溫小云 方先松 邱芳

乙肝病毒標(biāo)記物陽性表型血清標(biāo)本乙型肝炎病毒(HBV)-DNA臨床檢驗分析的應(yīng)用價值探討

溫小云 方先松 邱芳

目的 研究乙肝病毒標(biāo)記物陽性表型血清標(biāo)本乙型肝炎病毒(HBV)-DNA臨床檢驗的結(jié)果分析，探討其臨床應(yīng)用價值。方法 選取350例乙肝病毒標(biāo)記物模式不同的血清作為研究標(biāo)本，測定乙肝病毒DNA與前S1抗原在乙肝表面抗原陽性各種模式中的表達(dá)情況，并分析其表達(dá)相關(guān)性。結(jié)果 除HBsAg+、HBcAb+外，在乙肝表面抗原陽性的各種模式中，乙肝病毒DNA在前S1抗原陽性中的陽性表達(dá)率均明顯高于其在前S1抗原陰性中的陽性表達(dá)率，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 HBV-DNA與前S1抗原在乙肝表面抗原陽性各種模式中的表達(dá)具有明顯的相關(guān)性，前S1抗原的陽性表達(dá)情況可以準(zhǔn)確地提示HBV-DNA在乙肝患者中的復(fù)制情況，值得臨床檢驗推廣應(yīng)用。

乙肝病毒標(biāo)記物；血清標(biāo)本；乙肝病毒DNA；臨床檢驗分析

乙型肝炎在我國的發(fā)病率逐年升高，嚴(yán)重影響人群健康，乙型肝炎的傳統(tǒng)診斷主要采用乙型肝炎病毒的標(biāo)志物：乙肝表面抗原、乙肝表面抗體、乙肝e抗原、乙肝e抗體、乙肝核心抗體的檢測[1]。由于抗原變異、檢測方法、靈敏度等因素的影響，傳統(tǒng)的診斷方法無法判斷攜帶者并確診[2]。因此結(jié)合HBV-DNA的復(fù)制情況進(jìn)行綜合診斷，對于減少誤診漏診具有十分重要的意義[3]。測定HBV-DNA水平的熒光定量PCR技術(shù)要求高、昂貴，近年來乙肝表面前S1抗原反映HBV-DNA復(fù)制情況的研究逐漸深入[4]，本研究選取350例乙型肝炎病毒標(biāo)記物模式不同的血清作為研究標(biāo)本，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 標(biāo)本選取了2014年6月～2015年6月贛南醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院門診及體檢收集的350例乙型肝炎病毒標(biāo)記物模式不同的血清標(biāo)本，其中男162例，女188例，平均年齡（37.78±2.37）歲。所有患者均無嚴(yán)重的心血管疾病、腎病、糖尿病等疾病。

1.2 儀器與方法 酶標(biāo)儀為奧地利產(chǎn)安圖（anthos）2010、洗板機(jī)為奧地利產(chǎn)安圖(anthos)fluido、PCR擴(kuò)增儀為

ABI7300，HBV-M檢測試劑盒購自英科新創(chuàng)（廈門）科技有限公司，PreS1抗原檢測試劑盒購自上海復(fù)星長征醫(yī)學(xué)科學(xué)有限公司，HBV-DNA檢測試劑盒購自中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司。采集患者的血液標(biāo)本后立即進(jìn)行血清的分離，無法及時檢測的標(biāo)本置于－20℃的條件下保存。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗法對乙肝表面抗原、乙肝表面抗體、乙肝e抗原、乙肝e抗體、乙肝核心抗體、前S1抗原進(jìn)行檢測；采用熒光定量PCR法對乙肝病毒

DNA進(jìn)行檢測，檢測水平低于1×102拷貝數(shù)/mL時為乙型肝炎病毒陰性，否則為陽性。比較乙型肝炎病毒DNA與前S1抗原在乙肝表面抗原各種模式中的表達(dá)情況并分析其相關(guān)性。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS16.0統(tǒng)計學(xué)軟件對實驗過程中采集得到的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理，計數(shù)資料以率（%）表示，采用χ2檢驗；P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

HBV-DNA與前S1抗原在乙肝表面抗原陽性各種模式中的表達(dá)及相關(guān)性分析，除HBsAg+、HBcAb+外，在乙肝表面抗原陽性的各種模式中，乙肝病毒DNA在前S1抗原陽性中的陽性表達(dá)率均明顯高于其在前S1抗原陰性中的陽性表達(dá)率，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

表1 HBV-DNA與前S1抗原抗原在乙肝表面抗原陽性各種模式中的表達(dá)及相關(guān)性

3 討論

乙型肝炎是備受關(guān)注的全球衛(wèi)生問題，我國是乙型肝炎大國，近年來的發(fā)病率逐年升高，嚴(yán)重影響患者的生命健康。乙型肝炎病毒是一種DNA病毒，可以通過血液、性接觸、呼吸道等多種途徑傳播，對人群健康產(chǎn)生極大的威脅，因此乙型肝炎的臨床診斷與治療十分重要[5]。

乙型肝炎病毒的表面標(biāo)記物（即乙肝5項）的檢測診斷方法被廣泛地應(yīng)用，但乙肝5項只能在一定程度上判斷患者有無病毒的感染及體內(nèi)是否有抗體的產(chǎn)生，且由于抗原變異、特異性、檢測試劑的靈敏度、檢測方法的靈敏度等因素，使得傳統(tǒng)的乙肝5項診斷方法無法判斷患者是否為攜帶者，易造成漏診或誤診，影響醫(yī)療安全[6]。熒光定量PCR法能夠定量檢測患者體內(nèi)乙型肝炎病毒DNA的水平，可以準(zhǔn)確地衡量乙型肝炎病毒的感染與增殖情況，但PCR法對操作者的技術(shù)要求非常高，測量儀器價格高昂等因素限制了PCR法的臨床診斷應(yīng)用[7]。隨著研究者對于乙型肝炎病毒表面標(biāo)記物研究的不斷深入，近年來前S1抗原診斷方面的作用備受關(guān)注。有研究表明，前S1抗原在一定程度上能夠反映乙型肝炎病毒感染與復(fù)制增殖的情況，乙型肝炎病毒的侵入及在宿主細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制與前S1蛋白之間有著密切的聯(lián)系，前S1蛋白在乙型肝炎病毒的感染、增殖以及宿主產(chǎn)生免疫反應(yīng)等方面有著非常顯著的作用[8]。本實驗中，在乙型肝炎表面抗原陽性的各種模式中，乙型肝炎病毒DNA在前S1抗原陽性中的陽性表達(dá)率均明顯高于乙型肝炎病毒DNA在前S1抗原陰性中的陽性表達(dá)率，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。這表明乙肝病毒DNA與前S1抗原在乙型肝炎表面抗原陽性各種模式中的表達(dá)具有明顯的相關(guān)性，前S1抗原的陽性表達(dá)情況可以準(zhǔn)確地提示乙肝病毒DNA在乙型肝炎患者中的復(fù)制情況，能夠很好的彌補(bǔ)傳統(tǒng)診斷方法漏診與誤診方面的不足，且測定成本較低、操作簡單，比熒光定量PCR法直接測定DNA含量有更實際的推廣性。

綜上所述，傳統(tǒng)的診斷方法乙型肝炎5項易造成漏診誤診，而前S1抗原的陽性表達(dá)情況可以準(zhǔn)確地提示HBV-DNA在乙肝患者中的復(fù)制情況，有效避免漏診誤診、成本低、方法簡單，值得臨床檢驗分析上推廣應(yīng)用。

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[2] 陳永剛，肇玉博，楊文濤.HBV血清標(biāo)志物聯(lián)合Pre-S1抗原或水平及血清標(biāo)志物關(guān)系的探討[J].中華醫(yī)院感染性雜志，2012，22(5):907-909.

[3] 鮑淑華，樓正青，高麗華.乙肝病毒標(biāo)記物陽性表型血清標(biāo)本HBVDNA水平分析[J].中華全科醫(yī)學(xué)，2014，11(6):977-978.

[4] 申煥君，陳敬銀，張中偉，等.慢性乙型肝炎患者HBV血清標(biāo)志物與HBV-DNA的相關(guān)性分析[J].傳染病信息，2013，26(2):111-114.

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[6] 李彩東，吳斌段，正軍，等.乙型肝炎病毒基因分型與HBV-DNA水平及血清標(biāo)志物關(guān)系的探討[J].中華醫(yī)院感染性雜志，2012，22(5):907-909.

[7] 蔡蘭蘭，李振雪，樊冰.乙肝病毒前S1抗原與乙肝血清標(biāo)志物及HBV-DNA的相關(guān)性分析[J].醫(yī)學(xué)檢驗，2010，7(19):91-92.

[8] 胡淑芬，梁嘉琪，高慧，等.熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)定量檢測乙型肝炎病毒-DNA與酶聯(lián)免疫吸附試驗定性檢測乙型肝炎病毒血清標(biāo)志物的對比分析[J].實用醫(yī)技雜志，2010，17(11):1012-1014.

10.3969/j.issn.1009-4393.2016.3.040

江西 341000 贛南醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院輸血科 （溫小云 邱芳）贛南醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院檢驗科 （方先松）