靳龍杰，鄭榮秀，劉戈力，楊箐巖

(天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院，天津 300052)

自身免疫性甲狀腺疾病患兒血清IL-17及維生素D水平變化及意義

靳龍杰，鄭榮秀，劉戈力，楊箐巖

(天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院，天津 300052)

目的 探討IL-17及維生素D在自身免疫性甲狀腺疾病發(fā)生、發(fā)展中的作用。方法 選擇78例自身免疫性甲狀腺疾病患兒，其中Grave′s病46例(Grave′s病組)、橋本甲狀腺炎32(甲狀腺炎組)，檢測兩組血清IL-17、25(OH)D水平及甲狀腺過氧化物酶抗體(TPOAb)、甲狀腺球蛋白抗體(TGAb)、促甲狀腺素受體抗體(TRAb)，并與40例健康兒童(對照組)進行比較。分析自身免疫性甲狀腺疾病患兒血清IL-17、25(OH)D水平與自身抗體的相關(guān)性。結(jié)果 Grave′s病組和甲狀腺炎組血清25(0H)D水平比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)，但均低于對照組(P均<0.05)。Grave′s病組和甲狀腺炎組血清IL-17水平比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)，但均高于對照組(P均<0.05)。Grave′s病組血清25(OH)D水平與TGAb、TRAb水平呈負相關(guān)(r分別為-0.37和-0.44，P均<0.05)，與TPOAb無相關(guān)性(r=-0.23，P>0.05)；血清IL-17水平與TPOAb、TRAb水平呈正相關(guān)(r分別為0.41和0.56，P均<0.05)，與TGAb無相關(guān)性(r=0.28，P>0.05)。甲狀腺炎組血清25(OH)D水平與TPOAb、TRAb水平呈負相關(guān)(r分別為-0.55、-0.37，P均<0.05)，與TGAb無相關(guān)性(r=0.26，P>0.05)；血清IL-17水平與TPOAb、TGAb、TRAb水平均呈正相關(guān)(r分別為0.59、0.42和0.28，P均<0.05)。Grave′s病組和甲狀腺炎組血清25(OH)D與IL-17水平均呈負相關(guān)(r分別為-0.47和-0.53，P均<0.05)。結(jié)論 IL-17和25(OH)D可能共同參與了自身免疫性甲狀腺病的發(fā)生、發(fā)展過程，二者存在負相關(guān)關(guān)系。

Graves′ ??；橋本甲狀腺炎；維生素D；白介素17

自身免疫性甲狀腺疾病(AITD)為器官特異性自身免疫性疾病，主要包括橋本甲狀腺炎和Grave′s病。既往對AITD的免疫學(xué)研究主要集中于Th1和Th2兩類淋巴細胞。近年研究發(fā)現(xiàn)一類不同于Th1、Th2細胞的CD4+T 細胞，命名為Th17細胞。這類細胞具有獨立的分化和發(fā)育調(diào)節(jié)機制，主要分泌IL-17等相關(guān)細胞因子， 參與多種自身免疫性疾

病的發(fā)生過程，可影響自身免疫性抗體產(chǎn)生[1]。維生素D為一種類固醇衍生物，除參與鈣磷代謝調(diào)節(jié)之外，亦具有一定的免疫調(diào)節(jié)作用。近年研究證實，維生素D缺乏與多種自身免疫性疾病有關(guān)[2,3]。本研究探討IL-17、25(OH)D在AITD發(fā)生、發(fā)展中的作用。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2014年9月～2015年9月在天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院兒科內(nèi)分泌門診首診的AITD患兒78例，男19例、女59例，年齡7～14(10.92±2.28)歲； 其中橋本甲狀腺炎32例 (甲狀腺炎組)，Grave′s病46例(Grave′s病組)，兩組均初次診斷為AITD且未經(jīng)治療。排除有其他自身免疫性疾病或其他甲狀腺疾病、感染、嚴重肝腎功能不全等。Grave′s病診斷標準：①臨床存在甲亢癥狀和體征；②甲狀腺彌漫性腫大(觸診和B超證實)，少數(shù)患兒可無甲狀腺腫大；③血清TSH降低，甲狀腺激素升高；④眼球突出和其他浸潤性眼征；⑤脛前黏液性水腫；⑥甲狀腺TSH受體抗體[促甲狀腺素多體抗體(TRAb)或TSAb]陽性。以上標準中①、②、③為診斷必備條件，④、⑤、⑥為診斷輔助條件。橋本甲狀腺炎診斷標準：①彌漫性甲狀腺腫大；②血清甲狀腺過氧化物酶抗體(TPOAb)和甲狀腺球蛋白抗體(TGAb)顯著增高。另選取40例查體健康的兒童作為對照組，其中男14例、女26例，年齡(11.21±2.17)歲。三組性別比例、年齡具有可比性。

1.2 相關(guān)指標觀察 各組均取清晨空腹肘靜脈血5 mL，其中2 mL用于檢測TRAb、TPOAb、TGAb；3 mL分離血清置于-80 ℃冰箱保存，行IL-17、25(OH)D測定。TGAb、TPOAb的測定采用電化學(xué)發(fā)光法，使用SIEMES公司的ASVIA CENTAUR化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及配套試劑盒進行檢測。TRAb的測定采用酶聯(lián)免疫吸附法，使用深圳雷社生命科學(xué)股份有限公司R-6000酶標分析儀，TRAb試劑盒購自德國Medipan公司。血清IL-17、25(OH)D測定采用ELISA法，均按試劑盒說明書操作。IL-17 ELISA試劑盒購自美國R&D公司，25(OH)D ELISA試劑盒購自武漢伊萊瑞特生物科技有限公司。對IL-17與25(OH)D及兩者與TRAb、TPOAb、TGAb的關(guān)系進行分析。

2 結(jié)果

2.1 各組血清細胞因子及自身抗體比較 見表1。

表1 各組血清細胞因子及自身抗體比較

注：與對照組比較，*P<0.05。

2.2 相關(guān)性分析 對照組血清25(OH)D、IL-17水平與自身抗體均無相關(guān)性(P均>0.05)。Grave′s病組血清25(OH)D水平與TGAb、TRAb水平呈負相關(guān)(r分別為-0.37、-0.44，P均<0.05)，與TPOAb無相關(guān)性(r=-0.23，P>0.05)；血清IL-17水平與TPOAb、TRAb水平呈正相關(guān)(r分別為0.41、0.56，P均<0.05)，與TGAb無相關(guān)性(r=0.28，P>0.05)。甲狀腺炎組血清25(OH)D水平與TPOAb、TRAb水平呈負相關(guān)(r分別為-0.55、-0.37，P均<0.05)，與TGAb無相關(guān)性(r=0.26，P>0.05)；血清IL-17水平與TPOAb、TGAb、TRAb水平均呈正相關(guān)(r分別為0.59、0.42、0.28，P均<0.05)。

3 討論

維生素D屬于類固醇類激素超家族，為人體營養(yǎng)及代謝所必須。有學(xué)者認為，自身免疫性疾病的發(fā)生可能與體內(nèi)維生素D水平缺乏存在一定關(guān)系。研究發(fā)現(xiàn)，維生素D受體(VDR)及維生素D合成酶25-(OH)D3-1羥化酶(CYP27B1)在體內(nèi)的表達十分廣泛，除小腸、腎和骨細胞外，參與固有免疫及獲得性免疫的大部分免疫細胞，如單核細胞、巨噬細胞、樹突狀細胞、T淋巴細胞和B淋巴細胞等均可表達CYP27B1和VDR[2,4]。提示維生素D可作為一種免疫因子發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用。已有多項研究發(fā)現(xiàn)，AITD患者常伴有血清低維生素D水平[5]，且低維生素D水平與甲狀腺自身抗體增高有關(guān)[6]，本研究結(jié)果與文獻報道相近，提示維生素D缺乏可能在AITD發(fā)生、發(fā)展過程中起重要作用。

Th17細胞是T細胞分化成熟后形成的一類T細胞亞群，可參與機體器官特異性自身免疫病的發(fā)生、發(fā)展。IL-17作為Th17細胞分泌的主要炎性細胞因子，可與IL-6、TNF-α、IFN-γ等細胞因子發(fā)揮協(xié)同效應(yīng)，放大靶器官免疫反應(yīng)并增強炎癥性破壞作用[7]。目前已在多種自身免疫性疾病的患者血清或組織標本中發(fā)現(xiàn)高水平的IL-17，如類風濕性關(guān)節(jié)炎、自身免疫性腦脊髓炎、多發(fā)性硬化癥等[8～10]；與自身免疫性疾病動物模型實驗結(jié)果一致[8,11,12]。有研究發(fā)現(xiàn)，AITD患者外周血Th17細胞比例較高且IL-17水平升高[13]。Horie等[14]發(fā)現(xiàn)，在不同遺傳背景IL-17+/+和IL-17-/-下NOD-H2(h4)的大鼠模型中，只有IL-17+/+這發(fā)生了Grave′s病，提示IL-17在Grave′s病發(fā)病機制中起一定的作用。Borgogni等[15]研究發(fā)現(xiàn)，采用維生素D受體激動劑(艾洛骨化醇)抑制IL-17可起到緩解Grave′s病的作用，進一步證實IL-17參與了Grave′s病的發(fā)病。本研究甲狀腺炎組和Grave′s病組血清IL-17水平均明顯高于對照組，且IL-17 水平與TPOAb、TGAb水平均呈負相關(guān)，推測IL-17與AITD免疫活動有關(guān)。

目前，有證據(jù)顯示維生素D與IL-17可能存在相互作用。人體內(nèi)有一類T細胞亞群稱為天然調(diào)節(jié)T細胞(nTreg)，可通過分泌IL-10抑制Th1細胞的發(fā)展并抑制效應(yīng)T細胞分泌IL-17，而25(OH)D可增加nTreg的數(shù)量[7]。25(OH)D也可直接調(diào)節(jié)Th17細胞的分化，抑制IL-17等細胞因子表達[16]。有研究發(fā)現(xiàn)，在維生素D缺乏的體外環(huán)境下,大鼠CD4+T細胞高表達Th17型細胞因子(IL-17等)，25(0H) D處理后可抑制CD4+T細胞分化為Th17[17]。對類風濕性關(guān)節(jié)炎等多項免疫性疾病的研究結(jié)果顯示[18,19]，患者血清25(OH)D與IL-17呈負相關(guān)，與Treg細胞呈正相關(guān)。本研究結(jié)果顯示，AITD患兒血清25(OH)D水平與IL-17水平呈負相關(guān)。因此推測，維生素D可下調(diào)AITD患者體內(nèi)IL-17的表達。

綜上所述，AITD患兒體內(nèi)存在低25(OH)D水平與較高的IL-17水平，二者呈負相關(guān)關(guān)系，二者可能共同參與了AITD的發(fā)病過程。

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鄭榮秀(E-mail: 18622815720@163.com)

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B

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2015-09-07)