李紅

非結核分枝桿菌肺病患者血清細胞因子測定臨床意義分析

李紅

目的 分析非結核分枝桿菌（non-tuberculosis mycobacteria，NTM）肺病患者中血清細胞因子含量及其可能的臨床意義。方法 選擇35例NTM肺病患者和29例陳舊性肺結核患者，通過酶聯(lián)免疫分析法，檢測其血清中白介素2受體（IL-2R）、白介素6（IL-6）、白介素8（IL-8）、白介素10（IL-10）、腫瘤壞死因子α（TNF-α）和降鈣素原（procalcitonin，PCT）的含量，分析其與肺部空洞的關系。結果 35例NTM肺病患者血清TNF-α含量為（14.6±2.6）pg/mL，顯著高于對照組的（9.2±1.8）pg/mL，差異有統(tǒng)計學意義（P=0.026）。NTM肺病患者血清IL-2R含量為（1026.2±545.3）U/mL，IL-6為（10.6±6.4）pg/mL，IL-8為（12.7±3.9）pg/mL，IL-10為（5.3±1.8）pg/mL，PCT為（0.07±0.01），與對照組比較差異均無統(tǒng)計學意義。NTM肺病患者中7例空洞患者與28例無空洞患者血清IL-2R、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α、PCT含量差異均無統(tǒng)計學意義。結論 TNF-α在NTM肺病的感染和形成過程中起著非常重要的作用，是NTM肺病感染的重要指標。

肺結核，繼發(fā)；結核分枝桿菌；非結核分枝桿菌；血清細胞因子

非結核分枝桿菌（non-tuberculosis mycobacteria，NTM）是分枝桿菌屬除外結核分枝桿菌和麻風分枝桿菌的其他分枝桿菌，共154種，其中致病菌僅幾十種[1]。NTM可侵犯人體肺、淋巴結、骨骼、關節(jié)、皮膚和軟組織等器官，從而引發(fā)全身播散性疾病[2]。非結核分枝桿菌肺病是由NTM引發(fā)的疾病，近年有上升趨勢，本研究通過酶聯(lián)免疫分析法（enzyme-linked immunoassay assay，ELISA)）檢測35例NTM肺病患者和29例陳舊性肺結核患者血清中白介素2受體（interleukin 2 receptor，IL-2R）、白介素6（interleukin 6，IL-6）、白介素8（interleukin 8，IL-8）、白介素10（interleukin 10，IL-10）、腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factor α，TNF-α）和降鈣素原（procalcitonin，PCT）的含量，分析其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇鞍山市千山結核醫(yī)院2013年1月～2013年12月NTM肺病患者35例，男27例，女8例，年齡34～78歲，平均（67.5±14.5）歲。所有患者均采用酸性羅氏培養(yǎng)基PNB鑒定，確定為NTM感染，并符合2013年中華醫(yī)學會結核病學分會制定的《肺結核診斷和治療指南》標準[3]。均為活動期，其中無空洞者28例，空洞者7例。另外選取本院同期29例陳舊性肺結核患者作為對照組，男22例，女7例，年齡35～76歲，平均（59.5±16.5）歲。29例患者均未發(fā)現(xiàn)結核桿菌，均為無空洞，痰涂片顯示均陰性。2組患者一般資料比較見表1。

表1 2組患者一般資料比較

1.2 方法

1.2.1 主要儀器與試劑 酶標測定儀(iMARK)購自美國Bio-RAD公司，批號：V111584，；渦旋震蕩器（VORTEX-5）購自江蘇海門其林貝爾儀器制造有限公司，批號不詳；恒溫培養(yǎng)箱（LRH-150S）購自廣東省醫(yī)療器械廠，批號：Q/19YX03-2001。IL-2R、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α和PCT酶聯(lián)免疫分析試劑盒（Siemens Healthcare Diagnostics Inc）均購自德國Siemens公司。

1.2.2 血清因子測定 患者均抽取晨空腹外周血5mL，肝素抗凝，3000r/min離心10min（離心機半徑13.5cm）后收集血清，放于-80℃待用。分別設空白對照孔（不加樣品和酶標試劑）、標準孔和待測樣本孔。將適量血清樣本加入酶標板孔底部，晃動搖勻，封板膜封板，37℃溫育30 min。棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，3min后棄去，重復5次。每孔加入顯色液100μL，振蕩混勻。37℃避光顯色10min，加入終止液終止實驗。將空白孔調(diào)零，用酶標儀測量各孔450nm處吸光度OD值。實驗重復3次，取平均值計算。

1.3 統(tǒng)計學方法 應用SPSS17.0進行統(tǒng)計分析，計量資料采用“x±s”表示，組間比較采用t檢驗；計數(shù)資料用例數(shù)（n）表示，計數(shù)資料組間率（%）的比較采用χ2檢驗；以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 血清各因子含量 NTM肺病患者血清TNF-α含量顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），其他5種指標2組變化不明顯。見表2。

2.2 血清因子含量與空洞的關系 NTM肺病患者血清各因子含量與空洞無關，差異均無統(tǒng)計學意義。見表3。

3 討論

NTM肺病是一種感染性疾病，人體感染NTM后，機體免疫功能和抵抗力下降，導致NTM增殖，同時，體內(nèi)會產(chǎn)生大量炎性因子，參與NTM感染和NTM肺病形成[4-5]。近年來，炎癥有關細胞因子如IL-2R、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α和PCT等在NTM肺病患者中的報道鮮見。

表2 NTM肺病患者和陳舊性肺結核患者血清各因子含量（x±s）

表3 NTM肺病患者血清各因子含量與空洞的關系（x±s）

TNF-α由多種免疫細胞分泌，是重要的前炎性反應因子和免疫調(diào)節(jié)因子，可對機體包圍感染部位防止擴散，其產(chǎn)生與機體的免疫狀態(tài)和結核分支桿菌的毒性有關[6]。研究表明，用TNF-α抗體中和TNF-α作用，導致小鼠吞噬細胞產(chǎn)生的炎性趨化性細胞因子減少，表明TNF-α對機體抗感染有一定的保護作用[7]。國內(nèi)有研究表明，結核病患者血清中TNF-α水平明顯高于健康對照組[8]。血清TNF-α水平增高與病灶局部大量巨噬細胞的聚集、活化以及釋放大量的TNF-α有關，血液循環(huán)中過量TNF-α反過來作用于局部，使病灶更易于播散，因此血清TNF-α可作為判肺結核病情變化及活動性的重要指標[9-10]。對于NTM肺病患者，機體感染NTM，作為重要的免疫調(diào)節(jié)因子，TNF-α分泌增加，以參與抗感染的過程，保護機體[11]。本研究中聯(lián)合檢測NTM肺病患者血清中IL-2R、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α和PCT的含量，只有TNF-α含量顯著高于對照組，與前述報道一致。

綜上所述，TNF-α在非結核分枝桿菌肺病的感染和形成中起著非常重要的作用，因此檢測血清中TNF-α含量的變化有助于非結核分枝桿菌肺病的診斷。

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10.3969/j.issn.1009-4393.2016.6.015

遼寧 114000 鞍山市千山醫(yī)院 （李紅）