付陳增，蔡麗娜，徐宛玲漯河醫(yī)學高等?？茖W校

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微納米材料在抗腫瘤免疫治療中的應用研究

付陳增，蔡麗娜，徐宛玲
漯河醫(yī)學高等?？茖W校

摘要：隨著時代的發(fā)展，以及一些嚴重病例的出現，人們對于腫瘤的認識也變得更加的深入?？鼓[瘤免疫療法在腫瘤治療中的應用日益受到醫(yī)學界的重視,已在多種腫瘤的臨床治療試驗中顯示出較好的應用前景。本文主要對微納米材料在抗腫瘤免疫治療中的應用進行綜合的研究和表述，通過實驗和儀器的觀察來發(fā)現和探討出微納米材料在抗腫瘤治療中所起的作用。

關鍵詞：抗腫瘤免疫治療；碳納米管；樹突狀細胞

1　納米技術及抗腫瘤免疫治療

隨著近幾年納米技術的高速發(fā)展，納米技術在各個方面的應用也變得更加的廣泛。在醫(yī)學方面，納米科技為制備新型的腫瘤疫苗提供了高新技術支持,在對某些特異的腫瘤細胞可能會發(fā)揮重大的作用。有結果顯示，納米技術在抗腫瘤免疫治療中起到了一定的作用，它對于沒些細胞起到了很大的免疫作用，提高了其免疫效果。

隨著時代的發(fā)展，腫瘤的產生的原因越來越多，治療腫瘤的方式越來越多，所以對于抗腫瘤的的方法也追求的越來的越精細。由于手術和化療及放療都有一定的副作用和缺點，所以這就需要抗腫瘤免疫治療共同協作治療。

當前，DC疫苗雖然在技術上已經得到一定的應用，可是這對于現在所預想的作用來說還遠遠不夠，樹突狀細胞于1973年首次由steinman發(fā)現,因其表面有眾多樹狀突起而得名。樹突細胞被認為是在產生抗原的最初反應，在腫瘤的治愈和免疫過程中起到了一定的承接作用，所以對于一種好的免疫方法和藥物來講，敏感度高的樹突更有利于對腫瘤細胞免疫。

2　材料和主要步驟

2.1材料

在規(guī)定的情況下，在志愿者復合實驗的條件下，按照實驗嚴格進行實驗。實驗在志愿者在明白抽血用途和自愿的情況下開始的。選用人乳腺癌細胞系MCF-7、人肝癌細胞系HePG2、人白血病細胞系K562。以及選用多種不同規(guī)格的壁碳納米管。

2.2實驗步驟

實驗開始時首先對人外周血單個核細胞進行分離，然后在完全培養(yǎng)基里培養(yǎng)樹突狀細胞。其次進行人乳腺癌細胞系MCF-7裂解蛋白的提取及濃度檢測、多壁碳納米管(MWCNT)的表征及與腫瘤裂解蛋白(TumorP)的連接、DC吞噬腫瘤抗原的檢測、DC表型的檢測、DC誘導的對腫瘤細胞特異性殺傷作用的檢測等主要步驟。

3　結果分析

3.1DC的形態(tài)學觀察

通過實驗觀察，在高倍顯微鏡下可以看到。在實驗開始時細胞經過培養(yǎng)后可以得到單核的細胞，然后進行更長時間的培養(yǎng)，培養(yǎng)液了將會產生懸浮細胞，主要的細胞依然還是單核細胞，其形態(tài)相識體積比其他細胞小。等到培養(yǎng)到第四天后，培養(yǎng)液里的懸浮細胞將變的多起來了，且占大多數。其體積比單核的細胞的大，細胞表面見明顯毛刺狀突起(圖la)。培養(yǎng)至第6天,細胞以懸浮生長為主,或呈半懸浮狀態(tài)生長,細胞體積進一步增大,形態(tài)不規(guī)則,多數細胞具有毛刺狀突起,突起結構變細密,且較多聚集成團(圖lb)

圖1　

3.2納米管壁與腫瘤的反應

腫瘤細胞可通過一定的方式與納米管進行反應，反應過程是一種動態(tài)的，微觀變化的。實驗通過化學反應和儀器觀察來觀察癌細胞和納米管的結合。圖2a是觀察到的圖片。反應前后壁碳納米管保持原有的長度和直接，其他特征基本保持不變。(圖2b）。

圖2　

3.3碳納米管對DC誘導的淋巴細胞特異性抗腫瘤作用的影響

為了研究碳納米管所增強的對腫瘤細胞的殺傷作用是否來自碳納米管自身的毒性作用,我們將不同濃度的碳納米管加入到MCF-7細胞中,共同孵育72小時,然后用MTS法檢測MCF-7細胞的存活率。結果顯示,碳納米管在0.0005-0.5ug/ml加l的濃度范圍內,對MCF-7的存活無影響(圖3)。實驗結果表明，納米管在抗癌細胞的過程中，其決定性作用的是激發(fā)機體產生更多的活化淋巴細胞，而不是依靠納米管的毒性去殺死癌細胞的。除此之外，實驗結果也表明納米管在人體中的安全性是可以被接受的，不會對人體產生較大的影響。

圖3　

4　結論

研究顯示碳納米管-腫瘤蛋白在反應過程中具有抗原的功能，且對大多數癌細胞具有較強的殺傷了，可以殺死癌細胞。在此研究結果下，各種致癌物質可以得到更好的研發(fā)。為了檢測實驗納米管的直接作用，我們觀察到實驗中的癌細胞的活性受到了抑制，這表明碳納米管在一定的程度可以直接影響癌細胞。結果顯示在0.0005-0.5ug/m1濃度范圍內,碳納米管不影響MCF-7細胞的存活,說明碳納米管-腫瘤蛋白誘導的針對腫瘤的殺傷作用確實是通過淋巴細胞產生的,而不是歸因于碳納米管本身的毒性作用。納米技術在醫(yī)學抗腫瘤免疫治療這個方面應用有很多，碳納米管的應用比較廣泛。隨著時代的發(fā)展，以及納米技術的不斷發(fā)展和醫(yī)療技術的不斷高科技化，納米技術將會更加適用于醫(yī)療方面及其各個領域。從而給更多的腫瘤患者帶來希望和未來，給腫瘤患者一個美好的明天。所以加強納米技術在抗腫瘤免疫治療應用和研究是很有必要的，是時代發(fā)展的需要。

參考文獻：

[1]張建超,楊天明.磁性納米鐵治療大鼠膠質瘤的實驗研究[J].東南大學學報(醫(yī)學版).2010(03)

[2]胡文華,尹芳,樊代明.反義人鈣周期素結合蛋白編碼基因轉染對胃癌細胞多藥耐藥性的影響[J].細胞與分子免疫學雜志.2002(06)

基金項目：漯河醫(yī)學高等專科學?；穑?014-S-LMC07）。

作者簡介：付陳增，女，單位：漯河醫(yī)學高等?？茖W校。