程雯，翟東霞，張丹英，姚睿嬪，王汝倩，俞超芹

(第二軍醫(yī)大學長海醫(yī)院中醫(yī)系，上海　200433)

亞洲人群CYP17(-34T/C)基因多態(tài)性與子宮內膜異位癥易感性的Meta分析

程雯，翟東霞，張丹英，姚睿嬪，王汝倩，俞超芹*

(第二軍醫(yī)大學長海醫(yī)院中醫(yī)系，上海200433)

【摘要】目的應用Meta分析探討亞洲人群中細胞色素氧化酶17基因(CYP17)(-34T/C) 基因多態(tài)性和子宮內膜異位癥(EMs)易感性的關系。方法檢索Pubmed、中國知網(wǎng)、萬方、中國生物醫(yī)學文獻數(shù)據(jù)庫(CBM)等中、英文數(shù)據(jù)庫中發(fā)表的關于亞洲人群CYP17 (-34T/C)基因多態(tài)性和EMs易感性的文獻。對文獻進行質量評價、篩選和提取相關病例對照研究資料，利用R軟件進行Meta 分析，計算合并的比數(shù)比(OR)及其95%可信區(qū)間(CI)。結果 共納入文獻6篇，累計病例組662例，對照組937例。分析結果顯示：等位基因對比模型(T vs. C)：OR=1.283，95%CI：0.948-1.737；雜合子模型(TC vs. CC)：OR=1.181，95%CI：0.919-1.518；純合子模型(TT vs. CC)：OR=1.612，95%CI：0.899-2.889；顯性模型(TT+TC vs. CC)：OR=1.320，95%CI：0.932-1.871；隱性模型(TT vs. TC+CC)：OR=0.716，95%CI：0.456-1.123。結論本次Meta分析結果顯示，在亞洲人群中CYP17(-34T/C)基因多態(tài)性與EMs易感性并無顯著相關性，但需要開展更多設計細致、實施良好的大樣本量病例-對照研究以得到更科學可信的結論。

【關鍵詞】CYP17；基因多態(tài)性；子宮內膜異位癥；Meta分析

Methods： Databases from Pubmed，CNKI，Wanfang and CBM were collected，and the relevant papers and literatures were analyzed by Meta-analysis. Crude odds ratio (OR) with 95% confidence interval (CI) was used to assess the strength of association.

Results： A total of 6 studies including 662 patients and 937 controls were identified. The pooled results showed no association between polymorphism T→C of geneCYP17 and endometriosis risk in the Asian population (T vs. C：OR=1.283，95%CI：0.948-1.737；TC vs. CC：OR=1.181，95%CI：0.919-1.518；TT vs. CC：OR=1.612，95%CI：0.899-2.889；TT+TC vs. CC：OR=1.320，95%CI：0.932-1.871 and TT vs. TC+CC：OR=0.716，95%CI：0.456-1.123).

Conclusions： The meta-analysis suggested that polymorphism of gene CYP17(-34T/C)was not associated with endometriosis susceptibility in Asian population. Considering the limited sample size and ethnicity included in our meta-analysis，an updated meta-analysis needs to be conducted when more well-designed studies are published.

(JReprodMed2016，25(6)：487-492)

子宮內膜異位癥(EMs)是子宮內膜種植于子宮腔以外部位的婦科疾病，已有研究證實EMs具有一定的遺傳特征[1]。育齡婦女中EMs的發(fā)病率約為10%～15%，它是導致婦女痛經(jīng)、不孕以及盆腔疼痛等癥狀的重要原因之一，EMs的發(fā)生嚴重影響育齡婦女的生活質量[2]。因此，探索EMs的發(fā)病機制并尋找有效的治療手段是婦科領域刻不容緩的課題之一。

基因多態(tài)性已經(jīng)證實與EMs發(fā)病具有一定的聯(lián)系，其中以激素合成、代謝相關的基因研究最多，例如CYP17。CYP17基因位于10號染色體，在激素合成中起著重要作用[3]。CYP17(-34T/C)多態(tài)位點位于5’非編碼區(qū)翻譯起始點-34 bp處，T-C突變后單個堿基的替換產(chǎn)生了限制性內切酶MspA1的酶切位點，繼而產(chǎn)生兩種等位基因Al(T)和A2(C)[4]，當?shù)任换駻2存在時，可以增加基因的轉錄效率，提高酶的活性，使雌激素合成增多，誘發(fā)EMs[5]。CYP17(-34T/C)基因多態(tài)性與EMs易感性的研究較多，然而，分子流行病學結果(尤其是在不同人種中的結果)并不一致[6-7]。目前的研究主要集中在歐洲的白種人及亞洲的黃種人，其中涉及白種人的研究可查到3篇，分別涉及英國人[8]、土耳其人[9]及意大利人[10]，3篇研究的結果一致，提示CYP17(-34T/C)基因多態(tài)性與EMs發(fā)病無顯著相關性；涉及亞洲人的研究較多，地區(qū)涉及日本、中國大陸及中國臺灣等，但研究結果存在較大差異，尚無統(tǒng)一結論。本文擬采用Meta分析更精確地評估亞洲人群中CYP17(-34T/C)基因多態(tài)性與EMs易感性之間的關系。

資料與方法

一、數(shù)據(jù)收集

通過計算機檢索Pubmed、Elesevier等外文文獻數(shù)據(jù)庫中2015年6月前公開發(fā)表的文獻，檢索關鍵詞包括 CYP17、cytochrome P450c17 gene、endometriosis、genetic polymorphism、SNP、gene mutation，依次分別組合。檢索中國知網(wǎng)(CNKI)、萬方、維普、中國生物醫(yī)學文獻數(shù)據(jù)庫(CBM)、中文生物醫(yī)學期刊/會議文獻數(shù)據(jù)庫(CMCC/CMAC)等中文文獻數(shù)據(jù)庫在2015年6月前公開發(fā)表的期刊、會議文獻、學位論文，檢索詞為子宮內膜異位癥、CYP17、細胞色素氧化酶17基因、基因多態(tài)性、突變、SNP，依次分別組合。手工檢索全國婦產(chǎn)科學術會議及中國中西醫(yī)結合學會婦產(chǎn)科專業(yè)委員會會議論文集；查閱檢索到所有文獻的參考文獻索引，手工檢索相關文獻。

二、文獻納入標準和排除標準

納入標準：(1)有關亞洲人群的CYP17(-34T/C)基因多態(tài)性與EMs發(fā)病風險的原始研究；(2)運用獨立的病例-對照試驗設計；(3)可獲得基因型分布頻數(shù)或相關數(shù)據(jù)；(4)各研究中，對照群體基因型分布均符合Hardy-Weinberg(HWE)平衡。

排除標準：非臨床論著(包括綜述、Meta分析等)、研究對象為非亞洲人群、重復報告、文獻中不能準確獲得CYP17的各基因型分布、對照群體基因型分布顯著偏離HWE平衡的研究。

三、質量控制

(1)嚴格根據(jù)入選標準收集相關文獻及數(shù)據(jù)；(2)由兩位研究者分別對文獻進行整理、摘錄。并交叉核對納入文獻的結果，對有分歧的文獻通過討論或由第3位研究者決定其是否納入。(3)數(shù)據(jù)庫建立，數(shù)據(jù)由雙人提取并雙機錄入，以確保數(shù)據(jù)提取和錄入的準確性。

四、統(tǒng)計學分析

通過計算下列基因型模型獲得OR值及其95%CI，用以評估亞洲人群的CYP17(-34T/C)基因多態(tài)性與EMs發(fā)病風險的關聯(lián)強度?；蛐湍Ｐ停旱任换驅Ρ饶Ｐ?T vs. C)、雜合子模型(TC vs. CC)、純合子模型(TT vs. CC)以及顯性模型(TT+TC vs. CC)和隱性模型(TT vs. TC+CC)。根據(jù)異質性(I2)大小選擇合適的效應模型，I2>50%時選擇隨機效應模型；I2≤50%時選擇固定效應模型。發(fā)表偏倚應用Egger’s test進行評價，P<0.05為有發(fā)表偏倚。上述統(tǒng)計分析均采用R軟件(R-3.2.0)進行，P<0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

結果

一、研究資料的基本情況

根據(jù)我們的檢索條件，共6篇文獻納入研究(納入流程見圖1，所有文獻的基因頻率分布見表1)，其中中國大陸[11-12]、中國臺灣[13-14]、日本[8，15]各兩篇研究。一共662例EMs患者和937例對照個體納入本Meta分析。

圖1　文獻篩選流程圖

二、Meta分析

各基因模型合并結果及異質性如下：等位基因對比模型(T vs. C)：OR=1.283，95%CI：0.948-1.737，I2=76.1%(圖 2)；雜合子模型(TC vs. CC)：OR=1.181，95%CI：0.919-1.518，I2=0%(圖 3)；純合子模型(TT vs. CC)：OR=1.612，95%CI：0.899-2.889，I2=73.4%(圖 4)；顯性模型(TT+TC vs. CC)：OR=1.320，95%CI：0.932-1.871，I2=52.5%(圖 5)；隱性模型(TT vs. TC+CC)：OR=0.716，95%CI：0.456-1.123，I2=70.4%(圖6)。分析結果顯示，CYP17(-34T/C)基因多態(tài)性并沒有增加亞洲人群中EMs的發(fā)病風險。

三、敏感性和發(fā)表偏倚分析

將上述基因型模型中單個研究逐個排除后重新計算獲得OR值及其95%CI，探討單個研究對于整體分析的影響程度及Meta分析的結果穩(wěn)健性。結果顯示排除單個研究后，Meta分析結果均未發(fā)生顯著變化，提示本研究中Meta分析的結果是穩(wěn)健、可信的。采用Egger’s test評價其發(fā)表偏倚，結果顯示各基因型模型中未發(fā)現(xiàn)顯著偏倚。

表1　Meta分析納入文獻的基本資料

圖2　等位基因對比模型(T vs. C)與EMs易感性的Meta分析

圖3　雜合子模型(TC vs. CC)與EMs易感性的Meta分析

圖4　純合子模型(TT vs. CC)與EMs易感性的Meta分析

圖5　顯性模型(TT+TC vs. CC)與EMs易感性的Meta分析

圖6　隱性模型(TT vs. TC+CC)與EMs易感性的Meta分析

討論

EMs的發(fā)生發(fā)展受到體內性激素水平的影響，而調控性激素水平的藥物也已經(jīng)被證實對于EMs有一定的治療效果[16-19]。另外，臨床數(shù)據(jù)表明EMs具有遺傳背景[20]，所以，性激素合成、代謝相關基因的單核苷酸多態(tài)性與EMs發(fā)生的聯(lián)系也被越來越多的研究者關注。

CYP17基因與血清雌激素及孕激素濃度密切相關。一系列研究發(fā)現(xiàn)，CYP17(-34T/C)基因多態(tài)性與多種婦科疾病易感性有一定聯(lián)系，包括子宮內膜癌[21]、乳腺癌[22]以及多囊卵巢綜合征[23]，但其與EMs發(fā)生是否相關目前還存在爭議。CYP17在雌激素的生物合成過程中非常重要，其是雌激素合成過程中的限速酶，將孕酮、孕烯醇酮轉化為17α羥孕烯醇酮、雄烯二酮(AND)和脫氫表雄酮，繼而轉化為睪酮、雌二醇、雌酮。當其啟動子-34位堿基T-C突變后，該處堿基序列由CCACT變?yōu)镃CACC，從而增加了一個CG盒(SP1結合位點)，使得轉錄因子結合位點增加，上調CYP17基因的轉錄水平，增加了酶的活性，最終使雌激素的合成水平升高[5]。高濃度的雌激素為內膜組織異位種植和生長提供有利微環(huán)境，促進EMs的發(fā)生發(fā)展[24]，提示CYP17(-34T/C)基因多態(tài)性和EMs易感性存在聯(lián)系。然而，這一推論并未在一些臨床病例-對照研究中得到驗證，關于歐洲白種人的研究提示二者無顯著關聯(lián)，關于亞洲人群的研究目前還存在爭議[9，15]。因此，本研究中我們利用Meta分析，對已有研究進行匯總，共納入6篇病例-對照研究文獻(662例EMs患者和937例對照)探索亞洲人群中CYP17基因多態(tài)性與EMs易感性之間的關系。結果顯示，在亞洲人群中，CYP17(-34T/C)基因多態(tài)性與EMs易感性無顯著相關性。

但我們的研究尚存在一些不足，因為本次研究只納入中國大陸、中國臺灣及日本的研究數(shù)據(jù)，缺少亞洲其它地區(qū)的實驗數(shù)據(jù)；納入的文獻中均以醫(yī)院基礎的非EMs患者人群作為對照組，容易受到其它疾病的影響；未提供詳細的基因型分布數(shù)據(jù)的文獻(如趙欣等[25]對432例EMs患者的研究)不納入本次分析，納入文獻數(shù)和樣本量相對較小；并且本次分析中部分基因型模型存在較高的異質性，缺乏對于病例的亞分類是造成高異質性的重要原因，但因為納入文獻中患者生活的環(huán)境因素、生活方式、家族史等無法獲得，且同一地區(qū)納入分析的文獻不足3篇，無法進行更深入的亞分類分析。

綜上所述，本次Meta分析結果顯示，在亞洲人群中CYP17(-34T/C)基因多態(tài)性與EMs易感性并無顯著相關性。但由于目前的臨床病例研究中，缺少生活習慣、環(huán)境因素以及生理周期情況等亞分類，且缺少健康人群納入對照，容易出現(xiàn)假陰性的結果等。針對上述不足，本課題組認為需要對CYP17(-34T/C)基因多態(tài)性與EMs易感性的關系開展更多設計細致、實施良好的大樣本量病例-對照研究，從而得到更科學、可信的結論。

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[編輯：肖曉輝]

Meta analysis of CYP17 (-34T/C) gene polymorphism and endometriosis susceptibility in Asian population

CHENG Wen，ZHAI Dong-xia，ZHANG Dan-ying，YAO Rui-pin，WANG Ru-qian，YU Chao-qin*

ChanghaiHospitalofTraditionalChineseMedicine，SecondMilitaryMedicalUniversity，Shanghai200433

【Abstract】Objective： To estimate the relationship between CYP17 (-34T/C) gene polymorphism and endometriosis susceptibility in Asian population.

Key words：CYP17；Gene polymorphism;Endometriosis；Meta-analysis

DOI：10.3969/j.issn.1004-3845.2016.06.002

【收稿日期】2015-10-20；【修回日期】2015-12-23

【基金項目】國家自然科學基金重點項目(30930113)

【作者簡介】程雯，女，浙江嘉興人，碩士，住院醫(yī)師，中西醫(yī)結合臨床專業(yè).(* 通訊作者)