issn.0253-9896.2015.02.019.

［3］Matsukura T，Sugase M.Pitfalls in the epidemiologic classification of human papillomavirus types associated with cervical cancer using polymerase chain reaction：driver and passenger［J］.Int J Gynecol Cancer，2008，18（5）：1042-1050.doi：10.1111/j.1525-1438.2007. 01157.x.

［4］Clifford GM，Smith JS，Plummer M，et al.Human papillomavirus types in invasive cervical cancer worldwide：a meta-analysis［J］.Br JCancer，2003，88（1）：63-73.

［5］Pim D，Banks L.Interaction of viral oncoproteins with cellular target molecules：infection with high-risk vs low-risk human papillomaviruses［J］.APMIS，2010，118（6/7）：471-493.doi：10.1111/ j.1600-0463.2010.02618.x.

［6］Mockel J，Quaas J，Meisel H，et al.Human papillomavirus E6/E7 mRNA testing has higher specificity than liquid-based DNA testing in the evaluation of cervical intraepithelial neoplasia［J］.Anal Quant Cytol Histol，2011，33（6）：311-315.

［7］Clda A，Reuschenbach M，Weinschenk J，et al.Performance of the Aptima high-risk human papillomavirus mRNA assay in a referral population in comparison with Hybrid Capture 2 and cytology［J］.J Clin Microbiol，2011，49（3）：1071-1076.doi：10.1128/JCM.01674-10.

［8］Burger EA，Kornor H，Klemp M，et al.HPV mRNA test for the detection of cervical intraepithelial neoplasia：a systematic review［J］.Gynecol Oncol，2011，120（3）：430-438.doi：10.1016/j.ygyno.2010.11.013.

［9］Benevolo M，Vocaturo A，Caraceni D，et al.Sensitivity，specificity，and clinical value of human papillomavirus（HPV）E6/E7 mRNA assay as a triage test for cervical cytology and HPV DNA test［J］.J Clin Microbiol，2011，49（7）：2643-2650.doi：10.1128/JCM.02570-10.

［10］Moyer VA，U.S.Preventive Services Task Force.Screening for cervical cancer：U.S.Preventive Services Task Force recommendation statement［J］.Ann Intern Med，2012，156（12）：880-891.doi：10.7326/0003-4819-156-12-201206190-00424.

［11］Saslow D，Solomon D，Lawson HW，et al.American Cancer Society，American Society for Colposcopy and Cervical Pathology，and American Society for Clinical Pathology screening guidelines for the prevention and early detection of cervical cancer［J］.Am J Clin Pathol，2012，137（4）：516-542.doi：10.1309/AJCPTGD94EVRSJCG.

［12］Molden T，Kraus I，Karlsen F，et al.Comparison of human papillomavirus messenger RNA and DNA detection：a cross-sectional study of 4，136 women＞30 years of age with a 2-year follow-up of high-grade squamous intraepithelial lesion［J］.Cancer Epidemiol Biomarkers Prev，2005，14（2）：367-372.

（2015-11-25收稿2015-12-06修回）

（本文編輯李鵬）

The clinical value of HPV E6/E7 mRNA and HPV DNA in early screening of cervical cancer

LI Jian1，2，QU Pengpeng2
1 Graduate School of Tianjin Medical University，Tianjin 300070，China；2 Tianjin Central Hospital of Gynecology Obstetrics Corresponding AuthorE-mail：18622059808@163.com

Abstract：ObjectiveTo analyze the differences of positive detection rate and copy number of human papillomavirus （HPV）DNA and E6/E7 mRNA between different grades of cervical lesions，and evaluate their clinical values in early screening of cervical cancer.MethodsThe cervical exfoliated cell samples from 154 women undergoing biopsy examination and 32 objects undergoing hysterectomy（control group）were collected in Tianjin Central Hospital of Gynecology Obstetrics in 2014.According to the pathological results of cervical biopsy，154 samples were divided into low-grade squamous intraepithelial lesion group（LSIL，n=51），high-grade squamous intraepithelial lesion group（HSIL，n=71），and squamous cell carcinoma group（SCC，n=32）.HPV DNA was tested with hybrid capture technology，and E6/E7 mRNA was detected with fluorescence quantitative hybridization.Immunohistochemistry was performed by detecting E6/E7 protein in all patients after surgery or cervical biopsy.ResultsCombined results of HPV DNA and E6/E7 mRNA demonstrated that the positive detection rate was significantly lower in control group than that of all levels of lesion groups（P＜0.05）.The copy number of high risk HPV E6/E7 mRNA was significantly increased with the aggravation of lesions（P＜0.05），whereas no difference was found in that of HPV DNA.Compared with the normal control and low-grade squamous intraepithelial lesion group，cervical cancer patients with mRNA copies＞10 000 E6/E7 were significantly increased in high-grade squamous intraepithelial lesion group.Immunohistochemical results showed that the positive detection rate of E6/E7 was significantly lower in control group than that of all levels of lesion groups（P＜0.05）.The positive rate of E6/E7 was significantly higher in the high-grade squamous intraepithelial lesion group than that of low-grade group（P＜0.05）.ConclusionHPV infection is closely related tocervical abnormalities，which is one of effective measures for early screening of cervical cancer.The negative result of HPV DNA is very helpful to exclude the cervical abnormality，whereas the positive detection of mRNA has great value in predicting the disease.Combined results of positive detection and copy number make a comprehensive evaluation for the risk of cervical lesions.

Key words：uterine cervical neoplasms；human papillomavirus；HPV E6/E7 mRNA detection；HPV DNA detection；early cervical cancer screening

中圖分類號(hào)：R737.33

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

DOI：10.11985/20150342

基金項(xiàng)目：天津市科技計(jì)劃項(xiàng)目（09ZCZDSF03900）

作者單位：1天津醫(yī)科大學(xué)研究生院（郵編300070）；2天津市中心婦產(chǎn)科醫(yī)院

作者簡(jiǎn)介：李劍（1978），女，主治醫(yī)師，主要從事婦科腫瘤臨床研究

通訊作者E-mail：18622059808@163.com