張金彪，胡海濤，劉玉欣，劉剛，張玉枝(滄州中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院，河北滄州0600；滄州市人民醫(yī)院)

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改良NAP活性檢測在慢性阻塞性肺疾病急性加重期診治中的應(yīng)用價(jià)值

張金彪1，胡海濤1，劉玉欣1，劉剛1，張玉枝2(1滄州中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院，河北滄州061001；2滄州市人民醫(yī)院)

摘要：目的探討改良中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶(NAP)活性檢測在慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)合并細(xì)菌感染診斷、治療及預(yù)后評估中的應(yīng)用價(jià)值。方法以AECOPD患者121例作為觀察組，其中細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果陽性50例、陰性71例，細(xì)菌培養(yǎng)陽性者給予常規(guī)抗炎治療兩周；另選慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者100例作為對照組。比較兩組血清降鈣素原(PCT)、NAP陽性率及NAP積分。結(jié)果觀察組入院時(shí)NAP陽性率、NAP積分均高于對照組(P均<0.05)。觀察組入院時(shí)細(xì)菌培養(yǎng)陽性患者NAP陽性率、NAP積分及血清PCT水平均高于陰性者(P均<0.05)；細(xì)菌培養(yǎng)陽性患者給予常規(guī)抗炎治療期間死亡11例，完成抗炎治療兩周的患者治療后NAP陽性率、NAP積分及血清PCT水平均低于治療前(P均<0.05)。死亡者入院時(shí)NAP積分高于存活者(P<0.05)。結(jié)論AECOPD患者NAP活性增高，檢測NAP活性有助于判斷細(xì)菌感染及感染程度，并可用于評估預(yù)后。

關(guān)鍵詞：慢性阻塞性肺疾??；慢性阻塞性肺疾病急性加重期；中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶；降鈣素原

慢性阻塞性肺疾病(COPD)是一種以持續(xù)性氣流受限為主要特征的慢性氣道炎癥性疾病，臨床多見，老年人患病率高，但發(fā)病有年輕化趨勢。慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)是COPD患者入院治療及死亡的主要原因。AECOPD患者多為高齡，易合并細(xì)菌感染，增加臨床診斷及治療難度[1]。中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶(NAP)主要存在于成熟的中性粒細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)，可以通過偶氮偶聯(lián)染色法檢測NAP活性；當(dāng)細(xì)菌感染時(shí)其活性明顯增加，在感染性疾病的診斷及預(yù)后判斷方面有一定的價(jià)值。但由于染色步驟繁瑣，耗時(shí)長，NAP檢測在感染性疾病中的應(yīng)用較少。本研究探討改良NAP活性檢測在AECOPD 合并細(xì)菌感染的診斷、治療及預(yù)后評估中的應(yīng)用價(jià)值。

1資料與方法

1.1臨床資料選擇2014年1～12月在滄州中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院ICU內(nèi)住院治療的AECOPD患者121例作為觀察組，均符合《慢性阻塞性肺疾病診治指南》[2]診斷標(biāo)準(zhǔn)。其中男77例、女44例，年齡38～88(67.5±4.0)歲；有吸煙史61例，納入研究前均已停止吸煙≥6個(gè)月。本研究通過本院倫理委員會批準(zhǔn)，患者均簽訂知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①病程>5天；②胸部平片(X線)提示肺炎；③納入本研究前1個(gè)月內(nèi)使用抗生素類藥物；④合并其他部位感染、其他慢性呼吸道疾病、需要機(jī)械通氣支持的肺性腦病、腫瘤、免疫缺陷及器官功能不全。另選COPD患者100例作為對照組，男60例、女40例，年齡33～81(66.5±6.5)歲，均無吸煙史。兩組性別、年齡具有可比性。

1.2細(xì)菌培養(yǎng)入院后采集痰標(biāo)本，嚴(yán)格按照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》進(jìn)行常規(guī)痰細(xì)菌培養(yǎng)，采用西門子MicroScan Walkaway 96plus全自動細(xì)菌鑒定藥敏分析儀進(jìn)行細(xì)菌鑒定及藥物敏感試驗(yàn)。痰培養(yǎng)連續(xù)≥2次為同一細(xì)菌，定義為細(xì)菌感染陽性。細(xì)菌感染陽性50例、陰性71例。細(xì)菌培養(yǎng)陽性患者給予常規(guī)抗炎(注射用頭孢曲松，2 g/24 h)治療兩周。

1.3相關(guān)指標(biāo)觀察①血清PCT：采集靜脈血，采用酶聯(lián)免疫熒光法檢測血清PCT，操作步驟嚴(yán)格參照試劑盒說明書(深圳市新產(chǎn)業(yè)生物醫(yī)學(xué)工程股份有限公司)。血清PCT>0.5 mg/L為陽性。② NAP陽性率及NAP積分：采集指尖血，涂片，采用NAP偶氮偶聯(lián)快速改良方法進(jìn)行NAP染色，計(jì)算NAP陽性率及積分[3]。NAP陽性率正常參考范圍為60%～78%，積分正常參考范圍為150～190。

2結(jié)果

觀察組入院時(shí)NAP陽性率、NAP積分均高于對照組(P均<0.05)，見表1。觀察組入院時(shí)細(xì)菌培養(yǎng)陽性患者NAP陽性率、NAP積分及血清PCT水平均高于陰性者(P均<0.05)；細(xì)菌感染陽性患者給予常規(guī)抗炎治療期間死亡11例(病情發(fā)展快速，救治無效，抗炎1周后死亡)，完成兩周抗炎治療的細(xì)菌培養(yǎng)陽性患者NAP陽性率、NAP積分及血清PCT水平均低于治療前(P均<0.05)；見表2。死亡者入院時(shí)NAP積分高于存活者(P<0.05)，NAP陽性率及血清PCT水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)，見表3。

表1　　　　兩組NAP陽性率、NAP積分及血清

注：與對照組比較，*P<0.05。

表2　　　　細(xì)菌感染陽性、陰性患者NAP陽性率、NAP積分

注：與細(xì)菌感染陰性者比較，*P<0.05；與治療前比較，△P<0.05。

表3　　　　死亡與存活患者NAP陽性率、NAP積分

注：與存活患者比較，*P<0.05。

3討論

AECOPD患者多為老年人，機(jī)體免疫功能及反應(yīng)能力均下降，易受細(xì)菌入侵，引發(fā)感染，加重病情，增加病死率。有研究報(bào)道，80%的AECOPD由感染引起，其中70%為細(xì)菌感染[4]。判斷細(xì)菌感染的指標(biāo)較多，目前臨床主要應(yīng)用的是血常規(guī)、CRP、PCT等。其中PCT對診斷細(xì)菌感染具有特異性強(qiáng)、靈敏度高的特點(diǎn)，目前已廣泛應(yīng)用于臨床細(xì)菌感染性疾病診斷及療效判斷[5～9]。研究發(fā)現(xiàn)，AECOPD患者細(xì)菌感染程度與血清PCT水平呈正相關(guān)[10]，可用于AECOPD等感染性疾病的診斷及病情判斷[11～14]，但關(guān)于PCT對疾病預(yù)后判斷方面的報(bào)道較少。

通過偶氮偶聯(lián)染色法染色，NAP陽性物質(zhì)呈濃藍(lán)色、顆粒狀。但是，常規(guī)NAP染色步驟復(fù)雜，限制其臨床應(yīng)用。本研究采用的NAP染色技術(shù)為NAP快速改良方法[15]，是對傳統(tǒng)染色步驟進(jìn)行一系列改良，具有省時(shí)、方便、效果好的優(yōu)點(diǎn)。NAP染色可以鑒別診斷細(xì)菌或病毒感染，細(xì)菌感染時(shí)NAP活性增高，且染色強(qiáng)度與細(xì)菌感染程度呈正相關(guān)；病毒感染時(shí)NAP活性減低[16]。NAP陽性率及NAP積分是反映NAP活性的兩項(xiàng)指標(biāo)，當(dāng)機(jī)體被細(xì)菌感染時(shí)，NAP陽性率及積分均升高，且后者對細(xì)菌感染診斷及病情評估更有意義[17]。

本研究結(jié)果顯示，觀察組入院時(shí)NAP陽性率、NAP積分均明顯高于對照組；血清PCT水平亦高于對照組，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；說明NAP活性反映AECOPD患者細(xì)菌感染的敏感性強(qiáng)于PCT。細(xì)菌感染陽性的AECOPD患者NAP陽性率、NAP積分及血清PCT水平均明顯高于細(xì)菌感染陰性者；經(jīng)兩周抗炎治療后，NAP陽性率和NAP積分雖有明顯下降，但仍高于正常值范圍，而PCT水平幾乎下降到正常范圍；說明NAP、PCT均能反映細(xì)菌感染病情變化，但病情好轉(zhuǎn)后NAP恢復(fù)較PCT慢，機(jī)制可能與NAP細(xì)胞質(zhì)內(nèi)顆粒酶的變性一直保持高水平有關(guān)[18]。

細(xì)菌感染陽性的AECOPD患者常規(guī)抗炎治療期間死亡11例，死亡患者入院時(shí)NAP陽性率、NAP積分及血清PCT水平均高于存活患者，但僅NAP積分比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；說明NAP積分在判斷預(yù)后方面具有重要參考價(jià)值。NAP積分越高，提示患者細(xì)菌感染程度越重或既往感染次數(shù)越多，因?yàn)榧?xì)菌感染會導(dǎo)致中性粒細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)顆粒酶蛋白變性，變性的酶蛋白可通過染色方法檢測出來。當(dāng)細(xì)菌感染越嚴(yán)重或感染次數(shù)越多，酶蛋白變性越嚴(yán)重，NAP活性越強(qiáng)，患者預(yù)后不良。

總之，AECOPD患者NAP活性增高，檢測NAP活性有助于判斷其是否合并細(xì)菌感染及感染程度，并可用于評估預(yù)后。

參考文獻(xiàn)：

[1] 吳長剛.法舒地爾治療慢性阻塞性肺疾病急性加重期41例療效觀察[J].山東醫(yī)藥,2015,55(29):88-89.

[2] 中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)分會慢性阻塞性肺疾病學(xué)組.慢性阻塞性肺疾病診治指南(2013年修訂版)[J].中華結(jié)核和呼吸雜志,2013,36(4):255-264.

[3] 張金彪,張玉枝,胡海濤,等.重氮鹽及磷酸萘酚鹽濃度對NAP染色結(jié)果的影響[J].中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志,2014,24(21):3105-3107.

[4] Sethi S, Murphy TF. Infection in the pathogenesis and course of chronic obstructive pulmonary disease[J]. N Engl J Med, 2008,359(22):2355-2365.

[5] 陳勇,何文杰,陳立華.降鈣素原與C反應(yīng)蛋白在細(xì)菌感染診斷中的應(yīng)用[J].中國醫(yī)師雜志,2013,15(11):1511-1514.

[6] 羅淑娟,饒花平,金世杰,等.降鈣素原在兒童肺炎中的變化及意義[J].中國醫(yī)師雜志,2013,15(8):1118-1120.

[7] 王銳英,劉虎,成孟瑜,等.血清降鈣素原在慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者細(xì)菌感染診斷中的意義[J].中國醫(yī)藥,2015,10(4):472-474.

[8] 瞿嶸,羅裕鋒,梁小仲,等.降鈣素原監(jiān)測在重癥胰腺炎患者抗生素治療中的知道價(jià)值[J].中國醫(yī)藥,2014,9(10):1498-1500.

[9] 王研,劉寧,唐健,等.血清降鈣素原對呼吸機(jī)相關(guān)性肺炎的診斷價(jià)值[J].山東醫(yī)藥,2015,55(20):42-43.

[10] 顧宇彤.診斷慢性阻塞性肺疾病急性加重期的生物標(biāo)志物[J].中華結(jié)核和呼吸雜志,2014,37(4):247-249.

[11] 張春美,李秀.老年慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者外周血PCT、WBC、N%水平變化及意義[J].山東醫(yī)藥,2013,53(24):29-31.

[12] 劉建成,和明麗,丁奇龍.血清降鈣素原檢測對慢性阻塞性肺疾病急性加重期治療的指導(dǎo)意義[J].中國醫(yī)藥指南,2011,9(23):21-23.

[13] 傅華梅,黃龍麗,吳茅.超敏C反應(yīng)蛋白與中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶相關(guān)性分析[J].中國基層醫(yī)藥,2012,19(5):701-702.

[14] 謝國強(qiáng),李森華,陳鏗鏗,等.苯接觸工人白細(xì)胞中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶活性的研究[J].國際醫(yī)藥衛(wèi)生導(dǎo)報(bào),2014,20(4):445-447.

[15] 朱立新,牛莉莉,趙莉.血清C反應(yīng)蛋白和白細(xì)胞計(jì)數(shù)及中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶積分在細(xì)菌感染診斷中的意義[J].實(shí)用醫(yī)技雜志,2015,22(5):524-525.

[16] 李福德，曹元，周赫男，等.骨髓涂片中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶染色法的改進(jìn)[J].臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志，2012,28(6)：705-706.

[17] 秦衛(wèi)華,李金秀,李亞霖,等.中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶陽性積分在革蘭陽性球菌感染檢測中的應(yīng)用價(jià)值[J].中華實(shí)驗(yàn)和臨床感染病雜志(電子版),2014,8(6)793-795.

[18] 章希文,高琳,張玲,等.降鈣素原、C反應(yīng)蛋白、中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶聯(lián)合檢測在新生兒肺炎早期的診斷價(jià)值[J].中國鄉(xiāng)村醫(yī)藥,2014,21(9):56-57.

(收稿日期：2015-08-05)

中圖分類號：R563

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B

文章編號：1002-266X(2016)12-0065-03

doi:10.3969/j.issn.1002-266X.2016.12.023

基金項(xiàng)目：河北省滄州市科技局計(jì)劃項(xiàng)目(141302064)。