陳曉旦，于　俠，馮　念

(浦東新區(qū)光明中醫(yī)醫(yī)院檢驗(yàn)科，上海 201300)

?

·臨床研究·

350例系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者臨床與自身抗體等相關(guān)檢測(cè)分析

陳曉旦，于俠，馮念

(浦東新區(qū)光明中醫(yī)醫(yī)院檢驗(yàn)科，上海 201300)

摘要:目的對(duì)系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)住院患者臨床表現(xiàn)及自身抗體等相關(guān)檢查結(jié)果分析。方法收集2012年1月至2014年12月長(zhǎng)海醫(yī)院風(fēng)濕免疫科診斷350例SLE患者臨床特征及實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果，采用線性免疫印跡、間接免疫熒光等方法進(jìn)行檢測(cè)研究。結(jié)果350例SLE患者中，臨床表現(xiàn)以關(guān)節(jié)炎為主，且男女發(fā)生率比例顯著不同?？购丝贵w類型以顆粒型及均質(zhì)型為主。SLE抗P抗體陰性患者盤狀紅斑、光敏性、漿膜炎、白細(xì)胞減少的發(fā)生率與抗P抗體陽性患者比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；抗Sm抗體陰性患者盤狀紅斑、雷諾現(xiàn)象的發(fā)生率與抗Sm抗體陽性患者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論抗核抗體(ANA)類型、抗P抗體或抗Sm抗體陽性的SLE患者其臨床表現(xiàn)及檢查結(jié)果顯著不同，為臨床診治提供可靠依據(jù)。

關(guān)鍵詞:系統(tǒng)性紅斑狼瘡；自身抗體；臨床特點(diǎn)

系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)是一種臨床發(fā)病緩慢、表現(xiàn)多樣，血液內(nèi)存在多種自身抗體的免疫性疾病，大量免疫復(fù)合物的產(chǎn)生及沉積導(dǎo)致了器官和系統(tǒng)的致病。國(guó)內(nèi)SLE患病率為1/1 000,高于西方國(guó)家報(bào)道的患病率(1/2 000)，病因與遺傳、環(huán)境因素、雌激素等有關(guān)[1]。典型SLE病例診斷較容易，而非典型病例診斷上往往較困難，需要結(jié)合臨床癥狀和檢查所見綜合考慮。筆者對(duì)350例SLE患者臨床特征與血清自身抗體譜等進(jìn)行分析，為進(jìn)一步探討我國(guó)SLE診治提供參考依據(jù)。

1資料與方法

1.1一般資料選取2012年1月1日至2014年12月31日長(zhǎng)海醫(yī)院風(fēng)濕免疫科住院患者共350例，均來自上海及周邊江浙滬地區(qū)的首次住院患者，男37例，女313例，年齡12～84歲。所選病例診斷均符合1997年美國(guó)風(fēng)濕病學(xué)會(huì)(ACR)修訂的SLE診斷標(biāo)準(zhǔn)[2]，排除原發(fā)性干燥綜合征、藥物性狼瘡、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等。

1.2儀器與試劑NE-9000全自動(dòng)血液分析儀(日本希森美康公司)，BECKMAN immage 800特定蛋白分析儀(貝克曼庫爾特商貿(mào)有限公司)、 ANA、ANAs抗體檢測(cè)試劑盒(德國(guó)歐蒙醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷股份公司)，全自動(dòng)免疫印跡儀(德國(guó)歐蒙醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷股份公司)，SUNRISE酶標(biāo)儀(奧地利Tecan公司)。

1.3方法

1.3.1標(biāo)本采集所有樣本均為入院時(shí)清晨空腹采集靜脈血，血常規(guī)2 mL,規(guī)定時(shí)間內(nèi)檢測(cè)，靜脈血3 mL,經(jīng)離心分離血清，2 000 r/min離心15 min，置-80 ℃冰箱凍存。

1.3.2抗核抗體譜(ANAs)檢測(cè)采用德國(guó)歐蒙醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷股份公司線性免疫印跡法(LIA)法檢測(cè)ANAs特異性抗體，包括nRNP/Sm、Sm、SS-A、Ro-52、SS-B、Scl-70、PM-Scl、Jo-1、著絲點(diǎn)蛋白B、增殖細(xì)胞核抗原(PNCA)、雙鏈DNA(dsDNA)、核小體、組蛋白、核糖體(rRNP)、線粒體-M2(AMA-A2)抗體。1∶100稀釋的患者血清1.5 mL與膜條上的靶抗原反應(yīng)30 min，洗滌3次,每次5 min，加入1.5 mL酶標(biāo)記的抗人IgG(酶結(jié)合物)反應(yīng)30 min，洗滌3次,每次5 min，加入底物液反應(yīng)15 min，蒸餾水清洗膜條終止反應(yīng)，采用配套軟件EUROLineScan進(jìn)行顯色結(jié)果灰度值掃描分析，灰度值小于或 5為L(zhǎng)IA陰性(-)；6～10為L(zhǎng)IA臨界(±)；≥11為L(zhǎng)IA陽性(+)。

1.3.3抗核抗體(ANA)檢測(cè)采用德國(guó)歐蒙醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷股份公司HEP-2細(xì)胞和猴肝的冰凍切片作為抗原基質(zhì)，采用間接免疫熒光法(IIF)檢測(cè)患者血清ANA。按照試劑操作說明，血清稀釋后與抗原基質(zhì)片反應(yīng)30 min(同時(shí)設(shè)陽性和陰性對(duì)照)，浸泡5 min，加入熒光標(biāo)記的二抗避光孵育30 min，浸泡5 min，加甘油封片后熒光顯微鏡下判讀結(jié)果。ANA以抗體滴度大于或等于1∶100為陽性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料以率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1不同性別的 SLE患者一般資料比較本研究SLE患者男性36例，平均年齡42.9歲，女性314例，平均年齡37.2歲，其中年齡小于或等于16歲6例，16～<45歲235例，≥45歲109例?；颊咂骄挲g(37.9±14.1)歲,平均病程(3.9±5.4)年。

2.2男女 SLE患者臨床表現(xiàn)的發(fā)生率比較見表1。

2.3抗體陽性率比較抗核抗體譜檢測(cè)中，抗ss-DNA陽性率最高68%(239例)，其次抗ENA抗體SS-A 63%(220例)，再次抗ds-DNA 57%(199例)，而抗增殖細(xì)胞核抗原及抗ENA抗體JO-1未檢測(cè)到陽性病例。

2.4ANA類型比較(粗、細(xì))顆粒型陽性率43%(152例)，均質(zhì)型42%(146例)，胞漿型17%(60例)，陰性5%(19例)。

2.5抗P抗體、抗Sm抗體患者相關(guān)檢測(cè)結(jié)果比較見表2、3。

表2　抗P抗體患者相關(guān)檢測(cè)結(jié)果比較[n(%)]

*:P<0.05，與抗P抗體陽性患者比較。

表3　抗Sm抗體患者相關(guān)檢測(cè)結(jié)果比較[n(%)]

*:P<0.05，與抗Sm抗體陽性患者比較。

3討論

選取2012年1月1日至2014年12月31日來自于長(zhǎng)海醫(yī)院風(fēng)濕免疫科首次住院患者作為研究對(duì)象，男女比例及平均年齡均與Li等[3]報(bào)道相一致。SLE患者主要為生育期的女性患者，在亞洲-太平洋地區(qū)平均年齡為25.7～34.5歲[4],本研究患者平均年齡為(37.9±14.1)歲，平均病程(3.9±5.4)年，考慮原因?yàn)樵缙赟LE患者在社區(qū)及二級(jí)綜合醫(yī)院診治后，尋求更好治療轉(zhuǎn)三級(jí)醫(yī)院，導(dǎo)致統(tǒng)計(jì)所得年齡高于其他相關(guān)報(bào)道。

本研究SLE患者的關(guān)節(jié)炎發(fā)生率最高為57%，低于Li等[3]的報(bào)道結(jié)果。不同性別的SLE患者臨床表現(xiàn)的發(fā)生率顯著不同，女性患者以關(guān)節(jié)炎發(fā)生率最高(59%)，而男性患者以發(fā)熱發(fā)生率最高(54%)。350例患者自身抗體檢測(cè)陽性率為抗ss-DNA 68.3%(239例)，抗ds-DNA 57%(199例)，抗核糖體抗體26%(91例)，抗Sm 23.7%(83例)?？筪s-DNA檢出率與Houman等[5]報(bào)道結(jié)果相近，但抗ds-DNA、抗核糖體抗體、抗Sm檢出率均低于Li等[3]報(bào)道的結(jié)果。

本研究ANA陽性率98.6%，類型以顆粒型(粗、細(xì))及均質(zhì)型為主，其次為胞漿型和核仁型。標(biāo)本中不同的ANA與底物中的靶抗原結(jié)合，出現(xiàn)不同的熒光模型，熒光模型為進(jìn)一步檢測(cè)特異性自身抗體具有指示作用，所以熒光型的判斷具有重要的臨床意義[6-12]。陳邁瓊等[13]研究發(fā)現(xiàn)顆粒型與干燥綜合征血清抗體標(biāo)志物具有相關(guān)性；均質(zhì)型與SLE血清抗體標(biāo)志物具有相關(guān)性?？筆抗體及抗Sm抗體是SLE診斷的特異性抗體，在疾病的分類方面有重要價(jià)值[7]，本研究抗Sm抗體血清陽性率25%，其與顴部紅斑、盤狀紅斑、心包以及白細(xì)胞減少相關(guān)[8-9]。

淋巴細(xì)胞參與的細(xì)胞免疫功能紊亂及細(xì)胞凋亡異常是SLE發(fā)病的重要因素，臨床上常伴有貧血、白細(xì)胞減少或淋巴細(xì)胞絕對(duì)數(shù)減少等血液系統(tǒng)改變多于疾病活動(dòng)有關(guān)[10]。SLE患者常伴有多臟器功能的損害，如肺損害、腎臟損害、心臟損害等嚴(yán)重的并發(fā)癥，其中以腎臟損害最為顯著[11]。

綜上所述，本研究提供了上海及周邊地區(qū)SLE患者臨床特征及其相關(guān)檢測(cè)結(jié)果，為臨床診治提供了詳實(shí)的資料。

參考文獻(xiàn)

[1]葉任高，陸再英．內(nèi)科學(xué)[M]．北京：人民衛(wèi)生出版社，2005：892．

[2]Bertsias G,Ioannidis JP,Boletis J,et al.EULAR recommendations for the management of systemic lupus erythematosus.Report of a Task Force of the EULAR Standing Committee for International Clinical Studies Including Therapeutics[J].Ann Rheum Dis,2008,67(2):195-205.

[3]Li WG,Ye ZZ,Yin ZH,et al.Clinical and immunological characteristics in 552 systemic lupus erythematosus patients in a southern province of China[J].Int J Rheum Dis,2015,10(1):1756-1785.

[4]Jakes RW,Bae SC,Louthrenoo W,et al.Systematic review of the epidemiology of systemic lupus erythematosus in the Asia-Pacific region:prevalence,incidence,clinical features,and mortality[J].Arthritis Care Res (Hoboken),2012,64(2):159-168.

[5]Houman MH,Smiti-Khanfir M,Ben GI,et al.Systemic lupus erythematosus in Tunisia:demographic and clinical analysis of 100 patients[J].Lupus,2004,13(3):204-211.

[6]Lin JL,Dubljevic V,Fritzler MJ,et al.Major immunoreactive domains of human ribosomal P proteins lie N-terminal to a homologous C-22 sequence:application to a novel ELISA for systemic lupus erythematosus[J].Clin Exp Immunol,2005,141(1):155-164.

[7]Petri M,Orbai AM,Alarcón GS,et al.Derivation and validation of the Systemic Lupus International Collaborating Clinics classification criteria for systemic lupus erythematosus[J].Arthritis Rheum,2012,64(8):2677-2686.

[8]Tang XH,Huang YM,Deng WM,et al.Clinical and serologic correlations and autoantibody clusters in systemic lupus erythematosus a retrospective review of 917 patients in South China[J].Medicine (Baltimore),2010,89(1):62-67.

[9]Lu R,Robertson JM,Bruner BF,et al.Multiple autoantibodies display association with lymphopenia,proteinuria,and cellular casts in a large,ethnically diverse SLE patient cohort[J].Autoimmune Dis,2012,20(1):819-834.

[10]林向陽，朱小春．風(fēng)濕免疫性疾病的檢驗(yàn)診斷[M]．北京：人民衛(wèi)生出版社，2006：125-140．

[11]黎莉，陳順樂，沈南，等．初發(fā)SLE患者Th1/Th2及調(diào)控因子IL-18基因研究[J]．中國(guó)免疫學(xué)雜志，2002，18(5)：360-364．

[12]李金明．抗核抗體的檢測(cè)程序與結(jié)果報(bào)告及解釋[J]．中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2009，32(12)：1325-1328．

[13]陳邁瓊，趙迪，鄧曉剛，等．抗核抗體核型與抗核抗體譜檢測(cè)結(jié)果對(duì)比分析[J]．國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2014，35(14)：1859-1860．

(收稿日期：2016-01-28)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.09.050

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1673-4130(2016)09-1266-03