李宜學, 郭　劍, 寧艷春, 于婉瑩, 郭婉茹, 劉　恒, 馮玉環(huán)

(河北省唐山市婦幼保健院, 河北 唐山, 063000)

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低評分胚胎在卵裂期及囊胚期移植的結局分析

李宜學, 郭劍, 寧艷春, 于婉瑩, 郭婉茹, 劉恒, 馮玉環(huán)

(河北省唐山市婦幼保健院, 河北 唐山, 063000)

摘要:目的分析低胚胎評分患者行卵裂期(D3)或囊胚期(D5)移植的結局。方法選取接受IVF-ET治療的低評分胚胎患者222例，根據患者意向分為卵裂期移植組(A組)和囊胚培養(yǎng)組(B組)。比較2組臨床妊娠率、繼續(xù)妊娠率及種植率。結果2組的取卵周期臨床妊娠率無顯著差異(P>0.05), 2組移植周期臨床妊娠率、繼續(xù)妊娠率及種植率有顯著差異(P<0.05)。結論繼續(xù)囊胚培養(yǎng)能有效篩選出低評分胚胎中具有發(fā)育潛能的胚胎，降低無效移植。

關鍵詞:體外受精-胚胎移植; 低評分胚胎; 囊胚

體外受精-胚胎移植(IVF-ET)治療中，受精后72 h胚胎應處于6～8細胞期或者早期致密化，發(fā)育過快或過慢均提示胚胎異常，尤其是發(fā)育過慢，往往預示著較低的發(fā)育潛能[1]。由于種種原因，一些患者的胚胎發(fā)育較差，表現(xiàn)為發(fā)育慢或形態(tài)不佳，這些胚胎在移植后的種植率較低。學者[2]認為可將這些胚胎進行囊胚培養(yǎng)，通過延長體外培養(yǎng)時間對胚胎的發(fā)育潛能進行篩選，而對于發(fā)育阻滯的胚胎，及早取消周期，可以避免無效移植。也有學者[3]認為單獨的卵裂期胚胎形態(tài)并不能完全代表其生命力和質量，不能準確預測囊胚的質量。本研究分析低評分胚胎進行卵裂期移植或囊胚培養(yǎng)的結局，現(xiàn)報告如下。

1資料與方法

1.1一般資料

對2012年5月—2014年4月在唐山市婦幼保健院生殖中心接受IVF-ET治療的患者進行分析，入選標準為D3所有卵裂期胚胎均為低評分胚胎(4～5 cell Ⅰ～Ⅱ級或6～12 cell Ⅲ級胚胎，形態(tài)不佳，包括卵裂球大小不均、碎片15%～25%、卵周隙大、有空泡等)。根據患者意愿選擇卵裂期移植或囊胚培養(yǎng)，分為卵裂期移植組(A組,n=124)及囊胚培養(yǎng)組(B組,n=98)。A組行D3

1.2研究方法

1.2.1控制性促排卵：根據患者個體差異選擇采用長方案或短方案進行促排卵，當至少有2個卵泡直徑≥20 mm時，當晚給予人絨毛膜促性腺激素(hCG)5 000～10 000 IU, 36 h后經陰道B超介導取卵。

1.2.2精液準備、受精：取卵日男方手淫取精于一次性無菌杯中，采用梯度離心+上游法處理。IVF患者所得卵母細胞培養(yǎng)2～4 h加精；ICSI患者卵母細胞培養(yǎng)4 h，行ICSI操作。

1.2.3胚胎發(fā)育與評級：使用G5系列培養(yǎng)基(瑞典Vitrolife公司)進行胚胎體外培養(yǎng)。加精后16～18 h(次日晨)觀察原核，評價受精情況。本研究中所有胚胎均來自于正常受精卵(2PN)。D3進行卵裂期胚胎評級，評級根據Veeck胚胎評分標準[3]進行。本研究中所選擇的患者，所有胚胎均為低評分胚胎，發(fā)育受限胚胎(卵裂球數(shù)2～3或碎片>30%)不在本研究中。當胚胎延長培養(yǎng)至D5時，根據Gardner囊胚分級系統(tǒng)[4]對囊胚進行評級。

1.2.4移植與移植后處理：A組于D3進行卵裂期胚胎移植；B組于D5進行囊胚移植，無囊胚形成者取消周期。自取卵日給予黃體酮、達芙通等黃體支持，移植后12～14 d測尿hCG，陽性者為生化妊娠。移植后32～35 d, 超聲檢查見孕囊即為臨床妊娠。

1.3統(tǒng)計學處理

采用SPSS 17.0 軟件包進行統(tǒng)計學分析，計量資料用單向方差分析(One-Way ANOVA)，計數(shù)資料采用卡方檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2結果

2組一般臨床資料比較均無顯著差異，見表1。A組中，124例患者全部接受了胚胎移植，共移植胚胎264枚。臨床妊娠率為22.6%，種植率為16.3%，繼續(xù)妊娠率為18.5%(5例流產)。B組中，對98例患者的401枚胚胎進行了囊胚培養(yǎng)，D5獲得囊胚88枚，囊胚形成率為21.9%，其中優(yōu)質囊胚(Gardner評分≥3 BB)11枚(12.5%)。44例患者(44.9%)未獲得囊胚，取消移植。其余54例患者共移植78枚囊胚，臨床妊娠19例，取卵周期臨床妊娠率為19.4%，移植周期臨床妊娠率為35.2%，種植率為28.2%，繼續(xù)妊娠率為31.4%(2例流產)。見表2。2組取卵周期臨床妊娠率比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，但B組移植周期臨床妊娠率、繼續(xù)妊娠率及種植率顯著高于A組(P<0.05)。

表1　2組患者一般臨床資料比較

表2　2組臨床數(shù)據比較

與B組比較, *P<0.05。

3討論

日常IVF-ET工作中，全胚為低評分并不罕見。目前，最常用的胚胎選擇方法仍然是依靠形態(tài)學評分，卵裂期胚胎評分主要根據胚胎發(fā)育速率、卵裂球形態(tài)與大小、無核碎片量及分布、胞漿均質情況等進行，優(yōu)點是快速、安全、簡便。然而，胚胎的發(fā)育是一個復雜的動態(tài)過程，隨著發(fā)育時程的推進，表現(xiàn)出不同的生理特征，受精卵原核評級、早期卵裂的發(fā)生、胚胎形態(tài)評分及囊胚的形成，都與胚胎的發(fā)育潛力有一定的相關性[4]。

囊胚是卵裂期胚胎之后的一個重要發(fā)育階段，發(fā)育潛能差及染色體異常的胚胎在未發(fā)育至囊胚時即發(fā)育停止，囊胚期胚胎具有更好的發(fā)育潛能。囊胚移植較卵裂期胚胎移植有較大的優(yōu)勢: ① 自然生理狀態(tài)下，早期胚胎在輸卵管中發(fā)育，直到接近囊胚期才進入子宮腔[5]，此時的子宮腔更符合生理性著床，胚胎-子宮內膜同步[6]。② 囊胚培養(yǎng)延長了體外培養(yǎng)時間，對胚胎具有篩選作用。研究[7]表明，只有50%左右的優(yōu)質胚胎能夠發(fā)育至囊胚期，而非優(yōu)質卵裂期胚胎的囊胚形成率更低，僅為20%，大部分染色體異常的胚胎則無法發(fā)育到囊胚期。③ 囊胚移植在取卵后第5～6天，此時子宮收縮活動減弱，更容易接受胚胎，有利于胚胎著床[8-9]。囊胚移植后著床率明顯提高，減少了胚胎的移植數(shù)目，甚至可實行單胚胎移植，從而降低多胎妊娠的風險，提高了IVF的治療效果。

研究[10]表明，胚胎的質量影響囊胚形成率、囊胚質量和種植率。隨著胚胎碎片的增多，囊胚形成率降低，囊胚的細胞數(shù)目，尤其是滋養(yǎng)外胚層數(shù)目減少，質量下降[11]。雖然優(yōu)質胚胎的囊胚形成率相對較高，但隨著囊胚培養(yǎng)及冷凍技術的發(fā)展，新觀點認為形態(tài)評分不能完全預測其發(fā)育潛能[12]，將這部分低評分胚胎經體外延長培養(yǎng)時間，仍有一部分能越過阻滯期發(fā)育成囊胚甚至優(yōu)質囊胚。本研究收集了98個治療周期的401枚低評分胚胎繼續(xù)進行囊胚培養(yǎng), 54個周期有88枚胚胎發(fā)育成囊胚，其中優(yōu)質囊胚11枚。結果顯示，雖然囊胚培養(yǎng)組患者的周期取消率顯著增加(P<0.05), 但取卵周期妊娠率無顯著變化(P>0.05), 移植周期妊娠率顯著提高(P<0.05)。由此可見，胚胎的發(fā)育潛能與其形態(tài)并非完全一致，僅僅依靠單一的形態(tài)學評分來預測胚胎的發(fā)育潛力是不嚴謹?shù)模瑢@些胚胎進行囊胚培養(yǎng)，加以篩選，可以最大限度地提高胚胎利用率，減少患者損失[13-15]。對于發(fā)育阻滯的胚胎，及早取消周期，可以避免無效移植。

參 考 文 獻

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Outcomes of low grade embryos transplanted at cleavage or blastocyst stage

LI Yixue, GUO Jian, NING Yanchun, YU Wanying,GUO Wanru, LIU Heng, FENG Yuhuan

(TangshanMaternalandChildHealthCareHospital,Tangshan,Hebei, 063000)

ABSTRACT:ObjectiveTo analyze the outcomes of low grade embryos transplanted at cleavage stage (D3) or blastocyst stage (D5). MethodsA total of 222 patients with low grade embryos were treated by IVF-ET therapy, and they were divided into cleavage stage transplanting group (group A) and blastocyst stage transplanting group (group B) according to the patients′ intentions. Clinical pregnancy, ongoing pregnancy and implantation rate were compared between the two groups. Results There was no significant difference of clinical pregnancy rate in ocyte retrieval cycle between two groups (P>0.05), but there were significant differences of clinical pregnancy rate, ongoing pregnancy rate and implantation rate in transfer cycle between two groups. ConclusionBlastocyst culture can screen those with development potentials in low grade embryos and reduce invalid transplantation.

KEYWORDS:in vitro fertilization-embryo transfer; low grade embryos; blastocyst

中圖分類號:R 321

文獻標志碼:A

文章編號:1672-2353(2016)07-090-03

DOI:10.7619/jcmp.201607026

收稿日期:2015-12-22

移植；B組行囊胚培養(yǎng)，若D5有囊胚形成，則進行移植，否則取消周期。