黃玉開，劉 銳，顧曉瓊，梁肖云，曾蘭蘭，劉 非，梁綺華

(1.廣州市婦女兒童醫(yī)療中心檢驗(yàn)科，廣東廣州 510623；2.仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院

輕工食品學(xué)院，廣東廣州 510225 )

·論 著·

13 442例兒童末梢血白細(xì)胞及五分類參數(shù)參考范圍調(diào)查

黃玉開1，劉 銳2，顧曉瓊1，梁肖云1，曾蘭蘭1，劉 非1，梁綺華1

(1.廣州市婦女兒童醫(yī)療中心檢驗(yàn)科，廣東廣州 510623；2.仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院

輕工食品學(xué)院，廣東廣州 510225 )

目的 對13 442例健康兒童末梢血白細(xì)胞及五分類參數(shù)參考范圍調(diào)查分析，為臨床診斷提供參考。方法 按照健康兒童篩選標(biāo)準(zhǔn)及血液疾病、感染性疾病、服藥史等排除標(biāo)準(zhǔn)，選擇來自廣州市婦女兒童醫(yī)療中心保健科進(jìn)行體檢和相關(guān)檢查均正常的健康者，年齡1個月至7歲的兒童13 442例，采用日本Sysmex XS-800i 型全自動血細(xì)胞分析儀及配套試劑進(jìn)行白細(xì)胞分析參數(shù)檢測。結(jié)果 白細(xì)胞及五分類參數(shù)均不符合正態(tài)分布；經(jīng)Mann-Whitney檢驗(yàn)，不同性別兒童間比較，WBC、BASO#、NEU#參數(shù)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，而LYM#、MONO#、EOS#參數(shù)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)，其中LYM#女性顯著高于男性，MONO#和EOS#男性顯著高于女性；經(jīng)Kruskal-Wallis檢驗(yàn)，不同年齡組進(jìn)行比較，白細(xì)胞及五分類參數(shù)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)，其中WBC、LYM#、MONO#、EOS#參數(shù)隨年齡的增加而降低，NEU#隨年齡的增加而不斷提高，而BASO#在4歲前隨年齡的增加而下降，4歲后隨年齡的增加而增加。結(jié)論 應(yīng)該在充分考慮性別、年齡等因素的基礎(chǔ)上制定1個月至7歲兒童獨(dú)立的白細(xì)胞類參數(shù)的參考值范圍。

健康兒童； 白細(xì)胞； 參考區(qū)間

白細(xì)胞(WBC)指的是一類由骨髓中的造血干細(xì)胞分化而來的一種抵抗感染排斥異物的免疫細(xì)胞。根據(jù)形態(tài)和功能又可以將白細(xì)胞分成五類，分別為淋巴細(xì)胞(LYM#)、中性粒細(xì)胞(NEU#)、單核細(xì)胞(MONO#)、嗜酸粒細(xì)胞(EOS#)和嗜堿性粒細(xì)胞(BASO#)[1]。各類白細(xì)胞檢測數(shù)據(jù)是血液檢測中的最為重要的項(xiàng)目之一。其值是臨床醫(yī)生對身體狀況、疾病判斷及診治的重要依據(jù)?，F(xiàn)在兒童末梢血白細(xì)胞類檢測項(xiàng)目正常參考值范圍直接套用健康成人的參考值范圍[2]。白細(xì)胞類項(xiàng)目檢測值往往受到多種生理因素的影響。兒童處于生長發(fā)育最為快速階段，這個時(shí)期往往也會引起血液檢測中的各個指標(biāo)的劇烈變化[3]。研究兒童階段白細(xì)胞類參數(shù)特點(diǎn)具有重要意義。雖然國內(nèi)關(guān)于兒童血常規(guī)參數(shù)報(bào)道的文獻(xiàn)較多，其中僅僅包含白細(xì)胞總數(shù)等少量指標(biāo)[4-7]。本文調(diào)查了年齡階段處于1個月至7歲之間的13 442例健康兒童血液樣本末梢血檢測結(jié)果，對WBC、LYM#、NEU#、單核細(xì)胞的數(shù)目MONO#、EOS#、BASO#6個白細(xì)胞類檢測項(xiàng)目進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料 調(diào)查人群來自2012年～2014年來本院保健科進(jìn)行體檢保健的健康兒童，共13 442例。年齡范圍出生1個月至7歲。經(jīng)體檢證明生長發(fā)育正常，無慢性病史，無營養(yǎng)不良，無貧血史。

1.2 儀器與試劑 Sysmex XS-800i全自動血液分析儀及原裝配套試劑。

1.3 測量方法 所用的儀器每半年由工程師進(jìn)行校準(zhǔn)，要求結(jié)果均在范圍內(nèi)，每年均參加衛(wèi)生部和廣東省的室間質(zhì)評，要求結(jié)果在范圍內(nèi)。每月進(jìn)行1次新鮮全血的比對試驗(yàn)，每天均進(jìn)行2次室內(nèi)質(zhì)控的測定，早上8點(diǎn)開機(jī)及下午4點(diǎn)均用3個濃度水平e-CHECK質(zhì)控品對儀器進(jìn)行質(zhì)控，在控后再進(jìn)行操作。由熟練的工作人員采集末梢循環(huán)良好的左手無名指內(nèi)側(cè)血液100 μL,采血前用碘伏消毒，待干，并棄去第一滴血，然后加入含EDTA-K2的抗凝管中，將抗凝劑和血液充分混勻后室溫放置，嚴(yán)格按照儀器的操作規(guī)程進(jìn)行測定，樣品均在2 h內(nèi)完成測定。

1.4 檢查的參數(shù) WBC、LYM#、NEU#、MONO#、EOS#和BASO#。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 首先采用Tukey′s Hinges判斷數(shù)據(jù)離群值，并將其刪除。然后利用直方圖、QQ圖、PP圖及Kolmogorov-Smirnov檢測方法等判斷各個參數(shù)數(shù)據(jù)是否符合正態(tài)分布。對呈正態(tài)分布的參數(shù)，按照方差分析或者t檢驗(yàn)進(jìn)行分析，并計(jì)算其正常參考值范圍，對不是正態(tài)分布的參數(shù)，根據(jù)實(shí)際情況選擇不同的非參模型進(jìn)行分析。所有的數(shù)據(jù)處理采用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行計(jì)算。

2 結(jié) 果

2.1 各個參數(shù)分布 首先判斷白細(xì)胞類參數(shù)分布進(jìn)行判斷，是正確選擇統(tǒng)計(jì)方法的基礎(chǔ)。只有正態(tài)分布且方差齊整的情況下，才可以使用T檢驗(yàn)或F檢驗(yàn)的統(tǒng)計(jì)方法。通過直方圖、PP圖及QQ圖直觀判斷，所有白細(xì)胞類參數(shù)均偏離正態(tài)分布。對所有參數(shù)進(jìn)行Kolmogorov-Smirnov檢測，其P<0.001，計(jì)算其偏度系數(shù)Skewness值及峰度系數(shù)Kurtosis，均不滿足正態(tài)分布要求，其結(jié)果與中外文獻(xiàn)報(bào)道相符[3,7-8]。根據(jù)其形狀及偏度系數(shù)值判斷，所有的參數(shù)分布均為正偏態(tài)分布。對所有數(shù)據(jù)進(jìn)行對數(shù)、開方等變換后，數(shù)據(jù)也無法滿足正態(tài)分布及方差齊整，所以在后面的分析中，如果是兩組數(shù)據(jù)進(jìn)行比較，采用了Mann-Whitney非參檢驗(yàn)方法，而多組數(shù)據(jù)比較采用了Kruskal-Wallis非參檢驗(yàn)方法。

2.2 不同性別組比較結(jié)果 性別對整體數(shù)據(jù)影響，采用非參統(tǒng)計(jì)Mann-Whitney進(jìn)行兩水平統(tǒng)計(jì)分析，數(shù)據(jù)分析結(jié)果顯示W(wǎng)BC、BASO#及NEU#參數(shù)的P值大于0.05，所以不同性別組間數(shù)據(jù)差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而EOS#、LYM#及MONO#參數(shù)的P值均小于0.001，說明不同性別組之間存在的差異具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。EOS#值參數(shù)與MONO#值參數(shù)中，男性組顯著大于女性組。而LYM#參數(shù)中，女性組顯著大于男性組。

2.3 不同年齡組比較結(jié)果 年齡對5個參數(shù)數(shù)據(jù)的比對，采用非參統(tǒng)計(jì)Kruskal-Wallis進(jìn)行多水平統(tǒng)計(jì)分析，所有比較項(xiàng)目的P均小于0.001，年齡對白細(xì)胞類的6個檢測參數(shù)的影響非常顯著。為了進(jìn)一步研究年齡對各個指標(biāo)的具體影響，給出合理的區(qū)段劃分及合理的參考指標(biāo)范圍，首先用1歲組與2歲組進(jìn)行兩水平的非參數(shù)的Mann-Whitney的檢測，如果兩組之間無顯著性差異，則將兩組合為一組后，再與3歲組進(jìn)行兩水平檢驗(yàn)，但是如果兩組差異顯著，則再選擇2歲組與3歲組進(jìn)行兩水平檢驗(yàn)，以此類推直至所有年齡組全部比較完。然后根據(jù)結(jié)果對年齡組進(jìn)行劃分合并后，再進(jìn)行多樣本的Kruskal-Wallis檢測方法中的逐步降低(stepwise step-down)的方法進(jìn)行分析。由于性別對WBC、BASO#和NEU# 3個參數(shù)無顯著性影響，因此在年齡階段的劃分上，不再考慮性別對結(jié)果的影響。而性別對EOS#、LYM#、MONO# 3個參數(shù)具有非常顯著的影響，因此，針對這3個參數(shù)，筆者相同性別下的年齡比較統(tǒng)計(jì)分析。其分組及統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果如表1所示。

表1 根據(jù)性別和年齡分組后的參考區(qū)間(×109/L)

續(xù)表1 根據(jù)性別和年齡分組后的參考區(qū)間(×109/L)

3 討 論

兒童處于一個快速生長發(fā)育過程，且其生長環(huán)境也往往伴隨其不同成長的階段而劇烈變化。這個階段中，其血液中的多種指標(biāo)均會受到年齡和性別等因素的影響[3,9-10]。其抵御疾病的免疫系統(tǒng)也是在逐漸成熟的變化過程，所以這個階段，其血液中的白細(xì)胞類指標(biāo)也會隨年齡的增加而劇烈變化。準(zhǔn)確掌握白細(xì)胞種類隨年齡的增加而變化的規(guī)律，對于了解兒童發(fā)育臨床疾病診斷等具有重要意義。

進(jìn)行這方面的研究，遇到的首要問題是獲得準(zhǔn)確的大樣本數(shù)據(jù)。本研究收集了來廣州市婦女兒童醫(yī)療中心保健科進(jìn)行保健及健康體檢的1個月至7歲兒童的末梢血樣本，并根據(jù)體檢結(jié)果剔除了具有生長發(fā)育遲緩、慢性病史、營養(yǎng)不良、貧血等非健康樣本，保證了數(shù)據(jù)的真實(shí)、可靠性，并以年為一階段收集樣本進(jìn)行分析。

已經(jīng)發(fā)表了的關(guān)于兒童末梢血參數(shù)調(diào)查研究的文獻(xiàn)，大部分研究僅僅關(guān)注WBC等少量指標(biāo)[4-7]。而WBC不能反映白細(xì)胞五分類各個參數(shù)的實(shí)際情況。本研究表明不同性別的兒童，雖然WBC差異并無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，這與前期報(bào)道結(jié)果一致[6-7,11]。但是EOS#、MONO#及LYM# 3個參數(shù)差異卻具有非常顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。WBC值隨著年齡的增加而降低，而五分類中的NEU#則隨歲年齡的增加而不斷增加。因此有必要對白細(xì)胞及五分類的所有參數(shù)進(jìn)行詳細(xì)的研究分析。

本研究結(jié)果顯示了在1個月至7歲兒童階段，性別對WBC、BASO#及NEU#整體上影響不大，但是對EOS#、MONO#和LYM#的差異卻具有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。其中EOS#和MONO#這2個參數(shù)的男性兒童參考值范圍要高于女性兒童，LYM#參數(shù)的女性兒童參考值范圍要高于男性兒童。而在這個成長階段內(nèi)，年齡對所有的白細(xì)胞及五分類參數(shù)均具有重要的影響。WBC、BASO#、MONO#、LYM#值均隨著年齡的增加而降低，NEU#則隨歲年齡的增加而不斷增加。前期研究末梢血參數(shù)的報(bào)道文獻(xiàn)，并沒有考慮或者是忽略了年齡對末梢血參數(shù)的影響，將覆蓋的所有年齡階段作為一個整體進(jìn)行研究，提出參考范圍[4,6,7]。本研究結(jié)果建議在臨床診斷上，應(yīng)該充分考慮到性別、年齡上的差異，以避免作出錯誤的判斷。

雖然處于1個月至7歲之間的兒童，性別的特征并不明顯，但是性別仍然顯著影響一些白細(xì)胞參數(shù)。甚至有些白細(xì)胞參數(shù)如EOS#在男、女組中，隨年齡增長變化的趨勢并不相同。很多文獻(xiàn)也報(bào)道了兒童階段性別對一些指標(biāo)具有顯著性的影響[6,10,12]。對于兒童階段不同性別造成的檢測參數(shù)的不同原因及結(jié)果，需要更多的研究與關(guān)注。

在各個生理生化指標(biāo)劇烈變化的兒童生長階段，需要收集更為詳細(xì)的資料，如準(zhǔn)確到月的年齡資料、身高、體質(zhì)量、生長環(huán)境、患病史、生長環(huán)境、檢測方法等，進(jìn)行更為深入詳細(xì)的研究，從而科學(xué)劃分分組，制定合理的正常參考區(qū)間，將具有重要的醫(yī)學(xué)價(jià)值。

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Investigation on reference ranges of peripheral white blood cells and five classification parameters among 13 442 children

HuangYukai1,LiuRui2,GuXiaoqiong1,LiangXiaoyun1,ZengLanlan1,LiuFei1,LiangQihua1

(1.DepartmentofClinicalBiochemistry，GuangzhouMunicipalWomenandChildrenMedicalCenter,Guangzhou,Guangdong510623,China; 2.CollegeofLightIndustryFood,ZhongkaiUniversityofAgricultureandEngineering,Guangzhou,Guangdong510225,China)

Objective To investigate the reference ranges of peripheral white blood cells(WBC) and five classification parameters among 13 442 apparently healthy children to provide reference for clinical diagnosis.Methods A total of 13 442 apparently healthy children aged from 1 month old to 5 years undergoing the health physical examination in the healthcare department of the Guangzhou Municipal Women and Children Medical Center were chosen according to the healthy children screening standard and the exclusion standard of hematological diseases,infection diseases and drug administration history.The WBC analysis and its parameters detection were performed by using the Sysmex XS-800i automatic blood cell analyzer.Results WBC and its five classification parameters were not accorded with the normally distribution.By the Mann-whitney test,no statistically significant differences in WBC,BASO# and NEU# were detected between different genders of children (P>0.05),while the differences in LYM#,MONO# and EOS# had statistical significance(P<0.001),in which the LYM# level in females was significantly higher than that in males,while the MONO# and EOS# levels in females were lower than those in males; By the Kruskal-Wallis test，WBC and five classification parameters had statistically significant differences among different age groups (P<0.001).The parameters of WBC,LYM#,MONO# and EOS# were decreased with age increase,while NEU# was constantly increased with age increase and BASO# was decreased with age increase before 4 years old.Conclusion All factors such as gender,age should be The independent reference rangesl of WBC parameters among children aged from 1 month old to 7 years old should be formulated on the basis of fully considering the factors such as gender,age.

healthy child; white blood cell; reference interval

黃玉開，女，主管技師，主要從事醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)研究。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.07.008 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：1673-4130(2016)07-0886-04

2015-11-18)