于娟，丁漢榮

(1.寧波市第九醫(yī)院 內(nèi)科，浙江 寧波 315000；2.寶雞市鳳翔中醫(yī)院 內(nèi)科，陜西 寶雞 721400)

黃芪注射液對(duì)糖尿病患者血清氧自由基、TGF-β1及血管內(nèi)皮功能的干預(yù)作用

于娟Δ，丁漢榮

(1.寧波市第九醫(yī)院 內(nèi)科，浙江 寧波 315000；2.寶雞市鳳翔中醫(yī)院 內(nèi)科，陜西 寶雞 721400)

目的 探討黃芪注射液對(duì)糖尿病患者血清氧自由基、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(transforming growth factor-β，TGF-β1)及血管內(nèi)皮功能的影響。方法 選取2010年12月～2014年12月寧波市第九醫(yī)院內(nèi)科收治的2型糖尿病患者124例，采用隨機(jī)數(shù)字表法分為觀察組和對(duì)照組，觀察組聯(lián)合黃芪注射液，對(duì)照組予二甲雙胍片，比較2組患者谷胱甘肽過氧化物酶(glutathione peroxidase，GSH-PX)、過氧化酶超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)、丙二醛(malondialdehyde，MDA)以及超前氧化蛋白產(chǎn)物(advanced oxidation protein products，AOPP)的含量，血清TGF-β1及血管生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)、血管生成素1(angiogenin，ANG-1)水平。結(jié)果 治療后，觀察組患者血清中MDA、AOPP含量低于對(duì)照組，GSH-PX、SOD含量高于對(duì)照組；觀察組TGF-β1低于對(duì)照組；觀察組VEGF、ANG-1高于對(duì)照組(P<0.05)。結(jié)論 黃芪注射液可以改善糖尿病患者血管內(nèi)皮功能，降低TGF-β1，改善自由基聚集狀態(tài)。

黃芪注射液；糖尿??；氧自由基；TGF-β1；血管內(nèi)皮功能

糖尿病(diabetes mellitus)是一種有多重因素引起的代謝紊亂性疾病，因其損害血管微循環(huán)，而容易引起心臟、腎臟、視網(wǎng)膜、神經(jīng)等病變[1]。轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(transforming growth factor-β1，TGF-β1)已被證明與糖尿病合并心肌纖維化及腎臟疾病有關(guān)。過氧化酶超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)和谷胱甘肽過氧化物酶(glutathione peroxidase，GSH-PX)是體內(nèi)及其重要的抗氧化物質(zhì)，若體內(nèi)諸如丙二醛(malondialdehyde，MDA)及超前氧化蛋白產(chǎn)物(advanced oxidation protein products，AOPP)等氧化應(yīng)激所產(chǎn)生的物質(zhì)增多，可明顯降低體內(nèi)SOD及GSH-PX，進(jìn)而反過來(lái)造成胰島素不足，加重自由基代謝紊亂程度及糖尿病程度[2]。血管生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)及血管生成素(ANG)具有強(qiáng)大的促血管形成能力及促血管通透效應(yīng)，對(duì)于維持微循環(huán)正常功能起著重要作用[3]。糖尿病研究多涉及藥物對(duì)血糖的影響，而對(duì)于糖尿病生化因子的研究較少。本文旨在探討黃芪注射液對(duì)糖尿病患者血清氧自由基、TGF-β1及血管內(nèi)皮功能的影響效果，具體報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2010年12月～2014年12月寧波市第九醫(yī)院內(nèi)科收治的2型糖尿病患者124例。依據(jù)1999年世界衛(wèi)生組織糖尿病專家委員會(huì)制定標(biāo)準(zhǔn)，具體如下：①有典型多尿、煩渴和無(wú)其他誘因的體質(zhì)量下降的糖尿病癥狀，并且隨機(jī)血糖(任意時(shí)間的血糖值)≥11.1 mmol/L；②空腹血糖(至少8h內(nèi)無(wú)熱量攝入)≥7.0 mmol/L；③OGTT時(shí)2 h血糖≥11.1 mmol/L。納入標(biāo)準(zhǔn)：①住院之前未使用任何藥物治療的初發(fā)患者；②進(jìn)行葡萄糖耐量試驗(yàn)前24 h之內(nèi)未使用影響胰島素分泌的藥物；③無(wú)糖尿病急、慢性并發(fā)癥；④胰島素、C肽釋放高峰在180 min之前；⑤既往未使用降糖藥物；⑥無(wú)嚴(yán)重軀體疾??；⑦志愿參加本研究。排除標(biāo)準(zhǔn)：①糖尿病酮癥酸中毒；②合并感染；③合并嚴(yán)重心、肝、腎功能不全者；4孕婦及哺乳者。入選患者中，男65例，女59例；年齡35～70歲，平均(56.5±7.2)歲；病程<6個(gè)月，采用隨機(jī)數(shù)字表法，分為觀察組和對(duì)照組，各62例，2組患者在年齡、性別等一般資料方面比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.2 方法

1.2.1 治療方法：所有患者在入院當(dāng)天行糖尿病教育及飲食、運(yùn)動(dòng)治療。對(duì)照組在此基礎(chǔ)上采用二甲雙胍常規(guī)治療，鹽酸二甲雙胍片(天津太平洋制藥有限公司；國(guó)藥準(zhǔn)字號(hào)：H12020797)0.5 g/次，3次/天，觀察組在此基礎(chǔ)上聯(lián)合黃芪注射液(神威藥業(yè)集團(tuán)有限公司；國(guó)藥準(zhǔn)字號(hào)：Z13020999)(30+250)mL0.9NaCl注射液靜滴治療，1次/天，連續(xù)治療1個(gè)月。

1.2.2 觀察指標(biāo)：治療后1月時(shí)，采集2組患者外周血 5 mL， 離心得到血清后采用放射免疫沉淀法測(cè)定GSH-PX、SOD、MDA以及AOPP的含量，采用ELISA測(cè)定血清TGF-β1、VEGF及ANG-1含量。

2 結(jié)果

2.1 2組患者TGF-β1比較 治療后，2組患者TGF-β1均下降，且觀察組下降更明顯，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 2組患者TGF-β1比較

#P<0.05，與對(duì)照組比較，compared with control group

2.2 2組患者VEGF、ANG-1比較 2組患者VEGF、ANG-1均較治療前升高，且觀察組升高更明顯，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 2組患者VEGF、ANG-1比較

*P<0.05，與同組治療前比較，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，與對(duì)照組治療后比較，compared with control group post-treatment

2.3 2組氧化應(yīng)激反應(yīng)程度 治療后，觀察組患者血清中MDA、AOPP含量低于對(duì)照組，GSH-PX、SOD含量高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表3 2組患者的臨床情況比較

#P<0.05，與對(duì)照組比較，compared with control group

3 討論

2型糖尿病是一種由多種基因和環(huán)境共同產(chǎn)生的復(fù)雜性疾病，其病因和發(fā)病機(jī)制眾多，其中細(xì)胞因子、自由基及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的作用越來(lái)越受到重視。其中TGF-β1是近年最受關(guān)注的多功能細(xì)胞因子，具有廣泛的生物學(xué)作用，TGF-β1是一種與組織纖維環(huán)關(guān)系最密切的膠原家族中的細(xì)胞因子[4]，多項(xiàng)研究證實(shí)，TGF-β1與糖尿病并發(fā)癥的發(fā)生發(fā)展相關(guān)，尤其是糖尿病腎小球病變的重要因素。2型糖尿病患者及動(dòng)物模型中普遍存在胰島素纖維環(huán)現(xiàn)象，胰島纖維化破壞胰島正常組織結(jié)構(gòu)，降低胰島功能，減少β細(xì)胞數(shù)量，進(jìn)而減少胰島素分泌量[5-7]。研究顯示，體內(nèi)血糖升高可增加TGF-β1水平，損傷血管，上調(diào)局部TGF-β1水平，激活下游多種信號(hào)途徑，刺激血管平滑肌細(xì)胞增殖和遷移，最終導(dǎo)致胰島纖維化變[8]。

由氧誘發(fā)產(chǎn)生的自由基，稱為氧自由基，占體內(nèi)自由基活力的大部分，為各種慢性病及老化的罪魁禍?zhǔn)住Ｌ悄虿』颊唧w內(nèi)自由基含量增多，SOD、GSH-PX等相對(duì)不足，機(jī)體減少胰島素合成量，造成胰島素絕對(duì)不足或相對(duì)不足，反過來(lái)又進(jìn)一步加重自由基代謝紊亂。MDA、GSH-PX和SOD是體內(nèi)重要的抗氧化物質(zhì)，當(dāng)氧自由基不斷生成時(shí)，會(huì)大量消耗體內(nèi)的抗氧化物質(zhì)，表現(xiàn)為GSH-PX和SOD含量低下[9]。MDA是最重要的細(xì)胞膜中脂質(zhì)成分被氧化后的產(chǎn)物，AOPP是細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)成分被氧化后的產(chǎn)物，兩者含量能夠反應(yīng)氧化應(yīng)激反應(yīng)的程度以及氧自由基的生成量[10-12]。在組織內(nèi)的含量直接反映機(jī)體脂質(zhì)過氧化的速度和強(qiáng)度。自由基主要作用是破壞線粒體結(jié)構(gòu)，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，核轉(zhuǎn)錄因子kB信號(hào)通路被激活，誘發(fā)細(xì)胞炎癥反應(yīng)，胰十二指腸同源盒因子1的核質(zhì)易位被抑制，進(jìn)而抑制能量代謝，并減少胰島素合成和分泌量，激發(fā)機(jī)體氧化應(yīng)激反應(yīng)誘導(dǎo)胰島素抵抗的發(fā)生[13]。

近年，研究發(fā)現(xiàn)糖尿病合并大血管病變患者有新生血管形成，在大量參與新生血管形成的細(xì)胞因子中，除VEGF外，ANG同時(shí)也發(fā)揮了重要作用。高血糖損害內(nèi)皮功能，伴隨葡萄糖氧化過程中出現(xiàn)大量氧自由基、活性氧簇刺激活化多元醇途徑，進(jìn)而活化蛋白激酶C，與蛋白糖基化終末產(chǎn)物共同促進(jìn)血管內(nèi)皮損傷[14-15]。

糖尿病屬中醫(yī)“消渴”病范疇，以陰虛燥熱為基本病機(jī)，所以益氣滋陰，滋陰清熱太陰，是治療糖尿病的基本大法，脾為太陰，乃三陰之長(zhǎng)，故治陰虛者，當(dāng)以滋脾為主，脾陰足，自能灌溉諸臟腑。黃芪甘、微溫，入脾肺經(jīng)，有益氣養(yǎng)元，扶正祛邪的作用。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)，黃芪可抑制糖尿病大鼠腎臟肥大，繼而抑制腎皮質(zhì)TGF-β蛋白作用就基因過度表達(dá)，進(jìn)而降低血清TGF-β1水平。

結(jié)果顯示，經(jīng)常規(guī)糖尿病治療聯(lián)合黃芪注射液后，可以更好地降低TGF-β1、MDA、AOPP，升高VEGF、ANG-1、GSH-PX、SOD(P<0.05)。說明黃芪注射液可以改善糖尿病患者血管內(nèi)皮功能，降低轉(zhuǎn)化因子-β1，改善自由基聚集狀態(tài)。研究觀察病例數(shù)量少，周期短，下一步研究可選取更多的病例進(jìn)行研究，并從動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方面研究黃芪注射液作用與糖尿病患者的治療機(jī)理，進(jìn)而為黃芪注射液治療糖尿病提供更加可靠的依據(jù)。

[1] 呂福應(yīng)，郭國(guó)才，黎敦鎮(zhèn)，等.糖化血紅蛋白對(duì)糖尿病診療和并發(fā)癥風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)的臨床價(jià)值[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2015(11)：1591-1592.

[2]趙偉，陳光敏，常柏，等.利拉魯肽對(duì)糖尿病大鼠腎組織局部腎素-血管緊張素系統(tǒng)活性及轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1表達(dá)的影響[J].中華糖尿病雜志，2014(7)：543-547.

[3]馮欣，李垚.高糖狀態(tài)下大鼠腎小球系膜細(xì)胞Ang-2、Tie-2、VEGF的變化及氯沙坦對(duì)其的影響[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2011，27(5)：742-744.

[4]李慧，方敬愛，張曉東，等.益腎膠囊對(duì)糖尿病腎病大鼠腎組織TGF-β1及Smad7表達(dá)的影響[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志，2014，15(3)：194-196.

[5]韓文兵，李平，趙婷婷，等.柴黃益腎顆粒對(duì)糖尿病并發(fā)肝損傷大鼠TGF-β1及GLUT-1的調(diào)控作用研究[J].中日友好醫(yī)院學(xué)報(bào)，2012，26(6)：348-352.

[6]遲秀娥，王元松，田風(fēng)勝，等.三黃益腎膠囊對(duì)糖尿病大鼠腎臟轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子表達(dá)的影響[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2010，16(14)：143-146.

[7]郭兵，肖瑛，萬(wàn)昌武，等.糖尿病大鼠腎小管TGF-β1和MAPK1/3表達(dá)的動(dòng)態(tài)觀察[J].中國(guó)病理生理雜志，2004，20(9)：1681-1685.

[8]方瑜潔.高血糖對(duì)肝纖維化大鼠血清中TGF-β1、CTGF含量的影響[J].臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2014(11)：865-866，867.

[9]張克烽，張子平，陳蕓，等.動(dòng)物抗氧化系統(tǒng)中主要抗氧化酶基因的研究進(jìn)展[J].動(dòng)物學(xué)雜志，2007，42(2)：153-160.

[10]王有根.原發(fā)性高血壓合并2型糖尿病患者血清MDA和紅細(xì)胞中SOD測(cè)定的意義[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2011，26(4)：227，230.

[11]郝文立.糖尿病并發(fā)下肢潰瘍患者血漿丙二醛和輔酶Q10水平的變化及意義[J].中國(guó)基層醫(yī)藥，2015(16)：2504-2506.

[12]王艷秋.血清脂聯(lián)素與丙二醛及超氧化物歧化酶在糖尿病周圍神經(jīng)病變患者的相關(guān)性研究[J].中國(guó)現(xiàn)代藥物應(yīng)用，2016，10(2)：21-22.

[13]丁潯，涂萍，吳和平，等.針刺對(duì)2型糖尿病患者胰島素抵抗及脂肪細(xì)胞因子水平的影響[J].中國(guó)全科醫(yī)學(xué)，2013，16(10)：1184-1186.

[14]郭金婷，王玉梅.血管生成素在糖尿病微血管病變中的調(diào)節(jié)作用[J].國(guó)際泌尿系統(tǒng)雜志，2011，31(2)：229-232.

[15]顧紅衛(wèi)，倪兆慧，顧樂怡，等.血管生成素在糖尿病大鼠腎組織中的表達(dá)及氯沙坦的作用[J].中國(guó)血液凈化，2010，9(1)：32-36.

(編校：王儼儼)

Effect of astragalus injection on serum oxygen free radical, TGF-β1 and vascular endothelial function in diabetes mellitus

YU JuanΔ, DING Han-rong

(1.Department of Internal Medicine, Ninth Hospital of Ningbo, Ningbo 315000, China; 2.Fengxiang Baoji Chinese Medicine Hospital, Baoji 721400, China)

ObjectiveTo investigate the effect of astragalus injection on serum oxygen free radical, TGF-β1 and vascular endothelial function in diabetes mellitus.Methods120 cases of type 2 diabetic patients were selected from December 2010 to December 2014 as the object of study, 2 groups of patients underwent diabetic education and diet, exercise therapy, the control group were treated with metformin hydrochloride tablets, and the observation group were combined with astragalus injection, the contents of SOD, MDA and GSH-PX were compared between the 2 groups.The serum levels of TGF-β1, VEGF, ANG-1 and AOPP were compared between 2 groups.ResultsAfter treatment, comared with control group, the serum MDA and AOPP were higher, the GSH-PX and SOD were higher; the TGF-β1 were lower; the VEGF and ANG-1 were higher in observation group(P<0.05).ConclusionAstragalus injection could improve the function of vascular endothelium in patients with diabetes, reduce the transforming growth factor β1, improving the free radical aggregation state.

astragalus injection; diabetes mellitus; oxygen free radical; TGF-β1; vascular endothelial function

10.3969/j.issn.1005-1678.2016.09.033

于娟，通信作者，女，本科，主治醫(yī)師，研究方向：內(nèi)科，E-mail：yujuan000zj@163.com。

R587.1

A