張　明，楊維艷，劉亞寧

（河北省任丘市人民醫(yī)院，河北滄州　062550）

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曲妥珠單抗對(duì)Her-2陽(yáng)性乳腺癌患者腫瘤細(xì)胞增殖的影響

張明，楊維艷，劉亞寧

（河北省任丘市人民醫(yī)院，河北滄州062550）

摘要：目的探究曲妥珠單抗對(duì)人類表皮生長(zhǎng)因子受體2（Her-2）陽(yáng)性乳腺癌患者腫瘤細(xì)胞增殖的影響。方法選取2011年2月至2013年2月收治的100例早期乳腺癌女性患者，根據(jù)實(shí)時(shí)定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（qRT-PCR）將其分為Her-2陽(yáng)性組和Her-2陰性組，各50例，比較兩組患者術(shù)前和化學(xué)治療后的外周血細(xì)胞角蛋白19（CK19）表達(dá)水平。再將50例Her-2陽(yáng)性患者隨機(jī)均分為觀察組和對(duì)照組，各25例，觀察組于化學(xué)治療后繼續(xù)使用曲妥珠單抗進(jìn)行治療，療程為3個(gè)月，比較兩組患者化學(xué)治療后3個(gè)月外周血CK19的表達(dá)水平。結(jié)果手術(shù)前Her-2陽(yáng)性組CK19表達(dá)陽(yáng)性50例（100.00%），Her-2陰性組CK19表達(dá)陽(yáng)性16例（32.00%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；化學(xué)治療后，Her-2陽(yáng)性患者CK19表達(dá)陽(yáng)性41例（82.00%），Her-2陰性患者CK19表達(dá)陽(yáng)性7例（14.00%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。觀察組曲妥珠單抗治療3個(gè)月后的CK19平均水平為（21.2±16.5）μg/L，對(duì)照組為（73.1±38.6）μg/L，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論早期乳腺癌患者中，Her-2基因的表達(dá)與與外周血CK19的水平密切相關(guān)，于化學(xué)治療后應(yīng)用曲妥珠單抗可明顯降低外周血CK19的表達(dá)水平。

關(guān)鍵詞：曲妥珠單抗；人類表皮生長(zhǎng)因子受體2；乳腺癌；細(xì)胞增殖

對(duì)于早期乳腺癌患者，人類表皮生長(zhǎng)因子受體2 （Her-2）基因的表達(dá)水平是影響其預(yù)后的重要因素，Her-2陽(yáng)性患者5年生存率明顯低于Her-2陰性患者［1］。研究表明，Her-2基因的表達(dá)與外周血中上皮源性細(xì)胞特異性標(biāo)志基因細(xì)胞角蛋白19（CK19）的水平相關(guān)，而后者是早期乳腺癌外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞（CTCs）的異常表達(dá)產(chǎn)物［2］。由于Her-2基因的表達(dá)與CTCs水平尚缺少大量實(shí)驗(yàn)證據(jù)［3］，筆者選取我院100例早期乳腺癌患者，以CK19為標(biāo)志物，比較患者Her-2表達(dá)與CTCs的關(guān)系，并探討化學(xué)治療（簡(jiǎn)稱化療）后繼續(xù)使用曲妥珠單抗對(duì)外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞（CTCs）的影響，現(xiàn)報(bào)道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料

選取我院2011年2月至2013年2月收治的早期乳腺癌女性患者100例，納入標(biāo)準(zhǔn)［4］：所有患者知曉本次試驗(yàn)并簽署相關(guān)知情同意書(shū)；經(jīng)術(shù)前穿刺、組織病理證實(shí)為早期乳腺癌；行一側(cè)或雙側(cè)乳腺切除術(shù)并于術(shù)后行化療；無(wú)高血壓、糖尿病、心肝腎功能不全等嚴(yán)重內(nèi)科疾病。根據(jù)實(shí)時(shí)定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（qRT-PCR）技術(shù)均分為Her-2陽(yáng)性組和Her-2陰性組，各50例。Her-2陽(yáng)性組患者年齡26～51歲，平均（44.5±3.8）歲；Her-2陰性組患者年齡26～52歲，平均（45.2±3.9）歲。兩組患者一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性，詳見(jiàn)表1。

表1　乳腺腫瘤患者一般資料比較［例（%），n=50］

1.2方法

化療方案［5］：環(huán)磷酰胺600 mg靜脈注射，甲氨蝶呤10 mg靜脈注射，5-氟尿嘧啶500 mg靜脈滴注，先注射甲氨蝶呤，6 h后注射環(huán)磷酰胺和5-氟尿嘧啶，每7～10 d給藥1次，每次用藥2～3次，停用2～3周，持續(xù)6個(gè)月。兩組患者于手術(shù)前、化療、療程結(jié)束后分別抽取靜脈血，提取并于-80℃保存RNA。將50例Her-2陽(yáng)性患者隨機(jī)均分為觀察組和對(duì)照組，各25例，觀察組患者在化療結(jié)束后繼續(xù)給予曲妥珠單抗注射劑（商品名赫賽汀，上海羅氏制藥有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字J20110020，規(guī)格為每瓶440 mg∶20 mL），1次/周，每次110 mg，靜脈滴注，療程為3個(gè)月。3個(gè)月后，以同樣方法收集患者的靜脈血標(biāo)本，制備RNA。所有標(biāo)本嚴(yán)格按照2700型PCR擴(kuò)增儀（PE公司）說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，使用TrizolRNA提取試劑盒（Promoga公司），CK19引物（上海生工公司合成）計(jì)算得到外周血CK19的相對(duì)濃度。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理分析。計(jì)量資料以±s表示，采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以百分比表示，應(yīng)用X2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

結(jié)果見(jiàn)表2和表3。

表2　Her-2陽(yáng)性與陰性患者外周血CK19表達(dá)比較［例（%），n=50］

表3　曲妥珠單抗對(duì)Her-2陽(yáng)性患者外周血CK19的影響（±s，μg/L，n=25）

表3　曲妥珠單抗對(duì)Her-2陽(yáng)性患者外周血CK19的影響（±s，μg/L，n=25）

組別觀察組對(duì)照組t值　P治療前81.6±49.2 79.6±45.7 0.15 >0.05治療后21.2±16.5 73.1±38.6 6.20 ＜0.05

3　討論

乳腺癌是女性最常見(jiàn)的惡性腫瘤，起源于乳腺腺上皮組織，發(fā)病率較高。由于乳腺本身并不是維持人體生命活動(dòng)的重要器官，因此原位癌并不致命。但乳腺細(xì)胞喪失正常細(xì)胞的結(jié)構(gòu)功能，細(xì)胞間松散，極易脫落發(fā)生轉(zhuǎn)移，一旦發(fā)生轉(zhuǎn)移將嚴(yán)重降低乳腺癌的預(yù)后，因此早發(fā)現(xiàn)、早治療是關(guān)鍵。乳腺癌細(xì)胞最常見(jiàn)的轉(zhuǎn)移方式為淋巴轉(zhuǎn)移和血行轉(zhuǎn)移［6-7］，在血液中發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞是判斷其發(fā)生轉(zhuǎn)移的重要標(biāo)志。

CK19是一種上皮特異性蛋白，在血液、骨髓和淋巴結(jié)等處不表達(dá)［8-9］，因此外周血中CK19升高對(duì)判斷腫瘤轉(zhuǎn)移具有重要意義。研究表明，Her-2基因與腫瘤細(xì)胞的增殖有密切關(guān)系，其高表達(dá)往往預(yù)示癌細(xì)胞有轉(zhuǎn)移，分化低且預(yù)后較差，但其對(duì)CK19的影響目前尚不明確［10］。對(duì)于乳腺癌的治療，以往為手術(shù)切除加術(shù)后化療，但傳統(tǒng)的化療方案對(duì)外周血CK19降低效果不佳且治療過(guò)程中的毒副反應(yīng)較大［11］。

曲妥珠單抗是目前臨床公認(rèn)的唯一用于乳腺癌靶向治療的藥物，通過(guò)附著于Her-2來(lái)阻止人體表皮生長(zhǎng)因子的附著，促使Her-2蛋白被相關(guān)蛋白酶降解，從而阻斷癌細(xì)胞的增殖，提高Her-2陽(yáng)性乳腺癌患者的無(wú)病生存期和總生存期［12］。曲妥珠單抗單獨(dú)應(yīng)用有效率較低，可能是由于癌細(xì)胞造成的低pH環(huán)境有利于其逃避曲妥珠單抗與之結(jié)合，目前尚不十分明確，但傳統(tǒng)化療后應(yīng)用曲妥珠單抗可明顯提高其有效率。美國(guó)國(guó)家癌癥綜合治療聯(lián)盟（NCCN）指南于2010年將曲妥珠單抗列為Her-2陽(yáng)性乳腺癌患者的新型輔助治療方案。

本研究結(jié)果顯示，Her-2陽(yáng)性的早期乳腺癌患者手術(shù)前和傳統(tǒng)化療后其外周血CK19表達(dá)陽(yáng)性率均明顯高于Her-2陰性的患者，觀察組患者在應(yīng)用曲妥珠單抗3個(gè)月后CK19水平明顯低于觀察組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

綜上所述，早期乳腺癌患者中，Her-2基因的表達(dá)可提高外周血中CK19的水平，降低乳腺癌的預(yù)后。于傳統(tǒng)化療后應(yīng)用曲妥珠單抗可明顯加強(qiáng)對(duì)Her-2陽(yáng)性患者癌細(xì)胞增殖的抑制作用，減少CTCs數(shù)量，降低外周血CK19水平，但是否可以縮減傳統(tǒng)化療的劑量和療程有待進(jìn)一步探究。

參考文獻(xiàn)：

［1］郭婧昀，姚廣裕，顧繁，等.曲妥珠單抗對(duì)HER-2過(guò)表達(dá)乳腺癌細(xì)胞株mTOR信號(hào)通路影響的觀察［J］.中華腫瘤防治雜志，2012，19（13）：983-986.

［2］顧建芬.赫賽汀治療人類表皮生長(zhǎng)因子受體2高表達(dá)晚期乳腺癌30例［J］.中國(guó)藥業(yè)，2012，21（7）：54-55.

［3］殷科，曹永晉.曲妥珠單抗新輔助化療表皮生長(zhǎng)因子受體2陽(yáng)性乳腺癌的臨床療效及安全性評(píng)價(jià)［J］.中國(guó)臨床藥理學(xué)雜志，2015，31（9）：725-727.

［4］吳志勇，孫勝杰，焦順昌.曲妥珠單抗與順鉑序貫聯(lián)合應(yīng)用對(duì)乳腺癌細(xì)胞抑制作用的研究［J］.中國(guó)藥物應(yīng)用與檢測(cè)，2012，9（1）：26-28.

［5］羅群英，甘煒堅(jiān)，杜斌盛，等.3種化療方案治療乳腺癌的藥物經(jīng)濟(jì)學(xué)分析［J］.中國(guó)執(zhí)業(yè)藥師，2015，12（4）：37-42.

［6］廖寧，張國(guó)淳，李學(xué)瑞，等.新輔助紫杉醇聯(lián)合曲妥珠單抗在表皮生長(zhǎng)因子受體2陽(yáng)性可手術(shù)乳腺癌患者中的療效及安全性評(píng)價(jià)［J］.中華腫瘤雜志，2010，32（7）：544-547.

［7］李偉，潘燕，李學(xué)軍.HER2陽(yáng)性乳腺癌治療藥物曲妥珠單抗耐藥機(jī)制及新一代靶向藥物研究進(jìn)展［J］.中國(guó)臨床藥理學(xué)雜志，2014，30（1）：48-51.

［8］王研，李俊杰，狄根紅，等.曲妥珠單抗治療141例人表皮生長(zhǎng)因子受體2陽(yáng)性乳腺癌的回顧性分析［J］.中華腫瘤雜志，2014，32（11）：864-867.

［9］孫宏治，王巍，李晴，等.曲妥珠單抗聯(lián)合輔助化療治療晚期乳腺癌的臨床觀察［J］.中國(guó)生化藥物雜志，2014，32（5）：398-400.

［10］王斌，趙倩，朱麗萍.乳腺癌保乳手術(shù)前應(yīng)用TAC化療方案59例［J］.中國(guó)藥業(yè)，2014，23（13）：72-74.

［11］張聚良，姚青，陳江浩，等.曲妥珠單抗對(duì)HER-2陽(yáng)性早期乳腺癌外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞的影響［J］.現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2013，21（2）：279-281.

［12］段巧虹，張騰躍，黃海良，等.曲妥珠單抗對(duì)不同pH培養(yǎng)HER2陽(yáng)性乳腺癌細(xì)胞增殖的抑制及促凋亡作用［J］.微循環(huán)學(xué)雜志，2013，23（4）：1-3.

中圖分類號(hào)：R969.4；R977.6

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1006-4931（2016）07-0017-02

收稿日期：（2015-07-23）