柴曉菲，孫亞冬，張　冰，劉　慧，于慶凱

(1.鄭州大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院病理科，河南 鄭州 450008；2.鄭州大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院乳腺科，河南 鄭州 450008)

浸潤性導(dǎo)管癌原發(fā)灶CD3和CD20的表達(dá)與臨床病理及預(yù)后指標(biāo)的相關(guān)性分析

柴曉菲1，孫亞冬2，張冰1，劉慧1，于慶凱1

(1.鄭州大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院病理科，河南 鄭州 450008；2.鄭州大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院乳腺科，河南 鄭州 450008)

[摘要]目的研究CD3+和CD20+淋巴細(xì)胞在浸潤性導(dǎo)管癌原發(fā)灶中的表達(dá)及其與預(yù)后的關(guān)系。方法入組100例乳腺癌患者石蠟包埋病理標(biāo)本，采用免疫組化法檢測浸潤性導(dǎo)管癌原發(fā)灶中CD3+淋巴細(xì)胞、CD20+淋巴細(xì)胞與臨床病理及預(yù)后的關(guān)系。結(jié)果100例乳腺癌患者原發(fā)灶中，CD3+ 96例(96.0%)，CD20+ 54例(54.0%)，原發(fā)灶CD3+淋巴細(xì)胞的百分率與臨床分期、組織學(xué)分級及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)有關(guān)(P<0.05)。結(jié)論乳腺癌原發(fā)灶有淋巴細(xì)胞浸潤，CD3+與病變的嚴(yán)重程度密切相關(guān)。

[關(guān)鍵詞]CD3；CD20；浸潤性導(dǎo)管癌；免疫組織化學(xué)

在腫瘤免疫抑制機(jī)制中，腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞起到非常重要的作用,主要有T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞及NK細(xì)胞等，這些細(xì)胞在乳腺癌原發(fā)灶聚集，發(fā)揮抵抗腫瘤的作用，這些細(xì)胞與治療效果和生存率相關(guān)[1]，T淋巴細(xì)胞主要參與細(xì)胞免疫，而B淋巴細(xì)胞主要參與體液免疫，兩者共同參與抗腫瘤免疫應(yīng)答過程。

1材料與方法

1.1材料收集選取鄭州大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院病理科2012年1月至2014年1月80例浸潤性導(dǎo)管癌石蠟包埋標(biāo)本，術(shù)前均未接受放療和化療，術(shù)后病理結(jié)果均經(jīng)我院2位以上病理科醫(yī)生確認(rèn)，且都有完整的臨床病理資料。

1.2實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1免疫組化選取病灶明顯的組織，切4～5 μm的切片，烘烤，脫蠟，梯度酒精水化，修復(fù)，孵育滅活過氧化物酶等預(yù)處理后，加入一抗(CD3或CD20抗體)，4攝氏度孵育過夜，漂洗復(fù)溫，加二抗37 ℃孵育30 min，PBS液漂洗、DAB顯色、蘇木素復(fù)染，PBS代替一抗作對照。

1.2.2結(jié)果判斷方法400倍高倍鏡下隨機(jī)選取5個視野，CD3和CD20均為細(xì)胞膜著色。顯色強(qiáng)度依次為：深棕色為3分，棕色為1分，黃色或淺棕色為1分，不顯色為0分。顯色面積依次為：>50%細(xì)胞為3分,25%～50%細(xì)胞為2分,<25%細(xì)胞為1分,<5%為0分。顯色的強(qiáng)度與面積的乘積，<2定為陰性(-)，≥2定為陽性(+)[2]。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理用SPSS 14.0處理相關(guān)數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料采用百分?jǐn)?shù)表示，比較采用χ2檢驗(yàn)或Fisher確切概率法，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2結(jié)果

浸潤性導(dǎo)管癌瘤內(nèi)和瘤周存在CD3+和CD20+淋巴細(xì)胞，100例乳腺癌患者原發(fā)灶中CD3+96例(96.0%)，CD20+54例(54.0%)。CD3+淋巴細(xì)胞浸潤與臨床分期、組織學(xué)分級及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)有關(guān)(P<0.05)。見表1。

3討論

一旦發(fā)生腫瘤，機(jī)體很快產(chǎn)生針對腫瘤抗原的免疫應(yīng)答反應(yīng)，細(xì)胞免疫及體液免疫，細(xì)胞免疫占主導(dǎo)地位，少數(shù)情況下，細(xì)胞免疫起到協(xié)同作用。對黑色素瘤[3]、結(jié)直腸癌[4]、卵巢癌[5]等實(shí)體瘤的研究發(fā)現(xiàn)，原發(fā)灶中淋巴細(xì)胞的浸潤往往提示預(yù)后較好。早在1992年，Aaltomaa等[6]報(bào)道乳腺癌原發(fā)灶中淋巴細(xì)胞的浸潤提示較好的預(yù)后。目前，淋巴細(xì)胞在乳腺癌中的研究主要集中在三陰性乳腺癌及HER-2陽性乳腺癌中[7]。

本研究結(jié)果表明，100例乳腺癌患者原發(fā)灶中CD3+96例(96.0%)，CD20+54例(54.0%)，CD3+淋巴細(xì)胞浸潤與臨床分期、組織學(xué)分級及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)有關(guān)(P<0.05)。初步表明T淋巴細(xì)胞在乳腺癌的發(fā)生發(fā)展過程中起到重要作用，而B淋巴細(xì)胞起到次要作用。這與國內(nèi)張同先等[8]研究結(jié)果部分一致，但與國內(nèi)蔣正華[9]研究結(jié)果相反，分析原因可能是樣本量小、病例群體地區(qū)不同、結(jié)果判讀重復(fù)性差等。

表1CD3和CD20在浸潤性導(dǎo)管癌

原發(fā)灶中的表達(dá)及其與臨床病理關(guān)系

項(xiàng)目nCD3-+PCD20-+P年齡/歲 <45222200.20910120.954 ≥45782763642腫瘤直徑/cm <2461450.62226250.631 ≥2543512529臨床分期 Ⅰ22319139 Ⅱ421410.02914280.086 Ⅲ360361917組織學(xué)分級 Ⅰ274231512 Ⅱ480480.00425230.622 Ⅲ25025169ER +752730.26032430.247 -252231411PR +624580.29425370.146 -380382117Her-2 +222200.20912100.363 -782763444淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移 是302280.00714160.930 否702683238

一直以來，乳腺癌患者的預(yù)后情況多與乳腺癌組織的病理分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)、激素受體和細(xì)胞增殖指數(shù)Ki-67的表達(dá)水平有關(guān)。本研究涉及預(yù)后指標(biāo)ER、PR、Her-2等，但與CD3和CD20表達(dá)并無相關(guān)性，有待于進(jìn)一步隨訪深入了解其與預(yù)后的關(guān)系。

綜上所述，乳腺癌原發(fā)灶大多有淋巴細(xì)胞浸潤，CD3+與病變的嚴(yán)重程度相關(guān)。

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[9]蔣正華，韓旭.腫瘤浸潤T淋巴細(xì)胞在乳腺癌原發(fā)灶中的表達(dá)與預(yù)后的關(guān)系[J].中國現(xiàn)代醫(yī)生，2015，53(6):12-16.

CD3 and CD20 Expressions of Original Site and the Correlation with Clinical Pathology and Prognosis Index in the Infiltrating Ductal Carcinoma

Chai Xiaofei1,Sun Yadong2,Zhang Bing1,Liu Hui1,Yu Qingkai1

(1.DepartmentofPathology,theCancerHospitalofZhengzhouUniversity,Zhengzhou450008,China;2.DepartmentofBreastSurgery,theCancerHospitalofZhengzhouUniversity,Zhengzhou450008,China)

[Abstract]ObjectiveTo research the CD3 and CD20 expressions and its relationship with prognosis in the primary infiltrating ductal carcinoma.MethodsThe 100 cases of breast carcinoma paraffin embedding pathologic specimens were collected,immunohistochemical detection was used to detect CD3+ lymphocytes,CD20+ lymphocytes in the primary infiltrating ductal carcinoma and the relationship with clinical pathology and prognosis.ResultsOf the 100 cases of breast carcinoma,CD3+ for 96 cases (96.0%),CD20+ 54 cases (54.0%),CD3+ lymphocyte infiltration was related with clinical stage,histological grade and lymph node status (P<0.05).Conclusionlymphocytes infiltration is mostly found in the breast carcinoma primary tumors,and CD3+ lymphocytes related to the degree of pathological changes.

[Key words]CD3; CD20; infiltrating ductal carcinoma; immunohistochemistry

作者簡介：柴曉菲(1983-)，女，碩士，主治醫(yī)師，主要從事腫瘤病理診斷工作。E-mail：chai1861@163.com 通信作者：于慶凱(1957-)，女，博士，主任醫(yī)師，主要從事腫瘤病理診斷工作。E-mail：yuqingkai@hotmail.com

DOI:10.3969/j.issn.1673-5412.2016.03.002

[中圖分類號]R737.9；R730.23

[文獻(xiàn)標(biāo)識碼]A

[文章編號]1673-5412(2016)03-0191-03

(收稿日期：2015-12-13)