宋學英 楊 華 吳英婷 樊媛潔
(首都醫(yī)科大學醫(yī)學實驗與測試中心,北京 100069))
儀器使用與維修
Agilent1100、1200液相色譜儀的維護與維修
宋學英楊華吳英婷樊媛潔
(首都醫(yī)科大學醫(yī)學實驗與測試中心,北京 100069))
摘要:介紹了Agilent1100、1200液相色譜儀的維護與維修的方法。通過日常對儀器的觀察,發(fā)現(xiàn)故障的發(fā)生原因,提出解決方法。有助于延長儀器的使用壽命,保證儀器的完好率與使用率。
關鍵詞:液相色譜儀維護
高效液相色譜(HPLC)具有高分離效率、高選擇性和高靈敏度的特點,目前已成為化學、生物化學、醫(yī)藥衛(wèi)生、石油化工和環(huán)境保護等領域中不可缺少的檢測工具[1]。安捷倫1100、1200液相色譜儀是8~10年以前的產(chǎn)品,目前這些儀器由于購買年限較長,早已過了保修期,進入了故障頻發(fā)期,如果總是請廠家上門維修即花錢又耽擱時間,影響儀器的使用,所以做好儀器的日常維護工作,學會自己動手排除一些小故障十分必要,同時可節(jié)省時間保證儀器的正常使用。
1液相色譜的工作原理
色譜分離原理: 溶于流動相(mobile phase)中的各組分經(jīng)過固定相時,由于與固定相(stationary phase)發(fā)生作用(吸附、分配、離子吸引、排阻、親和)的大小、強弱不同,在固定相中滯留時間不同,從而先后從固定相中流出[1](圖1)。
HPLC系統(tǒng)一般由輸液泵、脫氣機、進樣器、色譜柱、檢測器、數(shù)據(jù)記錄及處理裝置等組成, 輸液泵、自動進樣器、色譜柱、檢測器是關鍵部件[2,3]。
圖1 液相色譜儀的工作原理
2Agilent1100、1200日常維護與故障排除
2.1泵的維護與故障排除
2.1.1泵的工作原理
高壓輸液泵是液相色譜儀分析系統(tǒng)中重要單元部件,用于將流動相和樣品輸入到色譜柱和檢測器中,從而使樣品得到分析,其性能的好壞直接影響整個儀器和分析結果的可靠性。
液相色譜儀的高壓輸液泵有兩種類型,即通常稱謂的恒流泵和恒壓泵。恒流泵使輸出的液體流量穩(wěn)定;而恒壓泵則使輸出的液體壓力穩(wěn)定。恒流泵中有往復泵,注射泵。
Agilent1100、1200泵是一個累積型柱塞往復串聯(lián)泵,累積型柱塞往復泵有兩個泵頭,以串聯(lián)方式連接在一起,這樣可以提供平穩(wěn)的液流。之所以如此是因為兩個泵腔排液體積不同,第一級泵腔是第二級泵腔的2倍。整個泵系統(tǒng)包含:一個入口單向閥(主動閥)和一個出口單向閥(purger閥),2個柱塞桿和2個柱塞桿密封墊,阻尼器和壓力傳感器。原理示意圖如圖2所示,實物圖如圖3所示。
圖2 Agilent1100、1200液相色譜儀泵原理示意圖
圖3 Agilent1100 1200液相色譜儀泵的實物圖
2.1.2泵故障排除與日常維護
在日常工作中常常可以遇到系統(tǒng)超壓的現(xiàn)象,首先應斷開泵出口的管路,排除進樣器以后和泵以后故障的原因。如果是泵的故障,解決方法:首先應該檢查出口閥的閥芯,觀察閥芯是否變黑,如果閥芯變黑,更換出口閥芯(注:出口閥芯是一次性的,不可超聲清洗后再使用,否則會污染整個系統(tǒng)。),便可以解決問題。如果更換了出口閥芯,仍不能解決問題,可更換柱塞桿密封墊,基本上可解決出現(xiàn)泵超壓的問題[4]。
泵壓低或無泵壓,應檢查流路,看是否有漏液情況或溶液根本就沒進入系統(tǒng)中。一般系統(tǒng)漏液,會有漏液提示,無論是泵、自動進樣器、柱溫箱及檢測器均有提示。如果是沒有泵進溶液,應檢查溶劑過濾頭和主動閥。溶劑過濾頭的檢查方法:把溶劑過濾頭拔掉,看流動相是否會因重力的作用而流下,如果溶劑過濾頭被污染,可用30%硝酸浸泡,然后再用超純水清洗干凈,玻璃材質(zhì)溶劑過濾頭不可用超聲的方法清洗。排除了溶劑過濾頭的原因后,應檢查主動閥,看進入主動閥的管路內(nèi)是否有氣泡,如果有,說明是主動閥芯故障,這時應把泵的電源關閉,拔掉主動閥電源,拆開主動閥芯,用50%異丙醇超聲清洗主動閥芯10分鐘,再把主動閥復原,打開泵的電源,觀察主動閥是否能夠正常泵液,如果還不能解決問題,說明主動閥芯過臟,如果有備用的閥芯,請更換。如果沒有,實驗又不能中斷,可用10%的磷酸超聲清洗2~3分鐘,然后用超純水把酸清洗掉,這樣清洗一般可解決問題。注意:用磷酸清洗時時間不宜過長,否則會損壞閥芯中的金屬。
主動閥漏液:如果有備用的主動閥,可換一個新的主動閥,如果沒有,可試著拆開主動閥體的四個六角形螺絲,更換主動閥體上的密封墊(圖4)。
圖4 主動閥拆開后各個部件
泵的日常維護:首先流動相要清潔,要使用色譜級的試劑和超純水作為流動相,如果使用緩沖鹽,要過0.22μm的濾膜。水相使用不超過48小時且要用棕色瓶裝,因為水特別是緩沖鹽在陽光照射下易長菌。如果有機相用的是乙腈,要把原來瓶中的試劑倒掉換成新試劑,用棕色試劑瓶裝,因為乙腈長時間在陽光的照射下易產(chǎn)生聚合現(xiàn)象,出現(xiàn)絮狀沉淀。如果泵帶有seal wash裝置,一定要打開seal wash(10%異丙醇)裝置,且要定期更換[2]。實驗完后,要把含有緩沖鹽的流動相用等比例的不含鹽的流動相替換,用甲醇沖洗系統(tǒng),使系統(tǒng)保存在甲醇中,然后將水相的流路用甲醇灌注,以免長時間不用時管路內(nèi)長菌[5]。
2.2Agilent1100、1200自動進樣器的故障排除與維護
自動進樣器經(jīng)常出現(xiàn)的故障有進樣針和進樣針座堵塞、六通閥中的轉(zhuǎn)子損壞及由于突然停電等原因造成的機械手被卡死,不能移動等故障。如果發(fā)現(xiàn)機械手被卡死的故障,關閉自動進樣器的電源,過1~2分鐘后再開啟電源,讓自動進樣器自檢或點擊進樣器的復位鍵,使其重新復位,如果還不能解決問題,可轉(zhuǎn)動自動進樣器后面的絲杠,使機械手轉(zhuǎn)出后再點擊復位鍵,問題即可解決。
如果發(fā)現(xiàn)系統(tǒng)壓力升高,在排除了泵及色譜柱、檢測器的原因后,可以檢查進樣針和進樣針座是否被堵塞,清洗進樣針座的方法:可將六通閥上的管線5、6反接(如圖5所示),設流速為1mL/min沖洗,(注意:不要讓液體流到漏液傳感器上)或?qū)⑨樧鹣聛?,接到泵的出口上沖洗針座,洗干凈后,可把針座再裝回去即可。
圖5 六通閥連接示意圖
沖洗進樣針的方法:將進樣針抬起,將六通閥上2號位置的管線接到6的位置上,進樣針抬起,沖洗進樣針(進樣針下可放一個小燒杯以免液體流到漏液傳感器上造成停泵)。
排除進樣針和針座堵塞的問題,可將六通閥拆開,觀察六通閥的定子是否有堵塞的現(xiàn)象,同時觀察六通閥的轉(zhuǎn)子是否損壞,可用超聲的方法清洗六通閥的定子或更換六通閥的轉(zhuǎn)子即可。
自動進樣器的日常維護:由于樣品瓶密封墊的反復使用,會使瓶蓋上的瓶墊碎屑進入到進樣器的針或針座中,造成進樣針或針座堵塞或損壞。因此,要及時更換樣品瓶蓋上的瓶墊。
2.3Agilent1100、1200檢測器的維護與保養(yǎng)
紫外檢測器的日常維護:經(jīng)常檢查氘燈的使用時間,發(fā)現(xiàn)氘燈使用的壽命快到時,要注意及時備好,以免在使用過程中由于氘燈點不燃而耽誤實驗。
檢測器在使用一段時間后,流通池有可能被污染,可用異丙醇清洗流通池。實驗完畢后,養(yǎng)成沖洗流通池的習慣,可以不接色譜柱,而用一個兩通連接系統(tǒng),用水和甲醇分別沖洗系統(tǒng),可避免流通池被污染[6]。
總之在日常使用時,注意定期維護色譜系統(tǒng),延長儀器的使用壽命,保證儀器的完好率,保證科研的順利進行。
參考文獻
[1]嚴勁, 方舸, 盧皖琴.高效液相色譜( HPLC) 的管理和維護.醫(yī)療裝備[J]. 2010,(4):74-75.
[2]宋學英,楊華,趙逸松,等.高效液相的儀應用分析.中國醫(yī)學裝備,2015,(1):29-31.
[3]梁潔銀.HP1100高效液相色譜儀的常見故障分析. 中國醫(yī)療設備[J].2011, (12):123.
[4]尹翠英,趙國芬,康月菊,蘇素文,等. Agilent1100 高效液相色譜儀的日常維護和常見故障排除[J].河北化工,2008,(6):60-61.
[5]吳少敏,張雅芝,殷博昊.高效液相色譜的使用與維護.實驗室科學[J].2011,(3):183-186.
[6]陳紹初,張馳,等.高效液相色譜使用中常見問題與對策.中國制藥裝備[J].2011,(7):54-56.
Maintenance of agilent1100,1200 liquid chromatograph.
Song Xueying,Yang Hua,Wu Yingting,Fan Yuanjie
(MedicalIaboratoryandTestingCenterofCapitalMedicalUniversity.Beijing100069,China)
Abstract:In this paper, the method of maintenance of agilent1100,1200 liquid chromatograph is introduced.
Key word:liquid chromatograph;maintenance
作者簡介:宋學英, 1985年畢業(yè)于北京大學物理實驗技術???,多年來一直從事液相色譜儀的管理與測試任務。
DOI:10.3936/j.issn.1001-232x.2016.03.021
收稿日期:2015-11-27