●李欣
快速石蠟切片技術在病理檢驗中的應用
●李欣
目的:探討快速石蠟切片技術在病理檢驗中的應用。方法:收集我院從2013年12月——2015年12月手術中快速石蠟切片病例共100例作為研究對象,并選擇同期500例常規(guī)病理切片進行對比。使用快速工序及步驟,當中有取材、脫水、浸蠟、切片和封固染色等多個步驟。將石蠟切片與快速切片之間進行對比,分析其制作的時間和診斷的效果等。結果:采取快速石蠟切片技術與常規(guī)切片技術相比較能明顯的縮短每一個步驟,在完成制作后,細胞的形態(tài)等也沒有發(fā)生明顯的變化。結論:采取快速石蠟切片技術在病理檢驗中進行應用能有效的提升制作的效果,同時能在制作時間上大大縮短,因此十分值得在臨床上推廣使用。
快速石蠟切片技術;病理檢驗;應用
在日常的病理檢驗過程中,對于病理切片技術的要求當前越來越高,但傳統(tǒng)的方式中對于病理切片制作的時間總是受到限制,難以滿足實際需求。因此,針對當前我國的病理快速診斷的范式中主要有加入溫石蠟或者冷凍技術,但在實踐中發(fā)現(xiàn)采取冷凍切片技術不容易進行連續(xù)性的切片,無法制作較薄的切片,因此當前亟需對快速石蠟切片技術進行研究和應用[1]。本次研究中選取了我院從2013年12月——2015年12月手術中快速石蠟切片病例共100例作為研究對象,并選擇同期500例常規(guī)病理切片進行對比。詳細報告如下:
1.1 一般資料
選取了我院從2013年12月——2015年12月手術中快速石蠟切片病例共100例作為研究對象,并選擇同期500例常規(guī)病理切片進行對比。在100例快速石蠟切片中共有男性60例,女性40例,年齡在25——78歲之間。在對比對象中共有男性320例,女性180例,年齡在30——80歲之間。在研究中所制作額標本包括小腸標本、乳腺標本、胃鏡活檢標本和子宮標本,大小為2cm×2cm×2cm。
1.2 試劑
浸蠟劑包含,一份軟蠟、一份硬脂酸和一份石蠟混合均勻。脫水劑使用各種濃度的酒精。以丙酮作為透明劑。固定劑中包含一份15毫升的40%福爾馬林,一份80毫升的90%酒精、一份5毫升的冰乙酸混合均勻。將試劑放到微波爐進行加熱,并將溫度控制到50℃以內。
1.3 操作工序
將組織標本共劃分為6份,將其進行固定、脫水、透明和浸蠟操作。同時要將不同時間段進行微波的標本進行包里,切片、染色,并對比冰凍切片、快速石蠟切片。
切片組織制作完成以后,將切片與常規(guī)切片之間進行對比,觀察快速診斷的質量及診斷率。通過研究和觀察分析發(fā)現(xiàn),快速切片組織下的組織結構更加清晰,要明顯的優(yōu)于對照組,在鏡頭下能明顯的看到完整的細胞形態(tài),細胞核細胞質較為完整,與常規(guī)切面下的組織無差異,并且制作的時間上要明顯的提升。詳細如下圖所示:
分類(n) 固定時間 脫水時間 透明時間 浸蠟時間觀察組100 1.68±0.2 1.8±0.21 2.2±0.3 2.35±0.58對照組500 8.5±1.23 9.55±3.12 8.54±5.21 7.58±8.21
兩組對比差異十分明顯,具有統(tǒng)計學意義(P<0.05).
從本次的研究中可以看出,快速石蠟切片操作有著快速和操作簡單的優(yōu)勢,并且在進行試驗的過程中所使用的器材價格合理,試驗環(huán)境不受到外部環(huán)境的影響,在整體上有著絕對的優(yōu)勢[2]。但即便快速石蠟切片操作中有著諸多的優(yōu)勢在進行實際使用的過程中也需要對一些問題加以重視。
快速石蠟切片操作中對于石蠟切片的要求比較嚴格,要求必須要就地取材,因此在一些典型的病變部位需要進行取樣分析[3]。同時,快速石蠟的結果一定要與臨床的思路之間相符合,在十分嚴謹?shù)那闆r下才能得出最終的結論。在鏡頭下快速石蠟切片需要將所有的假象全部排出在位,需要隨時的注意著細胞的變化和衰退現(xiàn)象發(fā)生。在進行實際操作的過程中首先需要保證制作切片的溫度控制在72℃之內,如果無法保證這個溫度那么則可以適當?shù)膶囟冉档吞幚怼M瑫r,在取材的過程中應當注意要嚴密的觀察組織病變處的邊緣組織,要求組織的大小適中。在操作中組織的厚度會直接的影響到脫水的時間和效果,因此一定要將厚度控制在1mm之內,最大不能超過1.5mm。在標本的制作過程中一般很難確定新鮮的標本厚度,因此可以將實驗組織厚度固定并修整以后在進行制作。此外,在處理的環(huán)節(jié)中,需要準備好超出體積12倍以上的液體,脫水以后要全部等待干了以后才能進行接下來的工作,這個標準應當以肉眼看到灰白色為主[4]。在制作的過程中如果遇到含有組織纖維或者脂肪的組織一定要將固定脫水的時間延長處理。
快速石蠟切片技術對于環(huán)境和實驗的條件要求不高,技術成本較低,同時在進行各項操作的過程中都能在自動換氣系統(tǒng)中操作進行,因此杜絕了實驗過程中所造成的污染問題。此外,導致石蠟切片技術制作效果受到影響的還有幾點重要的因素,主要包括:加熱的時間長短和煮沸的時間等。加熱時間過長會導致組織出現(xiàn)收縮現(xiàn)象,甚至發(fā)生脫水問題。加熱的時間不足又會導致切片的效果,導致切片困難。
總之,快速石蠟切片技術的應用是一項十分實用的技術,不僅在實踐操作上較為簡單,快速。同時也不需要使用到復雜的一起,整個操作過程中十分的清晰。除此之外,通過快速石蠟切片的方式能減少在操作中的時間,有效的保證細胞的完整形態(tài),從而提升工作的整體效果和效率,所取得的效果與常規(guī)的切片質量相符,又能滿足病理檢驗上的需求,十分值得在臨床上推廣使用。
(作者單位:赤峰學院附屬醫(yī)院病理科)
[1]Demirtaoglu M.,Ilknur T.,Lebe B.,■zkan,李政霄.快速石蠟切片技術在病理檢驗中的應用[J].世界核心醫(yī)學期刊文摘(皮膚病學分冊),2011,(12):88—90.
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[3]雷軍,劉玉明,李美均.快速石蠟切片技術在病理診斷中的應用[J].人民軍醫(yī),2013,(08):50—52.
[4]王曉冰,李鋒.快速石蠟切片在病理診斷中的應用[J].實用癌癥雜志,2014,(03):33—36.