胡向國,余廣超,劉菊珍,江忠晶

(暨南大學(xué)附屬第一醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心,廣東廣州 510630)

·臨床研究·

206株鮑曼不動(dòng)桿菌的耐藥分析

胡向國,余廣超,劉菊珍,江忠晶

(暨南大學(xué)附屬第一醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心,廣東廣州 510630)

目的 調(diào)查2010～2012年廣州華僑醫(yī)院206株鮑曼不動(dòng)桿菌的耐藥狀況，為臨床合理使用抗菌藥物和醫(yī)院感染控制提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。方法 利用WHONET5.6軟件對廣州華僑醫(yī)院2010～2012年206株院內(nèi)鮑曼不動(dòng)桿菌的臨床資料和藥敏結(jié)果進(jìn)行分析。結(jié)果 鮑曼不動(dòng)桿菌主要分離自呼吸道標(biāo)本(180株，占87.40%)；科室分布則主要集中在ICU病房(65株，占31.60%)，鮑曼不動(dòng)桿菌耐藥現(xiàn)象嚴(yán)重，其中對環(huán)丙沙星的耐藥率為75.00%，對慶大霉素的耐藥率為72.90%，對左旋氧氟沙星的耐藥率為66.90%，對頭孢他啶的耐藥率為67.20%，對亞胺培南和美羅培南的耐藥率也較高，分別是47.80%和52.80%；206株鮑曼不動(dòng)桿菌中多重耐藥菌株137株，占66.50%。結(jié)論 鮑曼不動(dòng)桿菌對常用抗菌藥物耐藥率較高，并有逐年增加趨勢。

鮑曼不動(dòng)桿菌; 耐藥

鮑曼不動(dòng)桿菌屬于非發(fā)酵菌科的不動(dòng)桿菌屬，在自然界和醫(yī)院環(huán)境中分布廣泛，對溫度和酸堿度有很好的耐受性，可以在干燥和潮濕的表面存活很長時(shí)間，鮑曼不動(dòng)桿菌為條件致病菌，是唯一能在人類皮膚表面生存的革蘭陰性桿菌。是醫(yī)院感染的主要病原菌之一，可引起多種醫(yī)院感染。本文對本院2010～2012年206株鮑曼不動(dòng)桿菌的臨床資料和藥敏試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，旨在為本院的臨床合理使用抗菌藥物提供指導(dǎo)和建議。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本來源 206株鮑曼不動(dòng)桿菌均分離自暨南大學(xué)附屬第一醫(yī)院2010～2012年各臨床科室送檢的呼吸道分泌物、血液、傷口分泌物、導(dǎo)管尖等標(biāo)本。其中，年齡大于60歲者131例，其余各年齡段75例。

1.2 菌株的分離和鑒定 細(xì)菌分離培養(yǎng)按《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》進(jìn)行，分離后的標(biāo)本用接種環(huán)按常規(guī)接種于直徑為9 cm的血瓊脂平板(江門市凱林貿(mào)易有限公司生產(chǎn))，按要求置于37 ℃恒溫培養(yǎng)箱(上海市躍進(jìn)醫(yī)療器械廠)孵育18～24 h后，挑取數(shù)個(gè)典型菌落，用無菌生理鹽水根據(jù)比濁儀調(diào)配成0.5麥?zhǔn)蠁挝粯?biāo)準(zhǔn)(相當(dāng)于1.5×108CFU/mL)的細(xì)菌懸液，利用梅里埃診斷產(chǎn)品(上海)有限公司的革蘭陰性菌細(xì)菌鑒定條，通過自動(dòng)化細(xì)菌鑒定儀VITEK 2-compact系統(tǒng)進(jìn)行鑒定。陰溝腸桿菌(ATCC700323)為細(xì)菌鑒定質(zhì)控菌株。

1.3 藥敏試驗(yàn) 細(xì)菌懸液制備后15 min內(nèi)用無菌棉簽接種于MH瓊脂平板，采用Kirby-Bauer紙片瓊脂擴(kuò)散法測定菌株對頭孢他啶(CAZ)、美羅培南(MEM)、環(huán)丙沙星(CIP)、左旋氧氟沙星(LEV)、慶大霉素(CN)、亞胺培南(IMP)、阿米卡星(AK)、多西壞素(DO)、頭孢吡肟(FEP)、頭孢哌酮/舒巴坦(SCF)這10種抗菌藥物的敏感性，使用美國OXOID公司的藥敏紙片。將藥敏紙片用無菌鑷子貼在平板表面，每個(gè)平板貼5張紙片，每張紙片間距不少于15 mm，紙片中心距平皿邊緣不少于10 mm，并用無菌鑷子輕壓，使紙片與瓊脂表面完全接觸。將瓊脂平板倒置放入35 ℃恒溫培養(yǎng)箱孵育18～24 h后讀取結(jié)果，抑菌環(huán)的直徑以毫米數(shù)報(bào)告(取整數(shù))，藥敏結(jié)果按CLSI2012(M10O-516)文件規(guī)定的抑菌環(huán)直徑的解釋標(biāo)準(zhǔn)，來分別判定耐藥(R)、中介(I)和敏感(S)。銅綠假單胞菌(ATCC27853)、大腸埃希菌(ATCC25922)作為藥敏試驗(yàn)質(zhì)控菌株。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用WHONET5.6統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié) 果

2.1 標(biāo)本類型分布 標(biāo)本主要來源于呼吸道分泌物痰液，占87.40%，血液占第二位，為3.40%，其他依次為傷口分泌物、導(dǎo)管尖等，見表1。

表1 206株鮑曼不動(dòng)桿菌標(biāo)本來源的分布

2.2 菌株的科室分布 206株鮑曼不動(dòng)桿菌在各病房的分布以ICU居多，共65株，占31.60%，其次為呼吸科病房，36株，占17.50%。該菌在不同病房分布情況見表2。

2.3 每種抗菌藥物總的耐藥率 206株鮑曼不動(dòng)桿菌對每種抗菌藥物的耐藥率，以頭孢哌酮/舒巴坦最低，為32.80%，最高的為慶大霉素，為72.70%，見表3。

表2 206株鮑曼不動(dòng)桿菌的科室分布

表3 206株鮑曼不動(dòng)桿菌對10種抗菌藥物的

2.4 10種抗菌藥物3年來的耐藥率的變遷 3年來10種抗菌藥物耐藥率均呈遞增趨勢，見圖1。

圖1 10種抗菌藥物3年來的耐藥率的變遷

2.5 3年來多重耐藥菌株的檢出情況 本研究206株鮑曼不動(dòng)桿菌中多重耐藥(同時(shí)耐3種以上不同類型的抗菌藥物，如頭孢菌素類、氨基糖苷類、氟喹諾酮類等)菌株有137株，占66.50%。

3 討 論

鮑曼不動(dòng)桿菌近幾年來已成為醫(yī)院感染的重要致病菌之一，且呈逐年增加的趨勢。該菌廣泛存在于醫(yī)院環(huán)境中，ICU患者長時(shí)間使用機(jī)械通氣、氣管插管等，極易獲得鮑曼不動(dòng)桿菌的感染[1-2]。本院87.40%鮑曼不動(dòng)桿菌分離自痰標(biāo)本，高于邱春嫦等[3]報(bào)道。31.60%的鮑曼不動(dòng)桿菌來自ICU。因此，作為重癥患者的ICU等科室應(yīng)加強(qiáng)對環(huán)境的消毒，注重醫(yī)護(hù)人員的手衛(wèi)生，阻斷各種可能的傳播媒介，降低鮑曼不動(dòng)桿菌在醫(yī)院的交叉感染。

氨基糖苷類抗菌藥物作為一類高效、廣譜的抗菌藥物，是臨床上用于治療革蘭陰性菌所致嚴(yán)重感染的重要藥物[4]。隨著廣譜抗菌藥物的大量使用及不合理用藥而導(dǎo)致的多重耐藥的鮑曼不動(dòng)桿菌的比例在不斷增加，特別是近年來由于碳青霉烯類抗菌藥物的廣泛使用，出現(xiàn)了對常規(guī)抗菌藥物全部耐藥的菌株。本研究206株鮑曼不動(dòng)桿菌中多重耐藥菌株達(dá)137株，占66.50%，高于王山梅等[5]的報(bào)道，說明多重耐藥鮑曼不動(dòng)菌的檢出率的上升不僅僅是該醫(yī)院的個(gè)案，已成為一個(gè)廣泛的公共衛(wèi)生問題。

2010～2012年206株鮑曼不動(dòng)桿菌總的耐藥率均呈現(xiàn)比較高的耐藥狀況，每種抗菌藥物的耐藥率均逐年增高。除頭孢哌酮/舒巴坦以外，其余9種常用抗菌藥物耐藥嚴(yán)重，僅亞胺培南耐藥率低于50.00%，其余耐藥率均超過50.00%，且部分藥物有逐年增加趨勢。美羅培南耐藥率范圍最大為2.40%～69.40%。鮑曼不動(dòng)桿菌對喹諾酮類藥物高耐藥率的機(jī)制，主要是鮑曼不動(dòng)桿菌的gyrA 和parC基因雙突變導(dǎo)致拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ和Ⅳ結(jié)構(gòu)改變[7-8]。氨基糖苷類藥物慶大霉素的耐藥率范圍次之為72.70%，其同類藥物阿米卡星的耐藥率也逐年增加，該菌對氨基糖苷類藥物的耐藥主要機(jī)制是修飾酶的產(chǎn)生[9-10]。該菌對多數(shù)β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物均表現(xiàn)較高的耐藥率，除頭孢哌酮/舒巴坦、頭孢吡肟外，其余的耐藥率都超過50.00%。鮑曼不動(dòng)桿菌對β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物的耐藥機(jī)制主要是抗菌藥物誘導(dǎo)細(xì)菌產(chǎn)生β-內(nèi)酰胺酶。

鮑曼不動(dòng)桿菌對亞胺培南3年的耐藥率高低起伏，有著顯著的變化，耐藥率明顯高于邱春嫦等[3]調(diào)查的2002～2006年全院平均6%的耐藥率，這可能與醫(yī)院亞胺培南在臨床的廣泛使用有關(guān)。頭孢哌酮/舒巴坦的抗菌活性僅次于亞胺培南，3年的耐藥率均低于50.00%，但也是逐年在增加而與其他幾種藥物比較其的耐藥率是最低的，因此頭孢哌酮/舒巴坦可作為鮑曼不動(dòng)桿菌感染的一線首選藥。頭孢哌酮/舒巴坦的抗菌活性明顯高于哌拉西林/他唑巴坦、阿莫西林/克拉維酸，這可能與舒巴坦唯一不可逆的β-內(nèi)酰胺酶抑制劑，不僅對質(zhì)粒介導(dǎo)的β-內(nèi)酰胺酶有較強(qiáng)作用，而且對染色體產(chǎn)生的誘導(dǎo)酶也有較好作用有關(guān)；同時(shí)舒巴坦還能作用于細(xì)菌的青霉素蛋白結(jié)合酶2(PBP2)，多數(shù)青霉素類和頭孢菌素類則主要作用于青霉素蛋白結(jié)合酶1(PBP1)和青霉素蛋白結(jié)合酶3(PBP3)。但該菌對哌拉西林/他唑巴坦、阿莫西林/克拉維酸維持較高的耐藥率，表明該菌對β-內(nèi)酰胺類復(fù)合制劑的耐藥性也已增強(qiáng)，須引起高度重視。

鮑曼不動(dòng)桿菌已成為醫(yī)院感染的重要病原菌，并有逐年增加趨勢，且對常用抗菌藥物耐藥率較高。提示醫(yī)師應(yīng)根據(jù)細(xì)菌藥敏結(jié)果，合理選用抗菌藥物，同時(shí)應(yīng)加強(qiáng)對病房的消毒隔離，以及醫(yī)護(hù)人員的無菌操作，降低醫(yī)院內(nèi)的交叉感染，減少耐藥菌株的出現(xiàn)。

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10.3969/j.issn.1673-4130.2016.07.044 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：1673-4130(2016)07-0973-03

2015-11-25)