朱 烈，周 宏，李旦陽，許敏球

（寧波市鄞州區(qū)農(nóng)業(yè)信息與農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量檢測(cè)服務(wù)中心，浙江　寧波　315192）

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定蟲隆、蟲酰肼和茚蟲威在花菜中的殘留動(dòng)態(tài)研究

朱 烈，周 宏，李旦陽，許敏球

（寧波市鄞州區(qū)農(nóng)業(yè)信息與農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量檢測(cè)服務(wù)中心，浙江寧波315192）

摘 要：研究建立了定蟲隆、蟲酰肼和茚蟲威3種農(nóng)藥在花菜中的液相串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)方法，并采用田間試驗(yàn)方法研究了定蟲隆、蟲酰肼和茚蟲威在花菜中的殘留消解動(dòng)態(tài)規(guī)律。結(jié)果表明：采用乙腈提取，PSA凈化，凈化液經(jīng)氮?dú)獯抵两珊笥? mL 0.1%甲酸溶液/乙腈（V︰V=8︰2）定容，采用液相串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定，外標(biāo)法定量。在10～1 000 μg/kg添加水平范圍內(nèi)，定蟲隆、蟲酰肼和茚蟲威在花菜中添加回收率在70.5%～98.4 %之間，變異系數(shù)為5.9%～9.1 %，在花菜的檢出限分別為2.5、0.25和0.5 μg/kg，符合農(nóng)藥殘留檢測(cè)分析的要求。田間殘留試驗(yàn)表明：定蟲隆、蟲酰肼和茚蟲威在花菜中降解符合動(dòng)力學(xué)曲線，在花菜中的消解半衰期分別為2.6、4.2和1.7 d。

關(guān)鍵詞：定蟲隆；蟲酰肼；茚蟲威；花菜；殘留；消解；液相串聯(lián)質(zhì)譜

定蟲隆、蟲酰肼和茚蟲威是3種高效低毒農(nóng)藥，對(duì)蔬菜上的小菜蛾、甜菜夜蛾、斜紋夜蛾、菜青蟲等害蟲均有良好防效［1-5］。花菜是我國(guó)廣泛種植且深受老百姓喜愛的蔬菜，近年來在生產(chǎn)上廣泛推廣使用這3種農(nóng)藥防治斜紋夜蛾、菜青蟲和甜菜夜蛾等害蟲。研究采用快速樣品前處理技術(shù)和液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜方法分析定蟲隆、蟲酰肼和茚蟲威花菜中的殘留量及田間消解狀況，以期為定蟲隆、蟲酰肼和茚蟲威在花菜生產(chǎn)中的安全應(yīng)用提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)試劑有乙腈、甲酸（HPLC級(jí)），氯化鈉、無水硫酸鎂（分析純）。供試藥劑為定蟲隆、蟲酰肼和茚蟲威，其標(biāo)準(zhǔn)品純度≥98.0 %（德國(guó)Dr.Ehrenstorfer.GmbH公司）。PSA 填料（Agilent公司），40～60 μm。供試作物花菜種植于寧波市鄞州區(qū)。

主要試驗(yàn)器材有Acquity UPLC XevoTM TQ MS液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀（美國(guó)Waters公司）、色譜柱Acquity UPLC BEH C18柱（2.1 mm×100 mm，1.7 μm）、氮吹儀、超聲波清洗器、勻質(zhì)器（IKA T25）、離心管、容量瓶等。

1.2 田間試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)共設(shè)3個(gè)處理，分別為5%定蟲隆乳油（1 000倍）、5%蟲酰肼乳油（1 500倍）、10%茚蟲威乳油（1 000倍）和空白對(duì)照；田間試驗(yàn)設(shè)計(jì)參照NY/T 788-2004農(nóng)藥殘留試驗(yàn)準(zhǔn)則進(jìn)行，每個(gè)處理重復(fù)3次，每個(gè)小區(qū)面積30 m2，小區(qū)按照濃度由低到高排列，小區(qū)間設(shè)保護(hù)行。在花菜生長(zhǎng)到成熟個(gè)體一半大小時(shí)施藥，施藥方式均為對(duì)水手動(dòng)均勻噴霧。

噴藥前以及噴藥后1 h、1 d、3 d、5 d、7 d、10 d、14 d、21 d、28 d采樣。每小區(qū)隨機(jī)取蔬菜樣品6株，總量不少于3 kg；蔬菜切碎混勻，四分法留樣，所有樣品用塑料袋封裝、編號(hào)，貯存在-20℃冰箱中保存待測(cè)。

1.3 分析方法

1.3.1 提 取 稱取5.00 g花菜樣品于100 mL離心管中，加入20.0 mL乙腈，在勻質(zhì)機(jī)中以10 000 r/min的速度勻質(zhì)1 min，加入5 g氯化鈉和5 g無水硫酸鎂，蓋上蓋子，劇烈震蕩1 min后以5 000 r/min離心3 min，使乙腈和水相分層，吸取上層乙腈提取液待凈化。

1.3.2 凈 化 取3.00 mL上層乙腈溶液于10 mL刻度離心管中，離心管中事先加入50 mg PSA，手動(dòng)振搖1 min，5 000 r/min離心3 min，準(zhǔn)確吸取1.00 mL凈化液在40℃水浴中氮?dú)獯抵两?，殘?jiān)?.00 mL0.1%甲酸/乙腈溶液（V︰V=8︰2）溶解，在旋渦混合器上混勻，過0.2 μm濾膜后備用。

1.3.3 色譜條件 （1）HPLC條件：儀器為Acquity UPLC XevoTM TQ MS液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀；色譜柱為Acquity UPLC BEH C18柱。流動(dòng)相A為0.1%甲酸水溶液，流動(dòng)相B為乙腈，梯度淋洗。梯度洗脫程序：0～0.5 min，20%B；0.5～3.5min，20%～90%B； 3.5～4.5 min，90%B；4.5～5.1 min，90%～20% B；5.1～6.5 min，20%B。流速：0.3 mL/min。柱溫：30℃。進(jìn)樣體積：10 μL。（2）MS/MS條件：采用電噴霧離子源ESI（+）進(jìn)行分析；毛細(xì)管電壓3.0 kV；錐孔電壓12 V；離子源溫度150℃；錐孔反吹氣流量50 L/h；RF透鏡電壓0 V；脫溶劑氣溫度5 000℃；脫溶劑氣流量1 000 L/h。質(zhì)量分析器條件：分析器1低端分辨率與高端分辨率皆為14 V；入口透鏡電壓為1 V；出口電壓為3 V；分析器2低端分辨率與高端分辨率都為15 V。多離子反應(yīng)檢測(cè)模式檢測(cè)（MRM），各物質(zhì)的分析條件詳見表1。

表1 MRM監(jiān)測(cè)模式下氯蟲苯甲酰胺質(zhì)譜條件

1.3.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 采用外標(biāo)法定量，以1.3.3的色譜條件進(jìn)樣檢測(cè)分析，根據(jù)峰面積與進(jìn)樣濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。其中，定蟲隆標(biāo)樣稀釋成0.5、5、50、200、500 μg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液，蟲酰肼標(biāo)樣稀釋成0.1、2、20、50、200 μg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液，茚蟲威標(biāo)樣稀釋成0.2、5、20、50、200 μg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液再進(jìn)行檢測(cè)。

1.3.5 添加回收率 將空白花菜樣品切碎，經(jīng)植物組織搗碎機(jī)高速搗碎，稱取5.00 g樣品于100 mL離心管中，向其中分別添加定蟲隆、蟲酰肼和茚蟲威標(biāo)準(zhǔn)溶液，添加濃度分別為10.0，100和1 000 μg/kg，每個(gè)濃度設(shè)3次重復(fù)，并按1.3的分析方法測(cè)定回收率。

2 結(jié)果與分析

2.1 各農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)曲線

經(jīng)基質(zhì)加標(biāo)試驗(yàn)確定定蟲隆、蟲酰肼和茚蟲威的基質(zhì)效應(yīng)均不明顯，因此研究采用外標(biāo)法對(duì)3種農(nóng)藥進(jìn)行定量，檢測(cè)得到定蟲隆的線性回歸方程為y=43.729x+165.23，相關(guān)系數(shù)R=0.997 1；蟲酰肼的線性回歸方程為y=836.39x+3187.9，相關(guān)系數(shù)R=0.996 8；茚蟲威的線性回歸方程為y=293.02x+522.2，相關(guān)系數(shù)R=0.999 0。結(jié)果表明，該試驗(yàn)中定蟲隆、蟲酰肼和茚蟲威的分析測(cè)定方法符合農(nóng)藥殘留檢測(cè)要求。

2.2 方法的回收率、精密度和最低檢出濃度

由表2可知，定蟲隆在花菜樣品中的添加回收率在80.9%～87.4%之間，變異系數(shù)為5.9% ～8.4%；蟲酰肼在花菜樣品中的添加回收率在88.5%～98.4%之間，變異系數(shù)為6.6%～9.3 %；茚蟲威在花菜樣品中的添加回收率在70.5%～80.5%之間，變異系數(shù)為5.6%～9.1 %。采用1.3的分析方法，定蟲隆、蟲酰肼和茚蟲威的檢出限分別為2.5、0.25、0.5 μg/kg，符合我國(guó)農(nóng)藥殘留最低檢出濃度的要求。

表2 定蟲隆、蟲酰肼和茚蟲威在花菜中的添加回收率及變異系數(shù)

2.3 定蟲隆、蟲酰肼和茚蟲威在花菜中的消解動(dòng)態(tài)

定蟲隆、蟲酰肼和茚蟲威在花菜中的消解動(dòng)態(tài)田間試驗(yàn)結(jié)果見表3。定蟲隆、蟲酰肼和茚蟲威在花菜中的原始沉積量分別為0.898、0.499和0.417 mg/kg，施藥7 d后在花菜中的降解分別達(dá)到93.21%、93.59% 和97.36%。經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析得出定蟲隆、蟲酰肼和茚蟲威在花菜中降解符合動(dòng)力學(xué)曲線，其中定蟲隆在花菜的消解方程式為Ct=0.399 5e-0.270 3t，R2=0.810 3，半衰期為2.6 d；蟲酰肼在花菜的消解方程式為Ct=0.146 8e-0.165 1t，R2=0.798 1，半衰期為4.2 d；茚蟲威在花菜的消解方程式為Ct=0.210 9e-0.417 2t，R2=0.927 8，半衰期為1.7 d。

表3 定蟲隆、蟲酰肼和茚蟲威在花菜中的消解試驗(yàn)結(jié)果（mg/kg）

3 結(jié) 論

研究采用快速樣品前處理技術(shù)和液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法，建立了同時(shí)檢測(cè)定蟲隆、蟲酰肼和茚蟲威3種農(nóng)藥在花菜中殘留量的分析方法，并對(duì)3種農(nóng)藥在花菜中的消解動(dòng)態(tài)進(jìn)行了分析。結(jié)果表明，該檢測(cè)方法簡(jiǎn)便、快速、重現(xiàn)性好、準(zhǔn)確度高，添加回收率和檢出限都能滿足3種農(nóng)藥同時(shí)定量分析的要求，具有一定的新穎性和實(shí)用性。田間殘留消解試驗(yàn)結(jié)果表明，定蟲隆、蟲酰肼和茚蟲威在花菜中的原始沉積量分別為0.898、0.499和0.417 mg/kg，在花菜中降解符合動(dòng)力學(xué)曲線，消解半衰期分別為2.6、4.2和1.7 d。從檢測(cè)數(shù)據(jù)來看，定蟲隆、蟲酰肼和茚蟲威在花菜中均可較快地消解。據(jù)檢索，定蟲隆、蟲酰肼和茚蟲威在花菜中MRL值在我國(guó)分別為2、0.5和1 mg/kg，在日本分別為2、0.5和3 mg/kg［6-8］。參考兩國(guó)MRL值，結(jié)合研究中3種農(nóng)藥在花菜中的消解動(dòng)態(tài)規(guī)律，定蟲隆、蟲酰肼和茚蟲威在花菜生產(chǎn)上施用較安全，建議安全間隔期為7 d。

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（責(zé)任編輯：成 平）

Degradation of Chlorfluazuron， Tebufenozide and Indoxacarb in Cauliflower

ZHU Lie，ZHOU Hong，LI Dan-yang，XU Min-qiu
（Yinzhou Agricultural Information and Agricultural Products Quality Inspection Service Center， Ningbo 315192， PRC）

Abstract：A high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometric method was developed for the determination of chlorfluazuron， tebufenozide and indoxacarb in cauliflower. Meanwhile the residue and degradation of three kinds of pesticides in cauliflower were investigated. The samples were extracted with aeetonitrile and purified by PSA. The solution after purification was evaporated to nearly dry by nitrogen blowing and redissolved with 1 mL 0.1% formic acid-water： aeetonitrile （8∶2）by volume. The mass spectrometer was operated under multiple reaction monitoring （MRM） mode. The experimental results showed that the average recoveries of chlorfluazuron， tebufenozide and indoxacarb stood with a range of 70.5%-98.4% at three spiking levels from 10 μg/kg to 1 000 μg/kg with their relative standard deviations of 5.9%-9.1% in cauliflower. The lowest concentrations detected were 2.5， 0.25， and 0.5 μg/kg in cauliflower， respectively. The degradation of three kinds of pesticides in cauliflower could be described with kinetic curve. The half-life of chlorfluazuron， tebufenozide and indoxacarb were 2.6， 4.2 and 1.7 d in cauliflower， respectively.

Key words：chlorfluazuron； tebufenozide； indoxacarb； cauliflower； residues； degradation； liquid chromatography-tandem mass spectrometric

中圖分類號(hào)：S481+.8

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1006-060X（2016）05-0061-03

DOI：10.16498/j.cnki.hnnykx.2016.05.018

收稿日期：2016-03-25

基金項(xiàng)目：寧波市農(nóng)科教結(jié)合項(xiàng)目（2012NK18）

作者簡(jiǎn)介：朱 烈（1980-），男，浙江樂清市人，農(nóng)藝師，主要從事農(nóng)藥殘留分析和農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)測(cè)工作。