李慧思 趙陽

摘 要：頭孢噻肟鈉是一種運(yùn)用范圍廣泛的抗生素，它的抗菌譜廣。在臨床醫(yī)學(xué)中的作用有治療沒出現(xiàn)并發(fā)癥的急性尿路感染，和尚未發(fā)生并發(fā)癥的肺炎鏈球菌。然而在我國的藥典中對(duì)于有關(guān)的物質(zhì)檢測(cè)，并沒有相應(yīng)的記錄。本文借助高效液相色譜法，進(jìn)一步分析和研究頭孢噻肟鈉相關(guān)物質(zhì)。

關(guān)鍵詞：頭孢噻肟鈉；高效液相色譜法；相關(guān)物質(zhì)；分析

人們通常會(huì)使用高效液相色譜法來做醫(yī)學(xué)和其他專業(yè)方面的試驗(yàn)。高效液相色譜法會(huì)把液體當(dāng)做流動(dòng)相，這是一種高壓輸液體系。具體的是將溶液或者混合溶液倒進(jìn)色譜柱中，當(dāng)溶液在柱中實(shí)現(xiàn)分離后，會(huì)自主流到檢測(cè)器皿內(nèi)，進(jìn)行各種檢測(cè)，因此可以展開分析試樣的工作。當(dāng)前，我國對(duì)高效液相色譜法的運(yùn)用在逐漸地變廣，會(huì)涉及到不少領(lǐng)域，比如醫(yī)學(xué)、工學(xué)等等。除此之外，高效液相色譜法還具備一定的優(yōu)勢(shì)。特別是他們的高效、高速、高壓以及非常高的靈敏度，同時(shí)高效液相色譜法運(yùn)用的領(lǐng)域很廣泛。

同時(shí)，高效液相色譜法也存在一定的缺陷，其中最明顯的是“柱外效應(yīng)”，如果與氣相色譜比較，其靈敏度較低。因此，為了更順利的進(jìn)行試驗(yàn)，有關(guān)人員一般都會(huì)同時(shí)利用高效液相色譜法與氣相色譜法，使二者互相補(bǔ)充。本文主要是通過高效液相色譜法來進(jìn)一步分析和研究頭孢噻肟鈉的相關(guān)物質(zhì)。

1 儀器與試驗(yàn)

島津2010高效液相色譜儀。頭孢噻肟峰鑒定用標(biāo)準(zhǔn)品（含雜質(zhì)A、B、C、E、F），由EPCRS提供。頭孢噻肟對(duì)照品，由中國生物制品檢定所提供。甲醇為色譜純，其他試劑均為分析純。

色譜條件與系統(tǒng)適用性：研究者選擇應(yīng)用十八烷基硅烷鍵合硅膠充當(dāng)填充劑，色譜柱則是3.9mm×150mm（5m）。流動(dòng)相A：實(shí)驗(yàn)溶液是磷酸二氫鈉溶液，濃度為7.1g/l，PH要求達(dá)到6.25。流動(dòng)相B：甲醇（見表1）

表1流動(dòng)相B：甲醇。流速1.0ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)235nm；進(jìn)樣量10μL；柱溫30℃。

2 溶液調(diào)配

溶液A：流動(dòng)相A：流動(dòng)相B，B為14：86。

試驗(yàn)溶劑：運(yùn)用精密、準(zhǔn)確的儀器選取40mg的頭孢噻肟鈉，然后投入到規(guī)格為50ml的量瓶?jī)?nèi)，然后再倒入溶液A，使其充分溶解后稀釋到規(guī)定的刻度。

對(duì)比溶劑（a）：運(yùn)用精密、準(zhǔn)確的儀器選取頭孢噻肟鈉約8mg，，作為對(duì)照品，然后將其投入到量瓶?jī)?nèi)，然后再倒入溶液A，使其充分溶解后稀釋到規(guī)定的刻度。

對(duì)比溶劑（b）：運(yùn)用精密、準(zhǔn)確的儀器選取樣品溶劑，1.0ml左右，然后將其投入到規(guī)格為100ml的量瓶?jī)?nèi)，然后再加入固定容量的溶液A，充分溶解后稀釋到規(guī)定的刻度。

對(duì)比溶劑（c）：運(yùn)用精密、準(zhǔn)確的儀器選取樣品試劑，4.0ml左右，然后將1.0ml的硒酸鹽投入到樣品試劑中，待其溫度上升到40℃時(shí)，將溶液加熱，加熱時(shí)間為兩個(gè)小時(shí)。之后在投入PH值為5ml的沖液和1.0ml容量的稀氫氧化鈉溶液。如圖1。

對(duì)比溶劑（d）：運(yùn)用精密、準(zhǔn)確的儀器選取頭孢噻肟鈉，明確是標(biāo)準(zhǔn)品。同時(shí)頭孢噻肟鈉中含有一定量的雜質(zhì)（A、B、C、E、F），選擇運(yùn)用溶液A與頭孢噻肟鈉相互溶解，并需要稀釋成5ml的溶液。如圖2。

圖2

3 方法

本次試驗(yàn)會(huì)將供試品溶劑對(duì)比溶劑（b）、和標(biāo)準(zhǔn)溶液（b）、對(duì)比溶劑（c）、對(duì)照溶液（d），分別投入到色譜柱內(nèi)，然后將各種溶劑的色譜柱圖做好記錄。保留頭孢噻肟峰的時(shí)間為13分鐘左右。運(yùn)用頭孢噻肟峰來研究和鑒別標(biāo)準(zhǔn)品譜圖，同時(shí)還需要通過頭孢噻肟鈉來分析對(duì)比溶劑（d），也需要應(yīng)用頭孢噻肟峰再對(duì)對(duì)照溶液（d）的色相譜圖進(jìn)行研究，來鑒別雜質(zhì)A、B、C、E、F。頭孢噻肟中含有雜質(zhì)各有差異，雜質(zhì)峰的保留時(shí)間也會(huì)有所不同。與頭孢噻肟相比，各種雜質(zhì)峰的保留時(shí)間需要具有一定的順序規(guī)律。雜質(zhì)B保留的時(shí)間應(yīng)該為0.3min；雜質(zhì)A保留的時(shí)間應(yīng)該為0.5min；雜質(zhì)E保留的時(shí)間應(yīng)該為0.6min；雜質(zhì)C保留的時(shí)間應(yīng)該為1.9min；雜質(zhì)D保留的時(shí)間應(yīng)該為2.3min；雜質(zhì)F保留的時(shí)間應(yīng)該為2.4min；雜質(zhì)G保留的時(shí)間應(yīng)該為3.1min。

評(píng)價(jià)系統(tǒng)的適用性：本次試驗(yàn)會(huì)選取對(duì)比試劑（c），將它投入到液相色譜儀器內(nèi)，然后記錄下呈現(xiàn)的色譜圖。頭孢噻肟與雜質(zhì)E峰之間的分離度大于3.5；頭孢噻肟峰的對(duì)稱因子不應(yīng)該超過2.0。

4 結(jié)果與討論

4.1 對(duì)于所含雜質(zhì)數(shù)量的運(yùn)算規(guī)則：在運(yùn)算所含雜質(zhì)數(shù)量的過程中，峰面積與對(duì)比溶劑（b）的主峰相比時(shí)，峰面積小于對(duì)比試劑（b）的主峰。而且，峰面積是對(duì)比試劑（b）的0.05倍。在這種情況下，統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)的過程中完全可以忽略不計(jì)。

4.2 對(duì)于所含雜質(zhì)的確定。本次試驗(yàn)按照檢測(cè)的色譜圖對(duì)測(cè)量出的雜質(zhì)進(jìn)行分析。不僅需要定性的分析，還需要定量的分析。已經(jīng)測(cè)量出來的雜質(zhì)包括A、B、C、D、E、F，它們都不能高于對(duì)比試劑（b）主峰面積的1%。而任何一種雜質(zhì)，都不能高出對(duì)照溶液（b）主峰面積0.2%；所有雜質(zhì)的總和不能高出對(duì)照溶液（B）主峰面積的3%。

4.3 試驗(yàn)過程中，若分離度未能滿足試驗(yàn)要求，研究者可以適當(dāng)?shù)膶?duì)流動(dòng)相A的PH值進(jìn)行調(diào)整，調(diào)整幅度大約在PH6.25±0.1，以此滿足色譜系統(tǒng)適用性條件。

4.4 色譜柱的溫度能夠改變雜質(zhì)峰具體的保留時(shí)間，檢驗(yàn)期間，溫度達(dá)到30℃時(shí)，主峰能夠保留13.2min，待到溫度為25℃、40℃時(shí)，所得到的結(jié)果有一定的差異。該法容易受到溫度的影響，因此檢驗(yàn)期間，必須對(duì)溫度進(jìn)行良好控制。

4.5 頭孢噻肟鈉是第三代頭抱類抗生素，具有殺菌作用強(qiáng)，抗菌譜廣，耐酶，高效，低毒，價(jià)廉等優(yōu)點(diǎn)，現(xiàn)已廣泛用于一些嚴(yán)重和危重感染，如敗血癥、腦膜炎，重癥肺炎等癮臨床應(yīng)用發(fā)現(xiàn)，頭孢噻肟鈉發(fā)生變態(tài)反應(yīng)性休克搶救成功與否，與皮試、變態(tài)反應(yīng)性休克判斷、搶救藥物應(yīng)用順序有關(guān)。頭孢噻肟鈉引起的變態(tài)反應(yīng)性休克報(bào)道在逐年增多，醫(yī)生認(rèn)為使用前應(yīng)當(dāng)皮試，既使皮試陰性者，使用過程中，尤其是使用后Smin應(yīng)當(dāng)密切注意患者用藥反應(yīng)，一旦發(fā)生頭抱曝腸鈉變態(tài)反應(yīng)性休克前兆，應(yīng)當(dāng)首選0.1%腎上腺素lml肌注，同時(shí)吸氧，然后靜推氫化可的松等，隨后再進(jìn)行一系列對(duì)癥處理搶救措施若此時(shí)誤診為輸液反應(yīng)，首先應(yīng)用地塞米松靜推則有可能貽誤搶救時(shí)機(jī)，造成患者發(fā)生變態(tài)反應(yīng)性休克導(dǎo)致死亡。

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