●甘映群

由腸道致病菌污染飲用水引起的腹瀉事件

●甘映群

2015年11月上旬，我縣石塘鎮(zhèn)石塘糖廠連續(xù)一個月出現(xiàn)兩百多名腹瀉病人，我中心即派出人員到現(xiàn)場進行調(diào)查防治。在流行病學追蹤傳染源中，針對患者無年齡、性別、工種之分，我檢驗科對飲用水的水樣及腹瀉大便進行了病原學的分離鑒定實驗。確定出現(xiàn)腹瀉人群是由于飲用水被傷寒沙門氏菌污染引起的?，F(xiàn)報告如下：

1 流行病學調(diào)查

1.1 中毒發(fā)生經(jīng)過

2015年11月3 日上午十點半，，該糖廠近10人因腹痛腹瀉到廠衛(wèi)生室看醫(yī)生。橫縣疾病預防控制中心接到廠衛(wèi)生室請求，要求前往石塘鎮(zhèn)石塘糖廠，近一個月多以來，已斷斷續(xù)續(xù)出現(xiàn)兩百多名腹瀉患者就醫(yī)，這兩百多名腹瀉患者無年齡、性別、工種之分，針對這種情況，依照流行病的特征，采取流行病學的方法開展調(diào)查，對腹瀉病人大便、糖廠飲用水進行腸道致病菌實驗室檢驗。

1.2 現(xiàn)場調(diào)查

2015年11月3 日上午，該糖廠廠區(qū)環(huán)境衛(wèi)生良好，空氣清新，無垃圾亂堆放蚊蟲蒼蠅亂飛的現(xiàn)象。廠食堂環(huán)境衛(wèi)生干凈整齊，從業(yè)人員均按照衛(wèi)生標準要求，每年度通過健康體檢，符合食品衛(wèi)生法的要求。水源為抽取的地下水，水源的周圍是池塘、溪水，農(nóng)田，飲用水是通過地下水抽取到水塔，經(jīng)沉淀澄清后供應(yīng)，往年每季度的衛(wèi)生檢測抽查工作中，飲用水中的微生物指標細菌總數(shù)和大腸菌群數(shù)均符合飲用水衛(wèi)生指標。

2 臨床表現(xiàn)

這兩百多名腹瀉的患者，無性別、工種之分，年齡不等，各年齡段均有發(fā)生，最小4歲，最大63歲，大多數(shù)患者初感腹中不適，一天2次黃綠色水樣便，后次數(shù)增加便變稀、隱隱腹痛、全身乏力，低燒等病狀，有少數(shù)一天腹瀉6、7次，有惡心、嘔吐、畏寒等癥狀，有的經(jīng)過服用幾天的抗生素等治療，可以痊愈一個星期左右，但之后會又反復出現(xiàn)便變稀、腹痛等腹中不適的病狀。

3 實驗室檢驗

分別采樣腹瀉病人大便、糖廠飲用水，進行腸道致病菌實驗室檢驗。

3.1 水樣前增菌

用無菌瓶采集400ml水樣三份，各吸取20ml水樣放入盛有225ml緩沖蛋白胨水的無菌均質(zhì)杯中，于37℃培養(yǎng)18h.

3.2 增菌

輕輕搖動培養(yǎng)過的樣品混合物，各移取1ml，轉(zhuǎn)種于10ml四硫磺酸鈉煌綠增菌液內(nèi)，經(jīng)過42℃培養(yǎng)24h。同時，另取1ml，轉(zhuǎn)種于10ml亞硒酸鹽胱氨酸增菌液內(nèi)，于37℃培養(yǎng)24h。

3.3 水樣的病原學分離

分別用接種環(huán)取增菌液1環(huán)，劃線接種于一個亞硫酸鉍（BS）瓊脂平板和一個木糖賴氨酸脫氧膽鹽（XLD）瓊脂平板，于36±1℃分別培養(yǎng)24h或48h,觀察各個平板上生長的菌落。

3.4 生化鑒定

自BS瓊脂上挑取菌落為黑色有金屬光澤，菌落周圍培養(yǎng)基有顯棕色的可疑菌落和自XLD瓊脂上挑取菌落粉紅色，帶黑色中心的可疑菌落。分別接種三糖鐵瓊脂，，先在斜面劃線，再于底層穿刺，于36±1℃培養(yǎng)24h。在產(chǎn)酸、產(chǎn)氣、產(chǎn)硫化氫，產(chǎn)堿變紅斜面上，挑取菌苔作下列實驗，按《腸桿菌科細菌生化鑒定編碼手冊》接種，11種生化結(jié)果：硫化氫+丙氨酸-尿素-側(cè)金盞花-山梨醇+丙二酸鈉-賴氨酸-鳥氨酸+靛基質(zhì)-VP-枸櫞酸鹽+注：賴氨酸、鳥氨酸均作對照實驗，檢索編碼手冊2131，得到鑒定結(jié)果為傷寒沙門氏菌，符合機率0.7894，鑒定值100%。

3.5 血清學分型鑒定

挑取菌苔。被A-F多價血清凝集（+++）后，依次O2、O3、O7、O9和O11因子血清作凝集，試驗結(jié)果被O9凝集（+++），判定D群。再用H洗源，第一相d因子血清凝集（+++）。按照《考夫夢傷寒沙門氏菌屬抗原表解》報告分離出的病原菌是傷寒沙門氏菌。

3.6 腹瀉病人大便的病原學分離

我們對患者50人采用肛拭取便，按常規(guī)腸道致病菌增菌后，與水樣的化學及血清學實驗方法一樣進行病原學分離。從26人大便中分離培養(yǎng)出傷寒沙門氏菌。結(jié)果如下表：

檢查人數(shù)年齡 分離出傷寒沙門氏菌人數(shù) 備注4歲-12歲12人 6人50第二次大便28歲-63歲38人 20人

通過病原學分離，診斷血清鑒定實驗，生化實驗，水樣與患者大便分離傷寒沙門氏菌的生化特性相同，抗原結(jié)構(gòu)相同，屬同型傷寒沙門氏菌。

4 討論

（1）沙門氏菌是一種常見的食源性腸道致病菌，但是目前飲用水的國家衛(wèi)生標準里，飲用水中的微生物指標只有細菌總數(shù)和大腸菌群數(shù)指標作為日常衛(wèi)生檢測，沒有把腸道致病菌納入飲用水衛(wèi)生指標中。而在自然環(huán)境中，腸道致病菌普遍存在，很容易造成污染周圍環(huán)境，在受到糞便污染的水中，沙門氏菌是可存活1-2個月，沙門氏菌在正常溫度的水中不易繁殖，但可生存2-3周。由于糖廠水源地的周圍為池塘、溪水、農(nóng)田，有雞、鴨、牛、人的糞便污染，再加上此時正值夏秋季節(jié)，天氣熱，沙門氏菌最適繁殖溫度為37℃，在20℃以上即能大量繁殖，同時天氣熱，人們胃腸道屏障功能減弱，抵抗力降低，飲用的水沒有經(jīng)過漂白粉消毒，而是渾水經(jīng)沉淀澄清后供應(yīng)的，所以致使沙門氏菌污染了飲用的水，引起了連續(xù)一個月出現(xiàn)兩百多名腹瀉病人的腹痛事件。

（2）該糖廠連續(xù)一個月出現(xiàn)兩百多名的腹瀉病人，均飲用糖廠供應(yīng)的飲用水，發(fā)病時間集中，從患者糞便及飲用水中均檢出沙門氏菌，經(jīng)過一個療程的抗生素等治療，患者全部痊愈。通過病原學分離、鑒定、血清學實驗、生化實驗，所有結(jié)果充分說明引起本次病人腹瀉的病原菌是傷寒沙門氏菌，其傳染源來自水源，被水源周圍的污水污染。因此，可以判定本次腹瀉事件是由傷寒沙門氏菌污染水源所造成糖廠兩百多名職工家屬的腹瀉現(xiàn)象，從這個事件，是否可以增加飲用水的國家衛(wèi)生標準中的微生物指標，把腸道致病菌指標作為飲用水日常衛(wèi)生檢測，納入衛(wèi)生指標中，值得探討。

（作者單位：橫縣疾病預防控制中心檢驗科）

[1]何曉青.衛(wèi)生防疫細菌檢驗[M].北京：新華出版社，1989.

[2]浙江省軍區(qū)后勤部衛(wèi)生檢驗所.腸桿菌科細菌生化鑒定編碼手冊[M].浙江：浙江省防疫教研所，1997.

[3]中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局.GB4789.4-2010

[4]食品衛(wèi)生檢驗方法微生物部分[S].北京：中國標準出版社,2010.