王　攀　晉其云　王東紅　楊昌偉　鄭家深

(遵義醫(yī)學院附屬醫(yī)院核醫(yī)學科，貴州　遵義　563003)

血清鱗狀細胞癌抗原和組織蛋白酶-D檢測在宮頸鱗癌診治中的應用價值

王攀晉其云1王東紅2楊昌偉鄭家深

(遵義醫(yī)學院附屬醫(yī)院核醫(yī)學科，貴州遵義563003)

〔摘要〕目的探討血清鱗狀細胞癌抗原(SCCAg)和組織蛋白酶(Cath)-D水平檢測對宮頸鱗癌的臨床應用價值。方法采用酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)檢測血清中SCCAg和Cath-D的水平。分為宮頸鱗癌組35例；宮頸上皮內(nèi)瘤變組(CIN組)25例；慢性宮頸炎組25例。宮頸鱗癌組在術(shù)前、術(shù)后分別檢測血清SCCAg和Cath-D濃度，分析其對宮頸鱗癌預后的情況。CIN、慢性宮頸炎組僅檢測術(shù)前血清SCCAg和Cath-D水平，分析血清SCCAg和Cath-D水平與宮頸鱗癌臨床病理特征、手術(shù)療效的關系。結(jié)果宮頸鱗癌組術(shù)前血清SCCAg和Cath-D水平明顯高于CIN、慢性宮頸炎組(P=0.001，0.000)， 兩組之間無統(tǒng)計學差異(P=0.432、0.321)。宮頸鱗癌組術(shù)后1年內(nèi)未復發(fā)患者動態(tài)檢測SCCAg和Cath-D水平呈進行性下降(P=0.02，0.04)。宮頸鱗癌組術(shù)前血清SCCAg和Cath-D水平與臨床分期、腫瘤體積、分化程度、間質(zhì)浸潤、盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等有關(P<0.05)；計算血清SCCAg和Cath-D診斷宮頸鱗癌及預測盆腔淋巴轉(zhuǎn)移的臨界值分別為0.95、3.21和17.33、20.25ng/L，ROC曲線下面積分別為0.91、0.78和0.95、0.90；同時對SCCAg和Cath-D進行相關性分析，二者在宮頸鱗癌組織中表達呈顯著正相關。結(jié)論血清SCCAg和Cath-D檢測對宮頸鱗癌具有很高的診斷價值，聯(lián)合檢測對宮頸鱗癌術(shù)后療效、預后判斷及預測盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等方面具有更高參考價值。

〔關鍵詞〕宮頸鱗癌；鱗狀細胞癌抗原 ；組織蛋白酶D

宮頸癌中宮頸鱗癌居多〔1〕。目前應用鱗狀細胞癌抗原(SCCAg)和組織蛋白酶D(Cath-D)同時檢測對宮頸鱗癌診療的應用價值國內(nèi)報道較少〔2，3〕，本文旨在檢測血清SCCAg和Cath-D水平對宮頸鱗癌診斷、術(shù)后療效觀察及預判轉(zhuǎn)移的應用價值。

1資料與方法

1.1一般資料收集2009年1月至2011年12月本院病理活檢確診、住院并實施標準手術(shù)治療的宮頸鱗癌老年患者35例為宮頸鱗癌組，年齡55～68歲，平均(60±2.1)歲；按照FIGO分期，其中IA2 期5例，IB1期8例，IB2期10例，ⅡA期12例。病理確診的宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)25例為CIN組，慢性宮頸炎25例為慢性宮頸炎組。所有病例均排除妊娠、支氣管囊腫、肺結(jié)核、牛皮癬及濕疹等其他疾病。組別間進行年齡比較無統(tǒng)計學意義(P=0.215)。隨訪宮頸鱗癌組在手術(shù)后1、2、4、26、52 w分別檢測SCCAg和Cath-D水平，CIN組和慢性宮頸炎組僅在手術(shù)前檢測一次血清SCCAg和Cath-D水平。

1.2檢測方法靜脈抽血3 ml，3 000 r/min分離血清置于-80℃冷凍保存待檢。SCCAg和Cath-D采用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)方法檢測，試劑由上海信裕生物科技有限公司提供，檢測儀器為荷蘭WellscanMK2酶標儀，嚴格按照操作步驟進行檢測。

1.3結(jié)果判斷選擇本院體檢健康女性25例(經(jīng)過婦科檢查及宮頸刮片確診)檢測SCCAg和Cath-D水平，確定本次實驗SCCAg和Cath-D的參考值，SCCAg的95%可信區(qū)間為0.1～1.5 ng/ml，≥1.5 ng/ml為陽性，Cath-D的95%可信區(qū)間為4.3～7.5 ng/L，≥7.5 ng/L為陽性。

1.4統(tǒng)計學方法采用SPSS17.0軟件繪制ROC曲線，計算曲線下面積(AUC)和標準誤。AUC小于0.70表示準確度較低，0.70～0.90為中等，0.90以上表示較高〔4〕。

2結(jié)果

2.1三組血清SCCAg和Cath-D水平比較宮頸鱗癌組術(shù)前SCCAg和Cath-D水平顯著高于CIN組及慢性宮頸炎組(P=0.001、0.000)，而CIN組與慢性宮頸炎組SCCAg和Cath-D水平比較無統(tǒng)計學差異(P=0.432、0.321)。見表1。

2.2宮頸鱗癌組手術(shù)前后血清SCCAg和Cath-D水平變化隨訪1年未復發(fā)的宮頸鱗癌組，在手術(shù)后1、2、4、26、52 w分別檢測SCCAg和Cath-D水平，其水平呈進行性下降，表明與宮頸鱗癌療效和預后密切相關。見表2。

2.3宮頸鱗癌組術(shù)前血清SCCAg和Cath-D水平與不同病理參數(shù)的關系手術(shù)前血清SCCAg和Cath-D水平與臨床分期、腫瘤體積、分化程度、間質(zhì)浸潤深度、是否有脈管癌栓、宮旁轉(zhuǎn)移、盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等均明顯相關(P<0.05)，且與臨床分期、分化程度、間質(zhì)浸潤深度存在一定的線性相關性(P<0.05)。見表3。

表1　三組血清SCCAg與Cath-D檢測水平比較(四分位數(shù))

表2　宮頸鱗癌組手術(shù)前后血清SCCAg和Cath-D水平

2.4應用ROC曲線分析SCCAg和Cath-D水平對宮頸鱗癌的診斷價值及預測盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移性能評價依據(jù)敏感度與特異度之和最大化原則計算血清SCCAg和Cath-D診斷宮頸鱗癌及預測盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的臨界值，為0.95 ng/ml、3.21 ng/ml和17.33 ng/L、20.25 ng/L，敏感度為0.76、0.66和0.91、0.89，特異度為0.85、0.87和0.89、0.90，陽性預測值為0.84、0.55和0.87、0.72，陰性預測值為0.78、0.90和0.90、0.95。SCCAg診斷宮頸鱗癌準確度較高，預測盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移準確度為中等，而Cath-D對宮頸鱗癌診斷和預測盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的準確度均較高。見表4。

2.5對SCCAg和Cath-D水平進行相關性分析對宮頸鱗癌患者在手術(shù)前和手術(shù)后1、2、4、26、52 w的SCCAg和Cath-D水平進行相關性分析，二者具有分好的相關性。見表5。

表3　宮頸鱗癌組不同病理參數(shù)的SCCAg與Cath-D術(shù)前檢測結(jié)果(四分位數(shù))

1)線性趨勢檢驗

表4　血清SCCAg與Cath-D診斷宮頸鱗癌及預測盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的AUC、標準誤、P值及95%可信區(qū)間

表5　宮頸鱗癌組血清SCCAg和Cath-D手術(shù)前后的

3討論

宮頸鱗癌的病因尚不完全清楚，國內(nèi)外認為其發(fā)生發(fā)展是多基因共同作用的結(jié)果，相關致癌因子通過各種物質(zhì)作用機制激活原發(fā)基因，使細胞增殖和凋亡紊亂〔5〕。目前臨床對宮頸鱗癌的診斷尚無統(tǒng)一及規(guī)范的腫瘤標志物〔6〕，因此尋找早期診斷和預測的標志物是提高宮頸癌診療的關鍵。而SCCAg存在于鱗狀細胞的胞質(zhì)內(nèi)，是腫瘤相關抗原TA-4的亞單位，作為一種腫瘤標志物與各種器官的鱗狀細胞癌相關〔7〕。當鱗狀細胞異常增生時，就會被動表達SCCAg并釋放到人體外周血中，誘導細胞毒性T細胞的免疫活性，激發(fā)機體對腫瘤的免疫應答〔8〕。Cath-D是一種52 kD的含天冬氨酸的糖蛋白，是存在于細胞內(nèi)溶酶體中物質(zhì)，有分解細胞內(nèi)蛋白、激活細胞內(nèi)酶原和激素的作用，當腫瘤組織細胞代謝加強時，隨著腫瘤的發(fā)展Cath-D也會明顯升高〔9〕，有研究顯示〔10〕，在多種腫瘤患者體內(nèi)的Cath-D均有高度表達。

SCCAg和Cath-D水平在宮頸鱗癌組術(shù)前顯著高于正常宮頸組及慢性宮頸炎組，可能是因為手術(shù)摘除腫瘤瘤體后，消除了腫瘤分泌源〔11〕直接導致結(jié)果下降。因此，血清SCCAg和Cath-D水平測定可以作為診斷宮頸鱗癌重要指標，同時也是手術(shù)療效和預后判定的標志。

資料還顯示，血清SCCAg和Cath-D水平表達與腫瘤臨床分期、分化程度、瘤體大小、腫瘤浸潤深度、脈管癌栓及盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有直接關系，與Gadducci等〔12〕、丁洪慧等〔13〕報道高度一致。其機制如下：①可能是宮頸鱗癌侵犯鱗狀細胞基層，腫瘤中的SCCAg容易通過血管、淋巴管進入外周血導致水平增高；隨著其臨床分期的上升，SCCAg水平也不斷升高；同時腫瘤細胞在惡性生長時期，鱗狀細胞基因表達和調(diào)控失常，受到浸潤生長及分化程度的影響，參與凋亡調(diào)控的細胞高表達SCCAg，使得癌細胞通過抑制細胞凋亡途徑，而對機體相關的細胞自殺機制產(chǎn)生抵抗性有關〔14〕。②Cath-D水平同樣與腫瘤臨床分期、分化程度、瘤體大小、腫瘤浸潤深度及盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移直接相關，可能是Cath-D隨腫瘤周圍組織代謝升高，同時抑制了自噬體的活性，使得Cath-D的表達隨著腫瘤病情加重而不斷升高，Cath-D同時刺激癌細胞的生長，降解基膜和結(jié)締組織、破壞宿主細胞外基質(zhì)天然屏障，有利于腫瘤細胞侵襲，使得Cath-D纖溶酶原的水解片段有抑制血管生成作用，在缺氧條件下導致的環(huán)氧化酶2的表達使得血管密度增加〔15〕。SCCAg和Cath-D二者在宮頸鱗癌中的表達存在高度正相關，說明SCCAg和Cath-D在宮頸鱗癌中的發(fā)生發(fā)展、分化程度、侵襲、轉(zhuǎn)移等過程中具有相互調(diào)控、誘導或信息傳遞的協(xié)同作用，具體作用機制有待進一步研究。本研究表明，SCCAg診斷宮頸鱗癌價值較高，預測盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移價值中等，而Cath-D對宮頸鱗癌診斷和預測盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移都具有很高的價值。

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〔2015-03-10修回〕

(編輯苑云杰)

〔中圖分類號〕R737.33

〔文獻標識碼〕A

〔文章編號〕1005-9202(2016)11-2680-03；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.11.051

1遵義婦女保健兒童醫(yī)院兒童保健科

2遵義醫(yī)學院附屬醫(yī)院婦科

第一作者：王攀(1975-)，男，副教授，主要從事腫瘤標志物的研究。