亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        穩(wěn)定沉默TIPE2后削弱PolyI:C誘導(dǎo)的人單核/巨噬細(xì)胞凋亡

        2016-05-30 10:48:04江潔曙王珊珊方晶晶
        中國現(xiàn)代醫(yī)生 2016年16期
        關(guān)鍵詞:免疫凋亡

        江潔曙 王珊珊 方晶晶

        [摘要] 目的 觀察TIPE2穩(wěn)定沉默后對TLR激動(dòng)劑Poly I:C誘導(dǎo)THP-1凋亡的影響。 方法 以THP-1細(xì)胞為研究對象,使用不同TLR激活劑與THP-1細(xì)胞孵育后,采用熒光定量PCR檢測TIPE2 mRNA表達(dá)。應(yīng)用慢病毒技術(shù)穩(wěn)定沉默TIPE2表達(dá)后,MTT法檢測細(xì)胞增殖,Annexin V/PI雙染法檢測細(xì)胞凋亡,免疫印跡分析TIPE2沉默后Caspase-8表達(dá)水平變化。 結(jié)果 TLRs激活劑中TLR3特異性激活劑Poly I:C可以顯著上調(diào)TIPE2的表達(dá)(P<0.05),隨作用時(shí)間延長,可顯著抑制THP-1細(xì)胞增殖,并可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。利用慢病毒技術(shù)穩(wěn)定沉默THP-1細(xì)胞中TIPE2表達(dá)以后,可顯著削弱Poly I:C誘導(dǎo)的TIPE2表達(dá)(P<0.05),TIPE2沉默后,Poly I:C抑制THP-1增殖和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的效應(yīng)顯著削弱,隨后免疫印跡的結(jié)果顯示,Caspase-8的活化形式,p41/42表達(dá)下調(diào)。 結(jié)論 Poly I:C通過上調(diào)TIPE2表達(dá)可抑制THP-1細(xì)胞增殖,并可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,穩(wěn)定沉默TIPE2后可一定程度削弱上述效應(yīng),可能與下調(diào)Caspase-8的活性形式表達(dá)有關(guān)。

        [關(guān)鍵詞] Poly I:C;TIPE2;免疫;TLR;凋亡

        [中圖分類號] R392 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1673-9701(2016)16-0001-05

        [Abstract] Objective To investigate the influence of stably silent TIPE2 on THP-1 apoptosis induced by TLR agonist Poly I:C. Methods THP-1 cells were selected as the study subjects. The expression of TIPE2 mRNA was detected by fluorogenic quantitative PCR after incubation of THP-1 cells with different TLR activating agents. After stable silence of TIPE2 by lentiviral technique, the cell proliferation was detected by MTT, apoptosis was detected by Annexin V/PI double-staining method, and changes of Caspase-8 expression level after silence of TIPE2 was analyzed by western blot. Results TLR3 specific activator Poly I:C could significantly up-regulate the expression of TIPE2(P<0.05). Along with the time of action, it could significantly inhibit the proliferation of THP-1, and induce apoptosis. Stable silence of TIPE2 in THP-1 by lentiviral technique could significantly impair the TIPE2 expression induced by Poly I:C (P<0.05). After silence of TIPE2, the effects of Poly I:C on inhibition the proliferation of THP-1 and induction of apoptosis were significantly impaired, and the result of following western blot showed active form of Caspase-8 and down-regulation of p41/42 expression. Conclusion By up-regulating the expression of TIPE2, Poly I:C can inhibit the proliferation of THP-1, and induce apoptosis, which can be partially impaired by stable silence of TIPE2, possibly due to down-regulation of Caspase-8 active form expression.

        [Key words] Poly I:C; TIPE2; Immune; TLR; Apoptosis

        免疫系統(tǒng)內(nèi)穩(wěn)態(tài)的維護(hù)機(jī)制極其復(fù)雜和神秘,改變調(diào)控免疫細(xì)胞死亡或者活化擴(kuò)增免疫細(xì)胞均可以打破免疫細(xì)胞的內(nèi)穩(wěn)態(tài)環(huán)境,最終帶來極為致命的炎性疾病,目前研究發(fā)現(xiàn)一組超家族蛋白對免疫系統(tǒng)的內(nèi)穩(wěn)態(tài)維持至關(guān)重要。尤其是具有hexahelical bundle 結(jié)構(gòu)的蛋白稱之為死亡效應(yīng)domain(DED),與Caspase家族蛋白的CARD結(jié)構(gòu)域以及募集區(qū)域有結(jié)構(gòu)類似,參與到細(xì)胞死亡和其他的信號通路中。

        TIPE中壞死因子誘導(dǎo)蛋白8-類似蛋白2作為這類家族蛋白的成員之一,近年來,在機(jī)體免疫的內(nèi)穩(wěn)態(tài)中扮演重要作用,其主要機(jī)制與調(diào)控T細(xì)胞受體和Toll樣受體信號通路有關(guān),除了在炎癥組織中表達(dá)外,TIPE2還在髓樣組織和多種腫瘤細(xì)胞中表達(dá),說明其中可能發(fā)揮著不同的功能[1]。有報(bào)道顯示,TIPE2可以調(diào)控Toll樣受體(Toll-like receptor,TLR)的表達(dá),并對周圍不同的刺激信號強(qiáng)度產(chǎn)生響應(yīng)[2]。但是上游TLR的活化是否也可以影響TIPE2的表達(dá),是否可以影響人單核/巨噬細(xì)胞活性和增殖?尚未見有相關(guān)的報(bào)道。本項(xiàng)目于2014年1月~2015年12月期間,以人單核細(xì)胞株THP-1為考察對象,考察不同TLR激動(dòng)劑對TIPE2表達(dá)的影響,并探討相關(guān)的分子機(jī)制。

        1 材料與方法

        1.1 細(xì)胞培養(yǎng)和TLR激動(dòng)劑處理

        人THP-1細(xì)胞購自中國科學(xué)院上海細(xì)胞庫。新生牛血清,DMEM培養(yǎng)基和0.25%胰蛋白酶購自美國Life technology公司;人TLR1-9激動(dòng)劑購自InvivoGen公司,抗人TIPE2和Caspase-8抗體購自Abcam公司。其余試劑均為國產(chǎn)分析純。THP-1細(xì)胞培養(yǎng)在含有10%胎牛血清以及100 U/mL青-鏈霉素霉素的DMEM培養(yǎng)液中,置于含有5%CO2,37℃培養(yǎng)箱中,每隔2~3天換液。取對數(shù)生長期細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。細(xì)胞計(jì)數(shù)后將試劑盒中的TLR1-9特異性激動(dòng)劑用培養(yǎng)液稀釋后使用,終濃度分別為0.1 μg/mL和1 μg/mL,孵育24 h后,Trizol裂解細(xì)胞,提取RNA,按照方法1.6中的描述檢測TIPE2 mRNA表達(dá)水平。

        1.2細(xì)胞抑制實(shí)驗(yàn)

        細(xì)胞抑制率使用四甲基偶氮噻唑藍(lán)法(methlthiazoletrazolium assay,MTT assay),將THP-1細(xì)胞以1×104/mL密度接種于6孔或12孔板,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h后,Poly I:C配置成10 mg/mL儲(chǔ)液,使用時(shí)用完全培養(yǎng)稀釋,加入到細(xì)胞中使得終濃度分別為0.1 μg/mL、1 μg/mL,設(shè)置空白對照組。于24 h后收集細(xì)胞,加入5 mg/mL的MTT溶液,37℃孵育4 h后,棄上清每孔加150 μL DMSO后在酶標(biāo)儀上570 nm處讀取吸光值(OD)。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。計(jì)算抑制率=(1-ODPloyI:C/OD空白對照組)×100%。穩(wěn)定沉默TIPE2后的細(xì)胞抑制率基本方法同上,實(shí)驗(yàn)前1 d細(xì)胞按1×104/孔鋪96孔板,設(shè)shTIPE2穩(wěn)定沉默組(經(jīng)過嘌呤霉素篩選后穩(wěn)定沉默TIPE2的THP-1細(xì)胞),shScramble組(經(jīng)過嘌呤霉素篩選后的空白載體組),加入Poly I:C后孵育24 h后加入MTT檢測細(xì)胞在570 nm處的吸光度值變化。

        1.3慢病毒載體構(gòu)建以及穩(wěn)定沉默TIPE2細(xì)胞株建立

        退火形成雙鏈DNA片段。與雙酶切線性化后的pLKO.1-TRC載體(含GFP編碼序列)連接。取4 μL所得的連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化DH5α感受態(tài)細(xì)胞,37℃恒溫培養(yǎng)過夜。挑取3個(gè)單克隆菌落接種至Ampicillin抗性的LB培養(yǎng)液中,小搖過夜。用試劑盒小量提取質(zhì)粒后,分別用EcoRI和NcoI酶切鑒定,產(chǎn)物進(jìn)行1%瓊脂糖凝膠電泳。鑒定正確的質(zhì)粒命名為:pLKO.1-TRC-TIPE2-shRNA1。將酶切鑒定正確的細(xì)菌送測序以進(jìn)一步確認(rèn)序列。

        病毒包裝時(shí),轉(zhuǎn)染前1 d對293T細(xì)胞進(jìn)行分皿。使用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法將含shTIPE2或shScramble質(zhì)粒,分別同pΔ8.91及pMD2.G這2個(gè)包裝質(zhì)粒按照10∶10∶1的質(zhì)量比混合后,共轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞。12 h后更換完全培養(yǎng)基。37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng),并在熒光顯微鏡下觀察熒光表達(dá)情況。48~72 h期間收集上清,0.45 μm濾器過濾后備用。感染時(shí),取對數(shù)生長期THP-1細(xì)胞,接種于6孔板培養(yǎng)12 h后,棄上清每孔滴加含病毒液體200 μL,加入含polybrene(濃度4 μg/mL)的培養(yǎng)基,感染8 h后換普通培養(yǎng)基;48 h后加含嘌呤霉素(濃度0.5 μg/mL)的培養(yǎng)基,隔2 d更換該培養(yǎng)基。3次篩選后加普通培養(yǎng)基培養(yǎng)24 h后收集細(xì)胞于培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

        1.4 細(xì)胞凋亡檢測

        對細(xì)胞凋亡分析,使用細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(Becton Dickinson公司,美國)進(jìn)行膜聯(lián)蛋白V-FITC/PI雙染色。以不同濃度的Poly I:C處理24 h處理后,收集THP-1細(xì)胞,PBS漂洗一遍后,300 μL結(jié)合緩沖液重懸細(xì)胞,加入FITC標(biāo)記膜聯(lián)蛋白V和碘化丙啶(PI)各5 μL,避光孵育15 min,隨后在細(xì)胞懸液中再加入200 μL結(jié)合緩沖液,過200目尼龍網(wǎng)后通過BDAccuriTMC6流式細(xì)胞分析。利用單染Annexin V和PI的細(xì)胞設(shè)門后,統(tǒng)計(jì)凋亡細(xì)胞和存活細(xì)胞比例。

        1.5 熒光定量PCR

        收集各組細(xì)胞,用Trizol提取細(xì)胞總RNA,使用MMLV逆轉(zhuǎn)錄酶逆轉(zhuǎn)錄為cDNA。以各組cDNA為模板,加入緩沖液、引物等進(jìn)行PCR,各樣本重復(fù)3次。TIPE2:上游引物序列5- GGA ACA TCC AAG GCA AGA CTG-3-,下游引物序列5- AGC ACC TCA CTG CTT GTC TCA TC-3;GAPDH作為內(nèi)參對照序列上游引物5-GT CGT ATT GGG CGC CTG GTC ACC-3,下游引物5-CAC ACC CAT GAC GAA CAT GGG GGC-3。20 μL反應(yīng)體系中包括2×SYBR?誖Premix Ex TaqTM II 10 μL,上游引物(10 μM)0.5 μL,下游引物(10 μM)0.5 μL,cDNA 1 μL,ddH2O 8 μL,反應(yīng)條件95℃預(yù)變性3 min,以下步驟進(jìn)行30個(gè)循環(huán):95℃變性10 s,55℃退火30 s,72℃延伸30 s。每份標(biāo)本設(shè)3個(gè)復(fù)孔,取其循環(huán)閾值(Ct)均值,分別計(jì)算各組的ΔCt(Ct目的基因-Ct內(nèi)參基因),再以正常組為1進(jìn)行均一化,以2-ΔΔCt表示基因的相對表達(dá)水平。

        1.6 免疫印跡

        THP-1細(xì)胞經(jīng)Poly I:C處理24 h后,冷PBS漂洗一遍,RIPA裂解細(xì)胞,收集蛋白并用BCA法測定蛋白濃度。按20 μg/泳道蛋白量進(jìn)行SDS-PAGE電泳,轉(zhuǎn)膜并用脫脂牛奶封閉后,加入抗TIPE2抗體(1∶2000)和β-actin(1∶4000)抗體于4℃孵育過夜。取出膜用TBS-T漂洗3次后,將膜和相應(yīng)2抗(1∶5000)在搖床上室溫孵育1 h,取出膜后TBS-T漂洗3次后,加入ECL化學(xué)發(fā)光試劑顯色后,用LI-COR免疫印跡成像系統(tǒng)進(jìn)行掃描,GAPDH條帶為內(nèi)參。

        1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

        應(yīng)用GraphPad Prism軟件進(jìn)行差異顯著性分析。實(shí)驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù)為3次獨(dú)立實(shí)驗(yàn)均值,計(jì)量結(jié)果用均值±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,符合正態(tài)分布,則兩組間比較根據(jù)數(shù)據(jù)類型采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn),多組間比較用ANOVA方差分析;若不符合正態(tài)分布,則采用非參數(shù) Mann-Whitney 檢驗(yàn)。P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 不同TLR激活劑對TIPE2表達(dá)的影響

        從封三圖1A中來看,TIPE2受到Poly I:C活化的影響,其他特異性激動(dòng)劑也有一定的變化,但是Poly I:C對TIPE2的上調(diào)作用(相對表達(dá)強(qiáng)度在0.1 μg/mL和1 μg/mL時(shí)候分別為(0.80±0.06)和(2.30±0.21)最為顯著,Poly I:C主要為TLR3的激動(dòng)劑。既往有研究顯示,Poly I:C可抑制多種細(xì)胞的增殖,并可誘導(dǎo)凋亡[3],利用MTT實(shí)驗(yàn)檢測不同濃度Poly I:C對THP-1細(xì)胞抑制率的影響,結(jié)果如封三圖1B和1C所示,Poly I:C可對THP-1細(xì)胞有顯著的抑制,在1 μg/mL時(shí)候其抑制率可到達(dá)42%,同時(shí)隨著作用時(shí)間的延長抑制率逐漸上調(diào)。隨后,用Annexin V/PI雙染檢測Poly I:C作用后對THP-1細(xì)胞凋亡的影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn),隨Poly I:C濃度增加凋亡細(xì)胞逐漸增加而存活細(xì)胞顯著減少,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見封三圖1D。

        2.2 TIPE2 穩(wěn)定沉默細(xì)胞株建立

        既往研究顯示,TIPE2可能參與Caspase-8的活化,因此為了證實(shí)TLR3特異性抑制Poly I:C對THP-1的抑制和誘導(dǎo)凋亡可能與TIPE2的上調(diào)有關(guān),通過慢病毒技術(shù)穩(wěn)定沉默THP-1細(xì)胞中TIPE2的表達(dá),如封三圖2A所示,將構(gòu)建好的載體轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞DH5a后,小抽得到質(zhì)粒,并驚醒酶切鑒定,原質(zhì)粒在酶切后的片段大小應(yīng)為7872、2155和190 bp,而接入shRNA后熒光為7872、190、303和42,對于酶切正確的質(zhì)粒送去測序進(jìn)行驗(yàn)證(封三圖2B),取正確的質(zhì)粒大抽以后去內(nèi)毒素用于轉(zhuǎn)染包裝病毒用。如封三圖2C所示,得到的病毒滴度較高,可以較好的感染THP-1細(xì)胞,隨后對TIPE2用免疫印跡進(jìn)行驗(yàn)證后如封三圖2D所示,設(shè)計(jì)的3個(gè)shRNA都可以比較好的沉默TIPE2的表達(dá)。

        2.3 TIPE2沉默后對Poly I:C誘導(dǎo)凋亡的影響

        如封三圖3所示,用Poly I:C處理穩(wěn)定沉默TIPE2的THP-1細(xì)胞后發(fā)現(xiàn),shScramble組中的TIPE2對Poly I:C依然有很好的響應(yīng),可以顯著上調(diào)TIPE2的表達(dá),而在shTIPE2組,Poly I:C對TIPE2的mRNA上調(diào)作用被顯著削弱。隨后比較shScramble組和shTIPE2組在Poly I:C處理后對細(xì)胞抑制率的影響,結(jié)果顯示shScramble組的細(xì)胞抑制率為(41.2±4.3)%,而在shTIPE2組為(16.0±2.3)%,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。隨后利用流式細(xì)胞檢測凋亡情況發(fā)現(xiàn),在Poly I:C處理24 h后,shTIPE2組中凋亡細(xì)胞比例為(15.2±1.6)%,而在shScramble組中為(32.2±3.9)%,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。提示TIPE2穩(wěn)定沉默后可顯著削弱由Poly I:C誘導(dǎo)的THP-1的凋亡。隨后,分析Caspase-8的表達(dá)情況發(fā)現(xiàn),在shTIPE2組中,活化形式p41/42表達(dá)下調(diào)。

        3 討論

        TLR是一類介導(dǎo)天然免疫的跨膜信號傳遞受體家族,在細(xì)胞活化信號的轉(zhuǎn)導(dǎo)中發(fā)揮重要作用,是聯(lián)系天然免疫與適應(yīng)性免疫的橋梁。近年來,研究表明TLR介導(dǎo)的天然免疫在病毒誘導(dǎo)的炎性細(xì)胞損傷過程中同樣具有重要意義。TLR3是TLR家族中的重要成員,由胞外富含亮氨酸的重復(fù)序列、膜結(jié)構(gòu)域和胞質(zhì)內(nèi)激酶結(jié)構(gòu)域組成[4]。能夠特異性的識別致病性病毒的雙鏈dsRNA。雙鏈RNA (double stranded RNA,dsRNA)是TLR3所識別的病原相關(guān)分子模式(PAMP),多種病毒在復(fù)制期間可以產(chǎn)生大量的dsRNA,因此,TLR3可以作為機(jī)體抗病毒的重要防線。TLR3不僅在宿主抗病毒過程中具有重要作用,而且還與一些自身免疫病的發(fā)生存在密切關(guān)系。近期研究發(fā)現(xiàn),壞死細(xì)胞釋放的RNA或體外轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的mRNA同樣可以活化TLR3,提示體內(nèi)壞死組織釋放的RNA可以作為TLR3的內(nèi)源性配體啟動(dòng)或調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答。由于大部分自身免疫病并未發(fā)現(xiàn)與病毒感染具有直接聯(lián)系,因此,內(nèi)源性配體對TLR3的活化在自身免疫病的發(fā)病機(jī)制中可能具有重要意義。

        腫瘤壞死因子-α誘導(dǎo)蛋白-8樣分子2(tumor necrosis factor-α induced protein 8 like-2,TIPE2)作為一種新發(fā)現(xiàn)的蛋白分子,與腫瘤壞死因子誘導(dǎo)蛋白-8家族成員擁有某些共有序列,TIPE2選擇性表達(dá)的在淋巴源性和髓源性免疫細(xì)胞中,對固有免疫和細(xì)胞免疫起到負(fù)性調(diào)控作用。可抑制激活轉(zhuǎn)錄因子ap-1和nf-kb的活化[2,5]。與小鼠主要在淋巴細(xì)胞中表達(dá)所不同的是,tipe2在人體的多數(shù)組織中都有表達(dá),比如干細(xì)胞、神經(jīng)元腦組織和腦干中、食管以及宮頸的鱗狀上皮細(xì)胞中、膀胱和尿道的交界處、結(jié)腸、胃腺上皮細(xì)胞、結(jié)腸、闌尾中都有表達(dá)[6]。尤其在終末分化的細(xì)胞中為高表達(dá),前體細(xì)胞表達(dá)下調(diào),提示一方面與增殖有關(guān),一方面與分化以及相關(guān)蛋白的形成有關(guān)。tipe2在多個(gè)疾病中都呈現(xiàn)異常表達(dá),包括肝炎[7]、肝癌、中風(fēng)[8]、腎排異反應(yīng)[9]、HCV、哮喘[10]、重癥肌無力[11]、紅斑狼瘡[12]等?;颊叩耐庵苎衪ipe2的表達(dá)在多種自身免疫性疾病中都是下調(diào)的,提示免疫細(xì)胞處于高度活化狀態(tài)。通過特異性誘導(dǎo)免疫細(xì)胞中TIPE2的表達(dá),或許有助于減少抑制自身免疫細(xì)胞活性,減少對正常組織的損傷。

        有研究顯示內(nèi)源性TLR3的激活劑,Poly I:C可以誘導(dǎo)多種細(xì)胞的凋亡,如膽管上皮細(xì)胞,進(jìn)而可能在肝硬化炎性損傷中發(fā)揮作用[13]。外源性的或者內(nèi)源性的dsRNA可以通過TLR3或IRF-3途徑誘導(dǎo)多種細(xì)胞死亡,如胰腺β細(xì)胞死亡[14]、前列腺癌[15]、唾液腺上皮細(xì)胞[16]。TLR3是模式識別受體,所引起的凋亡主要與Caspase-8有關(guān)[17]。TIPE2作為Caspase-8 重要的伴侶蛋白,在其活性的發(fā)揮中扮演重要作用,因此可以認(rèn)為Poly I:C刺激TLR3 活化后所引起的細(xì)胞凋亡中,其中一個(gè)途徑為通過活化Caspase-8和TIPE2 實(shí)現(xiàn)。此外,在腫瘤中的研究顯示[18],TIPE2在多種腫瘤中表達(dá)下調(diào),且tipe2是ras的主要抑制因子,通過抑制Ralgds后抑制ras復(fù)合物的形成,最后引起ral和akt的抑制,如果上調(diào)以后則可引起ras活性下降,細(xì)胞增殖下降,遷移減少。因此,我們推斷Poly I∶C刺激活化tlr3 以后通過上調(diào)tipe2的表達(dá),可能還可進(jìn)一步引起ras的抑制,從而抑制細(xì)胞增殖,并可能影響細(xì)胞的遷移,吞噬和抗菌的能力。tipe2缺失后肝癌細(xì)胞增殖和遷移速度加快,并可以抑制細(xì)胞胞吐,而過量表達(dá)tipe2以后則可以抑制體內(nèi)外肝癌細(xì)胞則增殖遷移和侵襲[19, 20],后續(xù)研究顯示和rac1和減少F-actin以及MMP-9,以及uPA的活化有關(guān),我們在研究中也觀察到沉默tipe2后,thp-1細(xì)胞增殖加快,與既往研究相吻合[19,20]。

        因此,TIPE2不僅在自身免疫系統(tǒng)疾病中扮演重要作用,同時(shí)在腫瘤的發(fā)展中也具有一定的意義,人為上調(diào)TIPE2在腫瘤細(xì)胞中的表達(dá)可能有助于抑制癌細(xì)胞增殖和遷移,但是也有可能影響免疫細(xì)胞的活化,因此,如果將TIPE2作為藥物靶點(diǎn)開發(fā)腫瘤治療藥物時(shí),應(yīng)該注意到對正常免疫系統(tǒng)的負(fù)面影響。

        [參考文獻(xiàn)]

        [1] Y Lou SL. The TIPE(TNFAIP8)family in inflammation, immunity, and cancer[S]. Mol Immunol,2011-9-14.

        [2] Sun H,Gong S,Carmody RJ,et al. TIPE2,a negative regulator of innate and adaptive immunity that maintains immune homeostasis[J]. Cell,2008,133(3):415-426.

        [3] Takemura R,Takaki H,Okada S,et al. Poly I:C-Induced, TLR3/RIP3-dependent necroptosis backs up immune effector-mediated tumor elimination in vivo[J]. Cancer Immunol Res,2015,3(8):902-914.

        [4] Boehme KW,Compton T. Innate sensing of viruses by toll-like receptors[J]. J Virol,2004,78(15):7867-7873.

        [5] Yu-Chen,F(xiàn)an Na,Wang Yan-Yan,et al. TIPE2 mRNA level in PBMCs serves as a novel biomarker for predicting short-term mortality of acute-on-chronic hepatitis B liver failure: A prospective single-center study[J]. Medicine,2015, 94(39):e1638.

        [6] Zhang G,Hao C,Lou Y,et al. Tissue-specific expression of TIPE2 provides insights into its function[J]. Mol Immunol,2010,47(15):2435-2442.

        [7] Xi W,Hu Y,Liu Y,et al. Roles of TIPE2 in hepatitis B virus-induced hepatic inflammation in humans and mice[J]. Mol Immunol,2011,48(9-10):1203-1208.

        [8] Zhang Y,Wei X,Liu L,et al. TIPE2,a novel regulator of immunity,protects against experimental stroke[J]. J Biol Chem, 2012,287(39):32546-32555.

        [9] Jia L,Gui B,Tian P,et al. TIPE2,a novel biomarker for clinical chronic kidney allograft rejection[J]. Artif Organs,2013,37(2):221-225.

        [10] Ma Y,Liu X,Wei Z,et al. The expression and significance of TIPE2 in peripheral blood mononuclear cells from asthmatic children[J]. Scand J Immunol,2013,78(6):523-528.

        [11] Zhang Y,Shao Z,Zhang X,et al. TIPE2 play a negative role in TLR4-mediated autoimmune T helper 17 cell responses in patients with myasthenia gravis[J]. J Neuroimmune Pharmacol, 2015,10(4):635-644.

        [12] Li F,Zhu X,Yang Y,et al. TIPE2 alleviates systemic lupus erythematosus through regulating macrophage polarization[J]. Cell Physiol Biochem,2016,38(1):330-339.

        [13] Rong GH,Yang GX,Ando Y,et al. Human intrahepatic biliary epithelial cells engulf blebs from their apoptotic peers[J]. Clin Exp Immunol,2013,172(1):95-103.

        [14] Dogusan Z,García M,F(xiàn)lamez D,et al. Double-stranded RNA induces pancreatic beta-cell apoptosis by activation of the toll-like receptor 3 and interferon regulatory factor 3 pathways[J]. Diabetes,2008,57(5):1236-1245.

        [15] Gambara G,Desideri M,Stoppacciaro A,et al. TLR3 engagement induces IRF-3-dependent apoptosis in androgen-sensitive prostate cancer cells and inhibits tumour growth in vivo[J]. J Cell Mol Med,2015,19(2):327-339.

        [16] Nakamura H,Horai Y,Suzuki T,et al. TLR3-mediated apoptosis and activation of phosphorylated Akt in the salivary gland epithelial cells of primary Sjgren's syndrome patients[J]. Rheumatol Int,2013,33(2):441-450.

        [17] Estornes Y,Toscano F,Virard F,et al. dsRNA induces apoptosis through an atypical death complex associating TLR3 to caspase-8[J]. Cell Death Differ,2012,19(9):1482-1494.

        [18] Gus-Brautbar Y,Johnson D,Zhang L,et al. The anti-inflammatory TIPE2 is an inhibitor of the oncogenic Ras[J]. Mol Cell,2012,45(5):610-618.

        [19] Zhang YH,Yan HQ,Wang F,et al. TIPE2 inhibits TNF-α-induced hepatocellular carcinoma cell metastasis via Erk1/2 downregulation and NF-κB activation[J]. Int J Oncol,2015,46(1):254-264.

        [20] Cao X,Zhang L,Shi Y,et al. Human tumor necrosis factor(TNF)-alpha-induced protein 8-like 2 suppresses hepatocellular carcinoma metastasis through inhibiting Rac1[J]. Mol Cancer, 2013,12(1):149.

        (收稿日期:2016-02-19)

        猜你喜歡
        免疫凋亡
        對奶牛飼養(yǎng)獸醫(yī)防疫的分析
        普伐他汀對人胰腺癌細(xì)胞SW1990的影響及其協(xié)同吉西他濱的抑瘤作用
        細(xì)胞自噬與人卵巢癌細(xì)胞對順鉑耐藥的關(guān)系
        藏藥對免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)作用的研究
        早期腸內(nèi)營養(yǎng)對急性重型顱腦外傷患者免疫及炎癥指標(biāo)的影響
        運(yùn)動(dòng)與機(jī)體免疫能力關(guān)系研究綜述
        人間(2016年24期)2016-11-23 19:12:24
        愛尚生活(2016年9期)2016-10-21 10:52:39
        血清中細(xì)胞因子的檢測在胃癌中的意義
        右美托咪定混合氯胺酮對新生大鼠離體海馬細(xì)胞凋亡的影響
        Livin和Survivin在卵巢癌中的表達(dá)及相關(guān)性研究
        亚洲无AV码一区二区三区| 国产丶欧美丶日本不卡视频| 乌克兰粉嫩xxx极品hd| 又硬又粗又大一区二区三区视频| 久久久久亚洲av无码观看| 亚洲国产另类久久久精品小说| 91免费国产高清在线| 国产午夜精品av一区二区三| 亚洲乱码中文字幕一线区| 亚洲精品美女久久777777| 久久久久亚洲精品天堂| 禁止免费无码网站| 日韩有码中文字幕在线视频| 国产精品久久久久久| 亚洲中文字幕无码一区| 亚洲Va中文字幕无码毛片下载| 中文字幕亚洲精品一二三区| 亚洲第一区二区精品三区在线| 欧美xxxxx高潮喷水麻豆| 青青国产揄拍视频| 亚洲饱满人妻视频| 中文字幕亚洲乱亚洲乱妇| 久久女人精品天堂av影院麻| 久久亚洲av成人无码电影a片| 欧美黑人性暴力猛交喷水| 国产成年无码V片在线| 无码啪啪人妻| 一区二区亚洲精品国产精| 成人免费看aa片| 成人性做爰aaa片免费看| 国产在线网址| 国产一区二区三区特黄| 夜夜高潮夜夜爽夜夜爱爱一区 | 人妻精品无码一区二区三区| 国产精品18久久久久网站| 人妻熟女妇av北条麻记三级| 女女同恋一区二区在线观看| 五十路丰满中年熟女中出| 99久久精品一区二区三区蜜臀| 亚洲中文字幕女同一区二区三区| 日本精品熟妇一区二区三区 |