●焦煉

病理技術(shù)HE染色在病理診斷中的應(yīng)用效果觀察

●焦煉

目的：探討病理診斷應(yīng)用病理技術(shù)HE染色的臨床意義。方法：將我院2015年3月至2016年5月的622例病理組織石蠟切片作為研究對(duì)象，以隨機(jī)為基本原則，將其隨機(jī)平均分為2組，各有311例。常規(guī)制片后，對(duì)照組予以HE染色，觀察組根據(jù)對(duì)照組操作過(guò)程中的不足，實(shí)施相應(yīng)改進(jìn)措施，進(jìn)行HE染色。觀察兩組不同切片類型的染色診斷情況。結(jié)果：研究發(fā)現(xiàn)，在染色診斷準(zhǔn)確情況方面，觀察組脂肪、胃腸、骨以及膽制片的概率分別為92.54%、99.32%、88.24%、95.74%，較對(duì)照組數(shù)據(jù)而言均明顯更高，P值小于0.05。結(jié)論：病理技術(shù)HE染色應(yīng)用于病理診斷中臨床價(jià)值較高，實(shí)際應(yīng)根據(jù)切片不同特點(diǎn)，予以不同染色技術(shù)，盡可能保證診斷準(zhǔn)確可靠性，為疾病下一步治療奠定基礎(chǔ)，值得進(jìn)一步推廣使用于臨床。

HE染色；病理診斷；病理技術(shù)；疾病診斷

臨床診治工作中，病理技術(shù)是應(yīng)用較為廣泛、成熟的一項(xiàng)技術(shù)，其完善與發(fā)展對(duì)疾病診斷準(zhǔn)確性意義重大[1]。其中，免疫組織化學(xué)技術(shù)以及原位雜交技術(shù)能夠在臨床取得一定效果，但同時(shí)存在應(yīng)用局限性，而染色技術(shù)在臨床中的作用越來(lái)越重要。HE染色作為常見(jiàn)方法之一，主要使用蘇木精以及伊紅染料進(jìn)行操作，實(shí)際過(guò)程中發(fā)現(xiàn)診斷結(jié)果不但受操作者技術(shù)影響，主要還取決于染色效果及切片質(zhì)量等因素，故為提高診斷準(zhǔn)確性，合理改進(jìn)HE染色操作極為必要。本文旨在探討病理診斷應(yīng)用HE染色的臨床意義，如下。

1 資料和方法

1.1 基線資料

選取622例2015年3月至2016年5月我院所制的病理組織石蠟切片進(jìn)行此次研究，以隨機(jī)原則分為對(duì)照組與觀察組。

311 例觀察組包含脂肪制片67例、胃腸146例、骨51例、膽47例；311例對(duì)照組包含脂肪制片70例、胃腸141例、骨54例、膽46例。

1.2 方法

制片：將組織置于固定液中，促使蛋白質(zhì)凝固，便于保持細(xì)胞結(jié)構(gòu)，之后以酒精作為脫水劑予以脫水透明操作，水分脫去后，將其置于二甲苯中，將酒精完全置換出后予以浸蠟包埋，并通過(guò)切片機(jī)將其切成5～6um的薄片，水浴燙平烘干。

對(duì)照組予以HE染色，石蠟應(yīng)用二甲苯脫去后，再予以酒精（濃度由高至低）、蒸餾水，之后實(shí)施染色操作，加入蘇木精，此時(shí)細(xì)胞核及核糖體成藍(lán)紫色，之后加入伊紅染料，細(xì)胞質(zhì)呈現(xiàn)淡紅色或者紅色，根據(jù)操作時(shí)的不足，制定相應(yīng)改進(jìn)措施，并于觀察組中實(shí)施。

觀察組進(jìn)行改進(jìn)后的HE染色法，根據(jù)組織病理特點(diǎn)選擇不同染色方法及脫水、固定時(shí)間，針對(duì)小標(biāo)本，適當(dāng)縮短脫水以及固定時(shí)間，針對(duì)大標(biāo)本（如脂肪組織等）適當(dāng)將脫水及固定時(shí)間延長(zhǎng)，針對(duì)硬度較大的組織則應(yīng)利用新切片刀，軟組織或者破碎組織可使用舊切片刀。染色過(guò)程中，應(yīng)密切關(guān)注制品厚度及溫度，并以此為依據(jù)，對(duì)各步驟時(shí)間進(jìn)行合理調(diào)整，在使用新產(chǎn)品時(shí)實(shí)施試染操作，降低廠家及批號(hào)差異對(duì)結(jié)果造成的影響，染色所用試劑應(yīng)注意利用有色瓶保存，并做好標(biāo)簽（包含名稱、時(shí)間、含量），并根據(jù)具體情況予以冷藏；當(dāng)染色后出現(xiàn)化學(xué)變化時(shí)需進(jìn)行進(jìn)一步研究，對(duì)比第二次結(jié)果，若是染液或相關(guān)試劑所致則應(yīng)及時(shí)更換；另外，制品應(yīng)全程保持干燥，避免造成不利影響。

染色后觀察制片，并通過(guò)顯微鏡查驗(yàn)結(jié)果。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察兩組不同切片類型的染色診斷準(zhǔn)確情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

將兩組研究對(duì)象的染色診斷準(zhǔn)確概率使用SPSS21.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析處理，均為計(jì)數(shù)資料，采用卡方檢驗(yàn)，兩組數(shù)據(jù)比較差異顯著的必要條件為兩者之間P值小于0.05。

2 結(jié)果

結(jié)果可知，在染色診斷準(zhǔn)確情況方面，觀察組脂肪、胃腸、骨以及膽制片的概率分別為92.54%、99.32%、88.24%、95.74%，均明顯高于對(duì)照組數(shù)據(jù)，P值小于0.05，具體結(jié)果如表1所示：

表1：對(duì)比兩組染色診斷準(zhǔn)確概率（n，%）

3 討論

病理診斷可很好的發(fā)現(xiàn)疾病發(fā)生原因，并可推究其發(fā)展及結(jié)局，相比于分析性及影像診斷而言[2]，此方法具有權(quán)威、準(zhǔn)確、客觀、可靠等優(yōu)勢(shì)。與此同時(shí)，此方法也具有一定劣勢(shì)，操作者技術(shù)、診斷者經(jīng)驗(yàn)等因素均會(huì)對(duì)結(jié)果造成嚴(yán)重影響[3]，導(dǎo)致漏診、誤診情況，故盡可能減少客觀因素影響，改善病理技術(shù)對(duì)疾病診斷、治療均具有重要意義。

本研究發(fā)現(xiàn)HE染色結(jié)果會(huì)受到具體操作影響，為保證質(zhì)量，觀察組在對(duì)照組染色過(guò)程中總結(jié)經(jīng)驗(yàn)、找出不足，同時(shí)制定相應(yīng)改進(jìn)計(jì)劃[4]，重點(diǎn)強(qiáng)調(diào)取材方法、各步驟時(shí)間，如工具的選擇應(yīng)以盡可能保留組織結(jié)構(gòu)形態(tài)為原則，當(dāng)鉗子的應(yīng)用無(wú)法很好夾取組織或者會(huì)對(duì)組織造成破壞時(shí)，及時(shí)更換成針管實(shí)施操作，將組織謹(jǐn)慎吸出，這在很大程度上減少了對(duì)機(jī)體、標(biāo)本的損害[5]，一般適用于癌細(xì)胞或者腫物等壞死組織；此外，脫鈣也是重要環(huán)節(jié)，通常用于骨組織，臨床應(yīng)注意先實(shí)施脫鈣操作再予以制片，盡可能保證結(jié)構(gòu)完整、確保染色效果；在予以組織檢測(cè)時(shí)，先要進(jìn)行固定操作，保證細(xì)胞形態(tài)及成分同活體時(shí)保持基本一致，盡可能維持其活性[6]，而固定劑的選擇通常以酒精或者福爾馬林為主，浸沒(méi)組織后，時(shí)間通常保持在三至二十四小時(shí)，實(shí)際操作時(shí)應(yīng)注意時(shí)間勿太長(zhǎng)，盡快送檢，若標(biāo)本無(wú)法固定或者不能立刻送檢，則應(yīng)適當(dāng)予以冷藏，固定時(shí)相應(yīng)延長(zhǎng)時(shí)間。

本文結(jié)果中，在染色診斷準(zhǔn)確概率方面，觀察組脂肪92.54%、胃腸99.32%、骨88.24%、膽95.74%，相比對(duì)照組數(shù)據(jù)而言，均明顯更高，P值小于0.05。

綜上所述，病理技術(shù)HE染色應(yīng)用于病理診斷中，具有一定臨床價(jià)值，實(shí)際操作時(shí)應(yīng)根據(jù)切片不同病理特點(diǎn)，適當(dāng)調(diào)整染色技術(shù)，盡可能保證診斷準(zhǔn)確可靠性，為疾病治療方案的確定提供保障，值得進(jìn)一步推廣。

（作者單位：常州市婦幼保健院病理科）

[1]鄭菲,陳培瓊,王玉環(huán)等.HE染色在臨床病理診斷中的應(yīng)用研究[J].中外醫(yī)療,2016,35(30):17-18,21.

[2]范小莉,胥維勇,楊群等.HE染色不良的分析與應(yīng)對(duì)方法[J].臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志,2014,30(7):805-807.

[3]鄭樣貞.分析HE染色技術(shù)在病理診斷中的應(yīng)用[J].中國(guó)社區(qū)醫(yī)師,2016,32(17):109-109,111.

[4]王朝暉.病理技術(shù)HE染色在病理診斷中的應(yīng)用效果觀察[J].醫(yī)藥前沿,2016,6(13):37-38.