李永光，李文濱

（東北農(nóng)業(yè)大學(xué)大豆研究所，哈爾濱　15500003300）

?

如何進(jìn)行轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的檢測*

李永光，李文濱****

（東北農(nóng)業(yè)大學(xué)大豆研究所，哈爾濱15500003300）

第一作者：李永光，博士，助理研究員，主要研究方向大豆生物技術(shù)

**通訊作者：李文濱，博士，教授，主要研究方向大豆遺傳育種，E-mail: wenbinli@neau.edu.cn

近30年來，轉(zhuǎn)基因食品的生產(chǎn)發(fā)展十分迅猛，各國都紛紛投入大量的人力、物力和財(cái)力進(jìn)行研究，就連聯(lián)合國前秘書長安南也曾在聯(lián)合國大會(huì)上贊揚(yáng)轉(zhuǎn)基因食品是“繼綠色革命后的一次藍(lán)色革命”［1］。因此，轉(zhuǎn)基因食品的安全問題也逐漸引起各國的關(guān)注，許多國家加強(qiáng)了對轉(zhuǎn)基因食品的安全性評估和風(fēng)險(xiǎn)性分析，并制定了相應(yīng)的管理法規(guī)。轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的檢測已經(jīng)納入了國內(nèi)外檢驗(yàn)檢疫部門的檢測項(xiàng)目。

轉(zhuǎn)基因作物的檢測主要是從染色體水平、轉(zhuǎn)錄組水平、蛋白組水平以及代謝組水平對外源基因及其表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行檢測，主要是針對外源轉(zhuǎn)入基因的核苷酸序列以及蛋白表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行檢測。轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的檢測方法要求快速、準(zhǔn)確、靈敏，適應(yīng)樣品量大、目標(biāo)基因種類繁多等特點(diǎn)。

檢測外源基因核苷酸序列的方法有常規(guī)性PCR，實(shí)時(shí)熒光定量PCR，基因芯片和微陣列，高通量測序，生物傳感器技術(shù)等［2］。一般來說，對樣品中的轉(zhuǎn)基因成分進(jìn)行檢測的流程如下：

（1）是否含有轉(zhuǎn)基因成分：檢測樣品中是否含有轉(zhuǎn)基因作物的通用元件、標(biāo)記基因等；

（2）具體含有什么轉(zhuǎn)基因的作物品系：通過品系特異性的鑒定方法來確認(rèn)基因成分屬于某個(gè)特定的轉(zhuǎn)基因品系；

（3）含有多少轉(zhuǎn)基因成分：利用定量PCR的方法確定樣品中轉(zhuǎn)基因成分的具體含量［3］。因DNA較RNA和蛋白質(zhì)具有更好的穩(wěn)定性，已經(jīng)成為轉(zhuǎn)基因檢測中最主要的靶標(biāo)分析對象。目前，轉(zhuǎn)基因生物檢測主要是通過聚合鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）進(jìn)行。PCR檢測方法因具有快速、靈敏、費(fèi)用低、檢測僅需微量的DNA，并且可以同時(shí)檢測多個(gè)樣品的特點(diǎn)，正成為這一領(lǐng)域日趨成熟的方法之一。

檢測外源蛋白表達(dá)產(chǎn)物的方法主要采用免疫學(xué)檢測法，即Western雜交、酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）和免疫層析試紙法［4］。ELISA具備了酶反應(yīng)的高靈敏度和抗原抗體反應(yīng)的特異性，具有簡便、快速和費(fèi)用低等特點(diǎn)，但易出現(xiàn)本底過高的問題，且只能檢測目的蛋白抗原性沒有明顯變化的粗加工產(chǎn)品。側(cè)向流動(dòng)免疫測定試紙條是一種快速簡便的定性檢測方法，將試紙條放在待測樣品抽提物中，5～10 min就可得出結(jié)果，不需要特殊儀器和熟練技能，適合種業(yè)公司和農(nóng)戶使用。

隨著轉(zhuǎn)基因植物的種植面積逐年增加，轉(zhuǎn)基因食品的安全問題越來越受到大家的重視。經(jīng)典的定性定量PCR的檢測方法依然是公認(rèn)的通用方法，而新技術(shù)的涌現(xiàn)更給大家?guī)砹讼Ｍ汉怂岬葴財(cái)U(kuò)增技術(shù)不需要溫度的循環(huán)和精密的儀器；毛細(xì)管電泳檢測方法逐步實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化；而芯片檢測技術(shù)更使高通量檢測成為可能。

［參考文獻(xiàn)］

［1］蔡八弟.中國轉(zhuǎn)基因食品商業(yè)化，何去何從?［J］.法制與經(jīng)濟(jì), 2007（7）: 7-8.

［2］Querci M, Van B M, Zel J, et al. New approaches in GMO detec?tion［J］. Anal Bioanal Chem, 2010, 396（6）: 1991-2002.

［3］張建中,劉鐵男,張海波,等.轉(zhuǎn)基因生物核酸檢測新技術(shù)研究進(jìn)展［J］.上海農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào), 2011, 27（1）: 117-120.

［4］Stave J W. Protein immunoassay methods for detection of biotech crops: applications, limitations, and practical considerations［J］. J AOAC Int, 2002, 85（3）: 780-786.

中圖分類號：Q344

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B

文章編號：1674-3547（2016）02-0003-02

收稿日期：2016-03-31

*基金項(xiàng)目：抗逆轉(zhuǎn)基因大豆新品種培育（2014ZX08004002）