楊麗紅

哈藥集團(tuán)三精制藥四廠有限公司

試析腦安片含量測(cè)定方法的改進(jìn)

楊麗紅

哈藥集團(tuán)三精制藥四廠有限公司

目的：實(shí)驗(yàn)人員對(duì)暖安片中所含有的人參皂苷Re的含量測(cè)定方式。方法：提取適量的樣品，通過高效液相色譜法來對(duì)人參皂苷Re所具有的含量進(jìn)行測(cè)定，流動(dòng)相主要采取乙睛以及水的形式進(jìn)行梯度洗脫，流速大概保持在1ml/min的范圍內(nèi)，柱溫控制在35℃左右，所檢測(cè)的波長(zhǎng)為203nm。結(jié)果：在腦安片中所含有的人參皂苷Re的范圍在96.96ˉ484.8ng/μl左右，保持良好的線性形勢(shì)，所得到的方程式是Y=3.72651X+0.73355，r=0.99999；所獲得的回收率已經(jīng)達(dá)到99.5%（RSD0.72%），所產(chǎn)生的重復(fù)性RSD在1.28%的范圍。結(jié)論：實(shí)驗(yàn)人員使用該測(cè)量手段有著顯著的效果。

腦安片；人參皂苷Re；含量測(cè)定

腦安片有著諸多的功效，例如起到活血化瘀的作用，并可以達(dá)到益氣通絡(luò)的效果等，對(duì)腦血栓的形式、血瘀病人較為適合。該藥主要有三七、人參等多種名貴藥材構(gòu)成的，腦安片基本標(biāo)準(zhǔn)使用薄層掃描法來對(duì)該藥中所含有的人身皂苷Re的含量進(jìn)行檢測(cè)。由于該測(cè)定方式會(huì)在某種程度上受到不同因素所產(chǎn)生的干擾，其所得到的測(cè)定結(jié)果沒有達(dá)到精準(zhǔn)的目的，而且操作流程具有一定的復(fù)雜性，在實(shí)驗(yàn)中所使用的溶液會(huì)對(duì)環(huán)境帶來影響，與此同時(shí)也在某種程度上損害了實(shí)驗(yàn)人員的身心健康。所以，實(shí)驗(yàn)人員通過使用RP-HPLC來對(duì)人身皂苷Re所具有的含量進(jìn)行檢測(cè)，通過將該方式進(jìn)行改造以后，有著顯著的效果，為控制產(chǎn)品質(zhì)量帶來益處。

1、儀器和試藥

美國(guó) Aislent1200型高效液相色譜儀。Aislent色譜工作站 Rve丑.04.02版。日本島津Uv-2550型紫外分光光度計(jì)。HP一01溶劑過濾器(天津市恒奧科技發(fā)展有限公司)。KQ一 500DE超聲儀(昆山)。AG285電子分析天平(梅特勒-托利多上海有限公司)。人參皂普Re對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所,批號(hào)0754一9810,供含量檢測(cè)用)。腦安片(哈藥集團(tuán)三精制藥四廠,批號(hào):1304001、1304002、1304003)。水為超純水,乙睛為色譜純,其它試劑為分析純。

2、溶液的制備

2.1 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取人參皂普Re對(duì)照品12.12mg置25ml棕色容量瓶中,加甲醇使溶解并稀釋至刻度,搖勻,即得(每 1ml中含人參皂普Re0.4848mg)。

2.2 供試品溶液的制備

取本品20片,研細(xì),精密稱取約3.59,置索氏提取器中,加乙醚適量,回流提取至提取液無(wú)色,棄去乙醚液,藥渣揮去乙醚后,加甲醇適量,回流提取至提取液無(wú)色提取液回收甲醇至干,殘?jiān)盟?40ml,分次轉(zhuǎn)移至分液漏斗中,用水飽和的正丁醇振搖提取五次,(30ml、30ml、20ml、20ml、10ml),合并正丁醇液,用氨試液洗滌三次,每次50ml,棄去氨試液,正丁醇層用正丁醇飽和的水30ml洗滌,棄去水液,取正丁醇液,水浴蒸干,殘?jiān)蛹状际谷芙?并轉(zhuǎn)移至 5ml量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,作為供試品溶液。

3、測(cè)定波長(zhǎng)的選擇

實(shí)驗(yàn)人員依據(jù)溶液的需要，提取適量的溶液做好相應(yīng)的紫外掃描，當(dāng)人身皂苷Re處于23mm的狀態(tài)下會(huì)呈現(xiàn)出較大的吸收峰，所以選擇203nm的作為測(cè)定波長(zhǎng)。

4、色譜條件

色譜柱:Alltima(4.6mmx250mm,5μm)；流動(dòng)相:以乙睛為流動(dòng)相A。以水為流動(dòng)相B,按表1的規(guī)定進(jìn)行梯度洗脫；流速:1ml·min,;檢測(cè)波長(zhǎng):203nm;柱溫:35℃。

表1 梯度洗脫表

5、線性關(guān)系考察

精密稱取人參皂普Re對(duì)照品適量,加甲醇制成每lml含人參皂普Re05mg的溶液,分別取對(duì)照品溶液2川、4川、6川、8川、10川注人液相色譜儀,記錄色譜圖,測(cè)定其峰面積積分值,計(jì)算回歸方程為Y=3.72651X+073355,仁 o,9999。試驗(yàn)結(jié)果表明進(jìn)樣量在 96,6一484.8ngz林l間,與峰面積呈良好的線性關(guān)系。(見表2)

表2 不同濃度的峰面積積分值

6、精密度試驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)人員所適量的溶液10μl，做好連續(xù)進(jìn)樣六次，從而對(duì)峰面積所得到的相關(guān)數(shù)值進(jìn)行測(cè)量，可得到RSD=0.89%。

7、穩(wěn)定實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)人員取出一支相同的飾品溶液，并在每隔 3個(gè)小時(shí)左右的時(shí)候進(jìn)樣一次，一共要反復(fù)進(jìn)行五次，所得到的結(jié)果為 RSD=2.25%的范圍內(nèi)，并且飾品溶液在大概12小時(shí)的時(shí)候還具有良好的穩(wěn)定性能。

8、重復(fù)性試驗(yàn)

依據(jù)樣品中的含量對(duì)相關(guān)批號(hào)的樣品進(jìn)行了詳細(xì)的檢測(cè)，一共測(cè)定的數(shù)目有5份，并且每一份中的含量大概在0.21mg/片，所得到的 RSD=1.28%，從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出實(shí)驗(yàn)人員采取該方式能夠?qū)崿F(xiàn)重現(xiàn)性的目的。

9、回收率試驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)人員取腦安片中所存在人身皂苷Re含量的樣品進(jìn)行認(rèn)真的研細(xì)，并采取精密稱量的方式稱取3.5g的量，一共要準(zhǔn)備5份留作備用。除此之外，實(shí)驗(yàn)人員還需要利用精密的手段稱取5ml的溶液，采取科學(xué)的手段進(jìn)行提取，然后進(jìn)行測(cè)量，并對(duì)該含量中所得到的回收率進(jìn)行計(jì)算，所得到的結(jié)果請(qǐng)看表3。

表3 回收率試驗(yàn)結(jié)果

10、樣品測(cè)定

實(shí)驗(yàn)人員將對(duì)照品以及供試品中的溶液采取精密吸收的方式進(jìn)行了測(cè)量，并規(guī)定使用10μl的含量，并添加液相色譜儀進(jìn)行詳細(xì)的檢測(cè)，并進(jìn)行合理的計(jì)算，對(duì)這 3批樣品做好詳細(xì)的檢測(cè)，所得到的結(jié)果請(qǐng)看表4。

表4 樣品測(cè)定結(jié)果

11、討論

實(shí)驗(yàn)人員通過將高效液相色譜法以及相應(yīng)的薄層色譜法進(jìn)行了對(duì)比，有著諸多的優(yōu)勢(shì)，如較高的靈敏度、操作方式簡(jiǎn)單等，不僅可以在某種程度上控制產(chǎn)品的整體質(zhì)量，而且還能夠進(jìn)一步減少檢驗(yàn)時(shí)間，從而實(shí)現(xiàn)高效率的生產(chǎn)。

總而言之，通過以上內(nèi)容的論述可以得知：實(shí)驗(yàn)人員采取高效液相色譜法有著顯著的效果，并進(jìn)一步將產(chǎn)生的整體生產(chǎn)質(zhì)量加以提升，大大推動(dòng)了我國(guó)醫(yī)藥事業(yè)的進(jìn)步，為我國(guó)的臨床提供了重要的參考依據(jù)。

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1672-5018（2016）12-034-01