周 偉 李新偉 許世敏

237例孕婦羊水細胞染色體遺傳分析

周 偉 李新偉 許世敏

目的 分析孕婦羊水細胞染色體異常情況及其與產(chǎn)前診斷各指征之間的聯(lián)系，探討羊水細胞染色體核型檢查在產(chǎn)前診斷中的作用。方法 通過細胞遺傳學方法，對237例具有產(chǎn)前診斷指征的孕婦進行羊水細胞培養(yǎng)，并分析其染色體核型。結果 237例孕婦羊水培養(yǎng)成功率98.73%（234例）。檢出異常核型11例(4.7%)，其中數(shù)目異常占異常核型的54.55%（6例），以三體型為主，結構異常占異常核型的36.36%（4例）。在各項產(chǎn)前指征中，B超檢查異常和高齡孕婦受檢人數(shù)最多，超聲指標異常的染色體核型異常檢出率最高（8.06%），與其他組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。結論羊水細胞的染色體核型分析能夠有效地對胎兒染色異常進行診斷，是進行產(chǎn)前遺傳診斷的有效手段。

產(chǎn)前診斷；羊膜腔穿刺；羊水細胞培養(yǎng)；染色體核型分析

染色體病是導致新生兒出生缺陷的重要因素之一，目前尚無有效地治療方法，成為越來越嚴重的公共衛(wèi)生和社會問題[1]。控制染色體病發(fā)生的關鍵手段是產(chǎn)前診斷[2]，其中在孕期進行羊水細胞染色體核型分析是目前診斷胎兒染色體疾病的主要方法之一。本研究對2010～2012年符合羊膜腔穿刺指征的237例孕婦進行羊水細胞染色體遺傳分析，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2010～2012年在郾城區(qū)人民醫(yī)院產(chǎn)科就診的具有進行羊膜腔穿刺指征的237例孕婦，受檢孕婦年齡19～43歲，孕16～25周。根據(jù)孕期情況分為：（1）不良孕產(chǎn)史組36例；（2）高齡組（≥35歲）89例；（3）血清篩查高危異常組31例；（4）B超檢查異常組62例；（5）不良接觸史組19例。

1.2 方法 首先排除孕婦無羊膜腔穿刺禁忌證，簽署知情同意書。常規(guī)消毒，在B超引導下進行羊膜腔穿刺，穿刺成功后先抽取1～2 mL羊水棄去，以防母體細胞污染。然后重新抽取羊水20 mL，離心獲得羊水細胞并進行培養(yǎng)，細胞收獲后進行G顯帶，顯微鏡下進行染色體核型分析，每例分析5個核型，計數(shù)30個中期分裂相，嵌合體計數(shù)加倍。

1.3 統(tǒng)計學方法 用SPSS 13.0統(tǒng)計包對相關數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學處理，計數(shù)資料用例數(shù)（n）表示，計數(shù)資料組間率（%）的比較采用χ2檢驗；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 異常染色體檢出率與羊水穿刺不同指征的關聯(lián) 237例羊水細胞體外培養(yǎng)成功234例，成功率為98.73%。共檢出染色體異常核型11例，異常檢出率4.7%。見表1。其中，B超檢查異常組的異常檢出率為8.06%，明顯高于其他組，在所有染色體異常病例中占比例也明顯高于其他組（P＜0.05）；高齡組受檢人數(shù)最多，異常率為4.49%；不良孕產(chǎn)史組異常檢出率（2.78%）略低于血清篩查組（3.23%）。

表1 不同羊膜腔穿刺指征的染色體異常檢出情況

2.2 染色體異常核型檢出情況 染色體異常核型的檢出情況見表2，其中染色體數(shù)目異常共6例，占異常核型的54.55%，包括4例常染色體三體型和1例特納綜合征，另有1例21-三體嵌合型；檢出染色體結構異常4例，占36.36%，包括缺失、易位和倒位等；此外，還檢測到1例染色體多態(tài)性核型。

表2 染色體異常核型分類

3 討論

染色體異常容易導致新生兒先天性多發(fā)畸形、智力低下等，不但給家庭帶來沉重負擔，也影響新生人口的整體素質(zhì)，通過及時準確的產(chǎn)前診斷能較好地避免出生缺陷的發(fā)生。本研究對237例具有產(chǎn)前羊膜腔穿刺指征的孕婦進行核型分析，成功234例，共檢出異常核型11例，檢出率為4.7%，接近相關報道[3]。調(diào)查顯示，B超檢查異常組的異常核型檢出率最高，為8.06%。B超在胎兒畸形篩查中被廣泛應用，為廣大孕產(chǎn)婦所接受，由于B超對新生兒畸形的篩出率高[4]，所以，在染色體異常篩查中具有參考價值，應特別關注該類人群，提倡進行染色體篩查。高由于齡孕婦（≥35歲）卵子形成過程中容易發(fā)生染色體不分離，從而造成染色體數(shù)目異常，尤其是三體核型的發(fā)生[5]。本研究中高齡組的染色體異常檢出率僅次于B超檢查組，因此，對于高齡孕婦，產(chǎn)前診斷非常重要。血清篩查是常用的產(chǎn)前診斷手段之一，血液中甲胎蛋白（AFP）、妊娠相關蛋白（PAPP-A）等相關蛋白濃度的異常通常與新生兒神經(jīng)管畸形及染色體異常相關[6]，本組異常染色體核型檢出率為3.23%，明顯高于普通人群[7]，這提示在孕早期對血清篩查異常孕婦進行核型分析的必要性?？傊?，在進行產(chǎn)前篩查時，應該綜合不同的篩查指征，對高危孕婦進行羊水細胞染色體核型分析。

本研究所檢測的染色體異常核型包括6例結構異常和4例數(shù)目異常，另有1例為染色體多態(tài)性。其中檢出最多的是染色體三體型，這是最常見的染色體異常核型，常表現(xiàn)為嚴重的生長發(fā)育障礙、智力低下、多發(fā)畸形等，三體型的發(fā)生一般是由于生殖細胞在形成過程中發(fā)生染色體不分離所造成的，一般與孕婦年齡關系密切[8]。本研究中有3例三體型就是在高齡孕婦中篩查到的，所以對于高齡孕婦一般盡量建議進行唐氏篩查。在染色體數(shù)目異常中，有1例為特納綜合征，該核型容易導致胎兒流產(chǎn)或者新生兒性腺發(fā)育不全。結構異常中包括平衡易位和倒位各1例，這類畸變通常不會造成遺傳物質(zhì)丟失，胎兒一般正常，但攜帶者會產(chǎn)生異常配子，導致后代流產(chǎn)、死胎以及染色體異常，所以應加強生育指導，詳細告知孕婦其子代今后的婚育風險，以便孕婦能夠更好的進行選擇[3]。此外，本研究還發(fā)現(xiàn)1例染色體多態(tài)性，由于染色體多態(tài)僅是染色體微小變化，一般妊娠結局良好，但也有報道該類染色體異?？蓪е庐惓Ｉ幸欢ǖ倪z傳效應，具體的機制和影響有待進一步研究[9]。總之，雖然目前也有一些無創(chuàng)或微創(chuàng)的產(chǎn)前診斷技術，但由于價格昂貴，技術要求高以及不成熟等局限性，目前還不能被推廣使用。為了預防染色體病患兒的出生，檢出攜帶者，通過羊水染色體核型分析進行產(chǎn)前診斷，能有效地檢測出染色體異?；颊?，為孕產(chǎn)婦生育提供正確的遺傳指導依據(jù)，這對于提高人口素質(zhì)、降低出生缺陷有重要意義。

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Objective To analyze the relationship of the chromosomal karyotypes in amniotic fluid cell with the prenatal diagnosis indications, and investigate the significance in prenatal diagnosis indications. Methods Amniotic fluid cell culture and karyotypes analysis were carried out in the 237 cases of pregnancy women for prenatal diagnosis. Results 234 cases were cultured successfully in 237 pregnancy women, the successful rate was 98.73%.11 fetuses(4.7% )were found with abnormal karyotypes which incluted 6 cases of numerical abnormalities chromosomes(54.55% in abnormal chromosome) and 4 cases of tructural abnormality chromosomes(36.36% in abnormal chromosome). Detection rate of abnormal karyotype on ultrasound was highest(8.06%), there was significantly difference compared with the other groups(P＜0.05). Conclusion Amniocentesis and chromosomal karyotyping in amniotic fluid cells which carrying out in the high risk pregnancy women is the effective prenatal diagnosis methods.

Prenatal diagnosis; Amniocentesis; Amniotic fluid cells culture; Chromosomal karyotyping

10.3969/j.issn.1009-4393.2016.10.002

河南省科技廳年度計劃項目 （132300410471）

河南 462002 漯河醫(yī)學高等?？茖W校 （周偉 李新偉） 漯河市郾城區(qū)人民醫(yī)院 （許世敏）